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原代細胞培養條件：

?溫度?：通常在37℃下進行，以模擬體內溫度。

?pH值?：培養液的pH值應保持在7.2~7.4之間，以維持細胞的正常生理狀態。

?氣體環境?：在含有5% CO2的培養箱中進行，以促進細胞生長。

?培養基?：使用含有適當營養成分的培養基，如Eagle's MEM、DMEM等。

?無菌操作?：整個培養過程需要在無菌條件下進行，以防止污染。

本產品僅供科學實驗研究使用! 不能用于臨床或動物診斷！

細胞簡介：

大鼠食管成纖維分離自食管組織；食管是咽和胃之間的消化管，食管在系統發生上起初很短，隨著頸部的伸長和心肺的下降，而逐漸增長。食管可分為頸段、胸段和腹段。脊椎動物食管的頸段位于氣管背后和脊柱前端，胸段位于左、右肺之間的縱膈內，胸段通過膈孔與腹腔內腹相連，腹段很短與胃相連。在發育過程中，食管的上皮細胞增殖，由單層變為復層，食管使管腔變狹窄，甚至一度閉鎖，以后管腔又重新出現。哺乳動物的食管結構上由內向外分四層：黏膜層、黏膜下層、肌層和外膜。其中，黏膜層，包括上皮、固有層和黏膜肌層。食管的外膜，由疏松結締組織構成，富有血管、淋巴管及神經。主要包含食管成纖維細胞，成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質嗜弱堿性，具明顯的蛋白質合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現跟纖維細胞的互相轉化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的表皮成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

方法簡介：

實驗室分離的大鼠食管成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

質量檢測：

實驗室分離的大鼠食管成纖維采用 - 膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。

培養信息：

培養基：基礎培養基，含FBS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態：成纖維細胞樣

傳代特性：可傳2-3代左右

消化液：0.25%

培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細胞培養的具體操作步驟如下：

?組織處理?：將動物組織從機體中取出，剪碎后用等消化酶處理，使其分散成單個細胞。

?細胞計數?：使用血細胞計數器或其他方法對細胞進行計數，確保細胞密度適中。

?接種培養?：將細胞懸液接種到培養瓶中，加入適量的培養基，置于37℃、5% CO2的培養箱中培養。

?換液和傳代?：定期更換培養液，當細胞達到一定密度時進行傳代培養，以維持細胞的生長狀態。

公司正在出售的產品：

小鼠凋亡相關因子(FAS/CD95)ELISA 試劑盒 96T/48T

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五羥色胺 (Serotonin/5-HT)   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝

分泌型白細胞蛋白酶抑制物 (SLPI)   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝

P 物質 (Substance P)   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝

生存素 (survivin)   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝

大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)ELISA試劑盒 ，英文名： BACE1 ELISA Kit

Mouse esogen (E) ELISA Kit 小鼠雌激素(E)ELISA試劑盒

ELISA 小鼠神經肽Y(mouse NPY) 48T/96T 進口分裝

CLIAKitforIL-13ELISAKIT大鼠白介素13規格：48T/96T

通用型馬鈴薯YN病毒(PotatoVirusYN;PVYN)試劑盒20次

ELISAKitANG-2大鼠血管生成素2規格：48T/96T

CD83重組小鼠 CD83 / HB15 蛋白 (His 標簽) Protein

A Beta1-40 (mutation type, MT 0.1mgA Beta1-40 (mutation type, MT) peptide 突變型β淀粉樣肽1-40

ABHD14B重組人 ABHD14B 蛋白 (His 標簽) Protein

FETUB Protein Human 重組人 Fetuin-B / FETUB 蛋白 (His 標簽)

IFNG Protein Rat 重組大鼠 IFNG / Interferon Gamma 蛋白 (Fc 標簽)

大鼠食管成纖維細胞蛋白酶激活受體4(PAR4)重組蛋白 Recombinant Protease Activated Receptor 4 (PAR4)

FETUB Protein Human 重組人 Fetuin-B / FETUB 蛋白 (His 標簽)

GREM1重組小鼠 Gremlin 1 / GREM1 蛋白 (His 標簽) Protein

TNFRSF10D Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 TRAIL R4 / CD264 / TNFRSF10D 蛋白 (His 標簽)

CFL1重組人 CFL1 / N-cofilin 蛋白 (His 標簽) Protein

原代細胞的4種培養方法：

　　① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養法

　　③ 懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。