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原代細(xì)胞培養(yǎng)條件：

?溫度?：通常在37℃下進(jìn)行，以模擬體內(nèi)溫度。

?pH值?：培養(yǎng)液的pH值應(yīng)保持在7.2~7.4之間，以維持細(xì)胞的正常生理狀態(tài)。

?氣體環(huán)境?：在含有5% CO2的培養(yǎng)箱中進(jìn)行，以促進(jìn)細(xì)胞生長。

?培養(yǎng)基?：使用含有適當(dāng)營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基，如Eagle's MEM、DMEM等。

?無菌操作?：整個(gè)培養(yǎng)過程需要在無菌條件下進(jìn)行，以防止污染。

本產(chǎn)品僅供科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用! 不能用于臨床或動(dòng)物診斷！

細(xì)胞簡介：

小鼠下頜骨成纖維分離自下頜骨組織；下頜骨位于面下部，呈弓形，圍成口腔的前壁和側(cè)壁，是面部能活動(dòng)的骨骼；其水平部分為下頜體，其垂直部分為下頜支，表層為骨密質(zhì)，內(nèi)部為骨松質(zhì)，與顳骨關(guān)節(jié)凹組成顳下頜關(guān)節(jié)。下頜體分內(nèi)、外兩面及上、下兩緣。下頜支分兩面、四緣及兩突。下頜支與顳骨形成關(guān)節(jié)。該關(guān)節(jié)非常靈活，可做出包括咀嚼動(dòng)作在內(nèi)的多種動(dòng)作下頜骨的骨小梁也順應(yīng)咀嚼肌的拉力和力傳送的方向而排列，斜向上后排列成線形；下頜骨的骨質(zhì)較致密，血供較差，除主要接受下齒槽動(dòng)脈血供外，又接受來自骨表面黏骨膜動(dòng)脈分支的血液供應(yīng)。成纖維細(xì)胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng)，在一定條件下，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的表皮成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團(tuán)；細(xì)胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

方法簡介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠下頜骨成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠下頜骨成纖維采用-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體操作步驟如下：

?組織處理?：將動(dòng)物組織從機(jī)體中取出，剪碎后用等消化酶處理，使其分散成單個(gè)細(xì)胞。

?細(xì)胞計(jì)數(shù)?：使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器或其他方法對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，確保細(xì)胞密度適中。

?接種培養(yǎng)?：將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當(dāng)細(xì)胞達(dá)到一定密度時(shí)進(jìn)行傳代培養(yǎng)，以維持細(xì)胞的生長狀態(tài)。

公司正在出售的產(chǎn)品：

豬血管生成素2(ANG-2)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human creatine kinase isoenzyme MB (CK-MB) ELISA Kit 人肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)ELISA試劑盒

RabbitFibrinogen,FbgELISAKit 兔血纖蛋白原(Fbg)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforai-Q-Ab(Humanai-Qfeveraibody)ELISAKit人抗Q熱抗體規(guī)格：48T/96T

血液3-羥-3-甲戊二酰(HMG-COA)還原酶活性直接比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

PorcineInfluenzavirusesA,FLUAELISAKit豬流感病毒A(FLUA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

豬胰島素樣生長因子1elisa試劑盒   豬胰島素樣生長因子1試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   豬胰島素樣生長因子1試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豬胰島素樣生長因子1試劑盒、豬胰島素樣生長因子1eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

豬胰島素elisa試劑盒   豬胰島素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   豬胰島素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豬胰島素試劑盒、豬胰島素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

豬氧化低密度脂蛋白elisa試劑盒   豬氧化低密度脂蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   豬氧化低密度脂蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豬氧化低密度脂蛋白試劑盒、豬氧化低密度脂蛋白eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

豬壞死因子αelisa試劑盒   豬壞死因子α試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   豬壞死因子α試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豬壞死因子α試劑盒、豬壞死因子αeisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

大鼠孤腓肽(OFQ/N)ELISA試劑盒 ，英文名： OFQ/N ELISA Kit

Rabbit leukemia inhibitory factor receptor (LIFR) ELISA Kit 兔子白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒

球菌(SA)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMIFELISAKit大鼠巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子規(guī)格：48T/96T

體液亮(leucine)含量高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒20次

ELISAKitPAF牛血小板活化因子規(guī)格：48T/96T

ADAM15重組小鼠 ADAM15 / MDC15 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

C4結(jié)合蛋白β(C4BPβ)重組蛋白 Recombinant C4 Binding Protein Beta (C4BPb)

LILRA3重組人 ILT6 / LILRA3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

BLK Protein Human 重組人 BLK / B Lymphocyte Kinase 蛋白 (GST 標(biāo)簽)

DLL1 Protein Rat 重組大鼠 DLL1 / Delta-like 蛋白 1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

大鼠下頜骨成纖維細(xì)胞TGFβ誘導(dǎo)早期應(yīng)答基因1(TIEG1)重組蛋白 Recombinant TGF Beta Inducible Early Response Gene 1 (TIEG1)

BLK Protein Human 重組人 BLK / B Lymphocyte Kinase 蛋白 (GST 標(biāo)簽)

KYNU重組小鼠 KYNU / Kynureninase 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

MET Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 蛋白

RUVBL1重組人 RUVBL1 / RVB1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

原代細(xì)胞的4種培養(yǎng)方法：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養(yǎng)法

　　③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對(duì)于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。