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原代細胞培養(yǎng)的具體步驟：

1、準備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：點燃酒精燈，安裝吸管帽。

3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。

5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動一次，如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6、分離：在消化過程中見消化液發(fā)混濁時，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細胞團或單個細胞，立即終止消化，隨即通過適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500-1000轉(zhuǎn)/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

7、計數(shù)：用計數(shù)板計數(shù)，如細胞懸液細胞密度過大，再補加培養(yǎng)液調(diào)整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數(shù)細胞來說，pH要求在7.2-7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說明液體變酸，可用NaHCO3調(diào)整。

8、培養(yǎng)：置于37℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時需要換新塞。

大鼠心肌細胞

商品屬性：

細胞簡介：

大鼠心肌分離自心臟組織；心臟是脊椎動物身體中重要的一個器官，主要功能是為血液流動提供壓力，把血液運行至身體各個部分。心臟由心肌構(gòu)成，左心房、左心室、右心房、右心室四個腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開，故互不相通，心房與心室之間有瓣膜（房室瓣），這些瓣膜使血液只能由心房流入心室，而不能倒流。心臟的作用是推動血液流動，向器官、組織提供充足的血流量，以供應(yīng)氧和各種營養(yǎng)物質(zhì)，并帶走代謝的終產(chǎn)物（如二氧化碳、無機鹽、尿素和尿酸等），使細胞維持正常的代謝和功能。心肌細胞呈菱形、多邊形等不規(guī)則形狀；細胞培養(yǎng)2h后開始貼壁，呈梭形；到12h左右，細胞開始伸出偽足，呈菱形、多角形；細胞分離培養(yǎng)48h以后，大部分伸出偽足、呈巴掌狀，部分心肌細胞會出現(xiàn)搏動；心肌細胞為終末分化細胞，在體外不增殖。體外培養(yǎng)的心肌細胞可保持結(jié)構(gòu)及功能上的某些特點，并具有自發(fā)性節(jié)律搏動，且心肌細胞的培養(yǎng)具有簡便、定量、重復性好以及不受神經(jīng)體液因素的影響等特點。利用培養(yǎng)的心肌細胞在探索非血液動力學因素所致的心肌肥厚的調(diào)節(jié)，研究心肌細胞的生物力學、凋亡、受體下調(diào)、缺血預處理、信號通路、對作用于心臟的新藥進行篩選并對其安全性進行評價以及從培養(yǎng)的心肌細胞中提取有價值的生物因子等方面具有廣闊的應(yīng)用前景，對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠心肌經(jīng)α-Sarcometric actin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的大鼠心肌采用膠原酶-聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法，并用化學試劑抑制法篩選制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性 屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細胞VS細胞系：

用酶或機械方法直接從人或動物組織中分離出來的細胞。嚴格來說，從機體分離出來到傳代之前的細胞稱為原代細胞，絕大部分的原代細胞在體外可以分裂10-15次(這與細胞的端粒長短有關(guān))，再加上取材，成本等因素，通常會把培養(yǎng)的第一代到第十代以內(nèi)的細胞統(tǒng)稱為原代細胞。

原代細胞一般傳至10代左右，大部分細胞衰老死亡，但是有極少數(shù)的細胞能夠度過“危機"而繼續(xù)傳下去，存活的細胞一般能夠傳到40-50代，叫細胞株。當50代以后又會出現(xiàn)“危機"，這時有部分細胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c，從而可能無限制地傳代下去，稱為細胞系。

也有認為細胞系指原代細胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細胞。由此便引申出了后來的有限細胞系、無限細胞系，因此，細胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細胞，廣義是指可傳代的細胞。而細胞株是通過選擇法或克隆形成法，從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標志物的單一細胞稱為細胞株。

細胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價格便宜、無限傳代等優(yōu)點，也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯誤鑒定及交叉污染的問題。

公司正在銷售的產(chǎn)品：

豬氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human activated protein C resistance (APCR) ELISA Kit 人活化蛋白C抵抗素(APCR)ELISA試劑盒

RabbitapoproteinA1,apo-A1ELISAKit 兔載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforAO(HumanAcrineOrange)ELISAKit人橙規(guī)格：48T/96T

血栓素B2(TXB2)高效液相色譜法定量檢測試劑盒20次

PorcineIerleukin1,IL-1ELISAKit豬白介素1(IL-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

轉(zhuǎn)化生長因子 -β2(TGF- b 2)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   奧地利 Bender

血栓調(diào)節(jié)蛋白 (Thrombomodulin/sCD141)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   法國 Diaclone

基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子 -1(TIMP-1)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國 R&D

基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子 -2(TIMP-2)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國 R&D

大鼠活性氧(ROS)ELISA試劑盒 ，英文名： ROS ELISA Kit

Rabbit ierleukin 17 (IL-17) ELISA Kit 兔白介素17(IL-17)ELISA試劑盒

猴痘病毒(MPV)核酸檢測試劑盒 48T

CLIAKitforMouseQalymphocyteaigen2region,Qa-2ELISAKit小鼠Qa淋巴細胞抗原2規(guī)格：48T/96T

體液高密度脂蛋白(HDL-Cholesterol)酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒20次

ELISAKit5-人5核苷酸酶規(guī)格：48T/96T

TNFSF4重組食蟹猴 OX-40L / TNFSF4 蛋白 (Fc 標簽) Protein

ING1/p33(inhibitor of growth gene 1 0.5mgING1/p33(inhibitor of growth gene 1) 生長抑制因子基因1抗原

DPP10重組人 DPP10 / DPRP3 蛋白 (His 標簽) Protein

BMPR1B Protein Human 重組人 BMPR1B / ALK-6 蛋白 (Fc 標簽)

SERPINB6B Protein Mouse 重組小鼠 Serpinb6b 蛋白 (His 標簽)

大鼠心肌細胞ING1/p33(inhibitor of growth gene 1 0.5mgING1/p33(inhibitor of growth gene 1) 生長抑制因子基因1抗原

BMPR1B Protein Human 重組人 BMPR1B / ALK-6 蛋白 (Fc 標簽)

TNFSF4重組食蟹猴 OX-40L / TNFSF4 蛋白 (Fc 標簽) Protein

SERPINB6B Protein Mouse 重組小鼠 Serpinb6b 蛋白 (His 標簽)

DPP10重組人 DPP10 / DPRP3 蛋白 (His 標簽) Protein