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上海莼試生物技術(shù)有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品: ELISA試劑盒,ELISA試劑盒價(jià)格,ELISA試劑盒報(bào)價(jià) |
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參考價(jià) | ¥1-¥5800 | /件 |
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型號(hào)
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品牌
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廠(chǎng)商性質(zhì)
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所在地
上海市
更新時(shí)間:2024-10-06 12:33:26瀏覽次數(shù):65
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產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 組織來(lái)源 | 海綿體組織 |
---|---|---|---|
生長(zhǎng)特性 | 貼壁 | 細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 |
換液頻率 | 每2-3天換液一次 | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
商品屬性:
組織來(lái)源 | 海綿體組織 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
產(chǎn)品貨號(hào) | CS-X3321 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
小鼠海綿體平滑肌分離自海綿體組織;海綿體,又稱(chēng)海綿體肌,是硬的平滑肌和結(jié)締組織。海綿體是一種勃起組織,外面包有堅(jiān)厚的白膜,內(nèi)部由結(jié)締組織和平滑肌組成海綿狀支架,其腔隙與血管相通。它主要包括海綿體內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞和成纖維細(xì)胞3種細(xì)胞成分。其中平滑肌細(xì)胞和成纖維細(xì)胞鑲嵌于海綿體細(xì)胞外基質(zhì)的膠原中,在消化海綿體組織時(shí),膠原酶的作用主要是松解海綿體內(nèi)皮細(xì)胞與基膜的聯(lián)系,破壞海綿體內(nèi)皮細(xì)胞間的緊密連接。因此可用膠原酶分離出海綿體平滑肌細(xì)胞。平滑肌,是非橫紋肌的肌肉組織。分布在人體動(dòng)脈和靜脈血管壁、膀胱、子宮、男性和女性生殖道、消化道、呼吸道、眼睛的睫狀肌和虹膜。平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見(jiàn)細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng),高低起伏;細(xì)胞密度低時(shí),常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí),則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn)。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠海綿體平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠海綿體平滑肌采用膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
原代細(xì)胞VS細(xì)胞系:
用酶或機(jī)械方法直接從人或動(dòng)物組織中分離出來(lái)的細(xì)胞。嚴(yán)格來(lái)說(shuō),從機(jī)體分離出來(lái)到傳代之前的細(xì)胞稱(chēng)為原代細(xì)胞,絕大部分的原代細(xì)胞在體外可以分裂10-15次(這與細(xì)胞的端粒長(zhǎng)短有關(guān)),再加上取材,成本等因素,通常會(huì)把培養(yǎng)的第一代到第十代以?xún)?nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱(chēng)為原代細(xì)胞。
原代細(xì)胞一般傳至10代左右,大部分細(xì)胞衰老死亡,但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度過(guò)“危機(jī)"而繼續(xù)傳下去,存活的細(xì)胞一般能夠傳到40-50代,叫細(xì)胞株。當(dāng)50代以后又會(huì)出現(xiàn)“危機(jī)",這時(shí)有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c(diǎn),從而可能無(wú)限制地傳代下去,稱(chēng)為細(xì)胞系。
也有認(rèn)為細(xì)胞系指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。也指可長(zhǎng)期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。由此便引申出了后來(lái)的有限細(xì)胞系、無(wú)限細(xì)胞系,因此,細(xì)胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細(xì)胞,廣義是指可傳代的細(xì)胞。而細(xì)胞株是通過(guò)選擇法或克隆形成法,從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的單一細(xì)胞稱(chēng)為細(xì)胞株。
細(xì)胞系具有容易培養(yǎng)、種類(lèi)多、價(jià)格便宜、無(wú)限傳代等優(yōu)點(diǎn),也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯(cuò)誤鑒定及交叉污染的問(wèn)題。
原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟:
1、準(zhǔn)備:取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺(tái)面,紫外線(xiàn)消毒20分鐘。開(kāi)始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2、布局:點(diǎn)燃酒精燈,安裝吸管帽。
3、處理組織:把組織塊置于燒杯中,用Hanks液漂洗2-3次,去除血污;如懷疑組織可能污染,可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。
5、消化:或用恒溫水浴,或置于37℃溫箱消化均可,消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動(dòng)一次,如用電磁恒溫?cái)嚢杵飨?。消化時(shí)間依組織塊的大小和組織的硬度而定。
6、分離:在消化過(guò)程中見(jiàn)消化液發(fā)混濁時(shí),可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀(guān)察,如組織已分散成細(xì)胞團(tuán)或單個(gè)細(xì)胞,立即終止消化,隨即通過(guò)適宜不銹鋼篩,濾掉尚未充分消化開(kāi)的組織塊。低速(500-1000轉(zhuǎn)/分)離心消化液5分鐘,吸出上清,加入適量含有血清的培養(yǎng)液。
7、計(jì)數(shù):用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),如細(xì)胞懸液細(xì)胞密度過(guò)大,再補(bǔ)加培養(yǎng)液調(diào)整后,分裝入培養(yǎng)瓶中。對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來(lái)說(shuō),pH要求在7.2-7.4范圍,培養(yǎng)液呈微紅色,如顏色偏黃,說(shuō)明液體變酸,可用NaHCO3調(diào)整。
8、培養(yǎng):置于37℃溫箱培養(yǎng),如用CO2溫箱培養(yǎng),瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞,紗布塞易生霉菌,每次換液時(shí)需要換新塞。
公司正在銷(xiāo)售的產(chǎn)品:
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小鼠海綿體平滑肌細(xì)胞嗜鉻蛋白A(CHGA)重組蛋白 Recombinant Chromogranin A (CHGA)
CST7 Protein Human 重組人 Cystatin 7 / CST7 蛋白 (His 標(biāo)簽)
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HA Protein H5N8 重組甲型流感 H5N8 (A/duck/NY/191255-59/2002) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
IL2重組人 IL2 / Interleukin-2 蛋白 (L35M, L36S, C142A) Protein