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原代細胞培養條件：

?溫度?：通常在37℃下進行，以模擬體內溫度。

?pH值?：培養液的pH值應保持在7.2~7.4之間，以維持細胞的正常生理狀態。

?氣體環境?：在含有5% CO2的培養箱中進行，以促進細胞生長。

?培養基?：使用含有適當營養成分的培養基，如Eagle's MEM、DMEM等。

?無菌操作?：整個培養過程需要在無菌條件下進行，以防止污染。

本產品僅供科學實驗研究使用! 不能用于臨床或動物診斷！

細胞簡介：

大鼠心肌成纖維分離自心臟組織；心臟由心肌細胞和非心肌細胞組成，非心肌細胞占細胞總數的70%，其中90%以上的非心肌細胞由心肌成纖維細胞組成。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質嗜弱堿性，具明顯的蛋白質合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現跟纖維細胞的互相轉化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的心肌成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。近年來，人們逐漸了解到非心肌細胞不僅對心肌細胞具有結構上的支持、保護作用，而且還具有自分泌和旁分泌功能，影響心肌細胞的結構和生理功能；心肌成纖維細胞主要功能為對心肌細胞起結構支持作用并負責細胞基質外的合成，當心肌損傷時能產生旁分泌生長因子。心肌成纖維細胞是心臟結締組織中常見的細胞，可合成和分泌膠原纖維、彈性纖維、網狀纖維及有機基質，并且在外傷等因素刺激下，部分纖維細胞可重新轉變為幼稚的成纖維細胞，其功能活動也得以恢復，參與組織損傷后的修復。因此，對心肌成纖維細胞的生理學研究成為現代心血管領域研究的一個重點。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠心肌成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

質量檢測：

公司實驗室分離的大鼠心肌成纖維采用膠原酶-聯合消化結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。

培養信息：

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態佳

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細胞培養的具體操作步驟如下：

?組織處理?：將動物組織從機體中取出，剪碎后用等消化酶處理，使其分散成單個細胞。

?細胞計數?：使用血細胞計數器或其他方法對細胞進行計數，確保細胞密度適中。

?接種培養?：將細胞懸液接種到培養瓶中，加入適量的培養基，置于37℃、5% CO2的培養箱中培養。

?換液和傳代?：定期更換培養液，當細胞達到一定密度時進行傳代培養，以維持細胞的生長狀態。

公司正在出售的產品：

豬血小板衍生生長因子(PDGF)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human activated Hageman factor (F XII a) ELISA Kit 人活化Ⅻ(FⅫa)ELISA試劑盒

RabbitapoproteinB100,apo-B100ELISAKit 兔載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

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PorcineIerleukin1receptoraagonist,IL-1raELISAKit豬白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒規格：96T/48T

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豬主要組織相容性復合體Ⅲ類(MHCⅢ/SLAⅢ)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

豬主要組織相容性復合體Ⅱ類(MHCⅡ/SLAⅡ)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠骨保護素(OPG)ELISA試劑盒 ，英文名： OPG ELISA Kit

Rabbit ierleukin 2 (IL-2) ELISA Kit 兔子白介素2(IL-2)ELISA試劑盒

人細小病毒(B19)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMIP-3Beta/ELC/CCL19(Mousemacrophageinflammatoryprotein3Beta)ELISAKit小鼠巨噬細胞炎性蛋白3β規格：48T/96T

體液結構型神經元合成酶(cNOS/NOS1/nNOS)活性比色法定量檢測試劑盒20次

ELISAKitIL-6犬白介素6規格：48T/96T

MBL1重組大鼠 MBL1 蛋白 (Fc 標簽) Protein

DYKDDDDK Tag(CT 0.5mgDYKDDDDK Tag(CT)/Flag-Tag 標簽DYKDDDDK Tag分支肽

GOLM1重組人 GOLM1 / GP73 蛋白 (His 標簽) Protein

BMPR1B Protein Human 重組人 BMPR1B / ALK-6 (149-502) 蛋白 (His & GST 標簽)

THSD1 Protein Mouse 重組小鼠 THSD1 / TMTSP 蛋白 (His 標簽)

大鼠心肌成纖維細胞DYKDDDDK Tag(CT 0.5mgDYKDDDDK Tag(CT)/Flag-Tag 標簽DYKDDDDK Tag分支肽

BMPR1B Protein Human 重組人 BMPR1B / ALK-6 (149-502) 蛋白 (His & GST 標簽)

MBL1重組大鼠 MBL1 蛋白 (Fc 標簽) Protein

THSD1 Protein Mouse 重組小鼠 THSD1 / TMTSP 蛋白 (His 標簽)

GOLM1重組人 GOLM1 / GP73 蛋白 (His 標簽) Protein

原代細胞的4種培養方法：

　　① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養法

　　③ 懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。