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上海莼試生物技術有限公司
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上海市
更新時間：2024-09-30 13:28:49瀏覽次數：96
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本產品僅供科學實驗研究使用! 不能用于臨床或動物診斷！
產品名稱 | 組織來源 | 直腸 | |
產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 生長特性 | 貼壁 |
細胞形態 | 上皮細胞樣 | 產品貨號 | CS-X3480 |
細胞簡介：
大鼠直腸黏膜上皮分離自直腸組織；直腸為大腸的未段，位于小骨盆內。上端平第3骶椎處接續乙狀結腸，沿骶骨和尾骨的前面下行，穿過盆膈，下端以而終。直腸上端的大小似結腸，其下端擴大成直腸壺腹，是糞便排出前的暫存部位，下端變細接肛管。直腸在盆腔內的位置與骶椎腹面關系密切，與骶椎有相同的曲度。直腸周圍多脂肪、無縱帶，位于膀胱和生殖器官的背側。直腸的動脈血供主要是來自腸系膜下動脈的直腸上動脈，來自髂內動脈的直腸中動脈和來自髂內動脈的直腸下動脈。腸黏膜上皮細胞是機體內外環境的重要屏障，持續暴露于大量抗原中，也是機體面對病原微生物的第一道防線。因此，腸黏膜上皮細胞除有吸收、分泌和轉運等重要生理功能之外，在黏膜先天性和獲得性免疫防御機制中也起著重要作用。腸黏膜上皮細胞作為首先接觸抗原的細胞，在黏膜免疫反應的起始階段發揮關鍵作用，它決定黏膜免疫反應的發生、性質和強度。
原代細胞培養條件：
?溫度?：通常在37℃下進行，以模擬體內溫度。
?pH值?：培養液的pH值應保持在7.2~7.4之間，以維持細胞的正常生理狀態。
?氣體環境?：在含有5% CO2的培養箱中進行，以促進細胞生長。
?培養基?：使用含有適當營養成分的培養基，如Eagle's MEM、DMEM等。
?無菌操作?：整個培養過程需要在無菌條件下進行，以防止污染。
方法簡介：
實驗室分離的大鼠直腸黏膜上皮經Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
質量檢測：
實驗室分離的大鼠直腸黏膜上皮采用先機械分離法、后膠原酶消化法并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。
培養信息：
包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態：上皮細胞樣
傳代特性：可傳1-2代
消化液：0.25%
培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
原代細胞培養的具體操作步驟如下：
?組織處理?：將動物組織從機體中取出，剪碎后用等消化酶處理，使其分散成單個細胞。
?細胞計數?：使用血細胞計數器或其他方法對細胞進行計數，確保細胞密度適中。
?接種培養?：將細胞懸液接種到培養瓶中，加入適量的培養基，置于37℃、5% CO2的培養箱中培養。
?換液和傳代?：定期更換培養液，當細胞達到一定密度時進行傳代培養，以維持細胞的生長狀態。
原代細胞的4種培養方法：
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。
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