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原代細胞培養(yǎng)的具體步驟：

1、準備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：點燃酒精燈，安裝吸管帽。

3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。

5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應搖動一次，如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6、分離：在消化過程中見消化液發(fā)混濁時，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細胞團或單個細胞，立即終止消化，隨即通過適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500-1000轉/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

7、計數(shù)：用計數(shù)板計數(shù)，如細胞懸液細胞密度過大，再補加培養(yǎng)液調(diào)整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數(shù)細胞來說，pH要求在7.2-7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說明液體變酸，可用NaHCO3調(diào)整。

8、培養(yǎng)：置于37℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時需要換新塞。

大鼠神經(jīng)小膠質細胞

商品屬性：

細胞簡介：

大鼠神經(jīng)小膠質分離自腦組織；大腦分左右兩個半球，大腦皮質(灰質)覆蓋著每個大腦半球的大部分，它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構成的白質。每一個半球都有三個面，即外側面(約占整個皮質面積的1/3)、內(nèi)側面和底面(占2/3的面積)；半球表面有很多深淺不等的溝或裂，溝或裂之間的隆起叫回，它們大大增加了大腦的表面積；大腦外側面重要的溝、裂有大腦外側裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔，使大腦皮質組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。小膠質細胞是神經(jīng)膠質細胞的一種，相當于腦和脊髓中的巨噬細胞，是中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)中的第一道也是最主要的一道免疫防線。小膠質細胞大約占大腦中的神經(jīng)膠質細胞的20%，小膠質細胞不停地清除著中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的損壞的神經(jīng)，斑塊及感染性物質。無數(shù)臨床上和學研究表明激活的小膠質細胞在神經(jīng)退化類疾病的發(fā)病機理中起到十分重要的作用，如帕金森病、多發(fā)性硬化和阿茲海默癥等。但是過多激活或失控的小膠質細胞會引起神經(jīng)毒性。它們是促炎因子和氧化應激的重要來源，如腫瘤壞死因子(TNF)，一氧化氮，白介素等有神經(jīng)毒性的物質。神經(jīng)小膠質細胞的主要功能：①神經(jīng)膠質出現(xiàn)在大腦發(fā)育早期向成熟階段轉化的過程中；②當程序性細胞死亡時，或在大腦發(fā)育的過程中，中樞神經(jīng)系統(tǒng)受損或受到病理損壞時，神經(jīng)膠質可做為大腦的巨噬細胞；③膠質細胞能在Ⅱ類組織相容性復合體表達CD-4陽性T細胞時表達抗原，能進行Fc介導的巨噬作用，并且與造血細胞和巨噬細胞組織共享抗原。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠神經(jīng)小膠質經(jīng)CD11b免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

質量檢測：

公司實驗室分離的大鼠神經(jīng)小膠質采用酶消化法結合差速貼壁法，在培養(yǎng)基營養(yǎng)缺失數(shù)天后經(jīng)搖床震蕩收集脫落細胞制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性 屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群

消化液（12mM）

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細胞VS細胞系：

用酶或機械方法直接從人或動物組織中分離出來的細胞。嚴格來說，從機體分離出來到傳代之前的細胞稱為原代細胞，絕大部分的原代細胞在體外可以分裂10-15次(這與細胞的端粒長短有關)，再加上取材，成本等因素，通常會把培養(yǎng)的第一代到第十代以內(nèi)的細胞統(tǒng)稱為原代細胞。

原代細胞一般傳至10代左右，大部分細胞衰老死亡，但是有極少數(shù)的細胞能夠度過“危機"而繼續(xù)傳下去，存活的細胞一般能夠傳到40-50代，叫細胞株。當50代以后又會出現(xiàn)“危機"，這時有部分細胞的遺傳物質發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c，從而可能無限制地傳代下去，稱為細胞系。

也有認為細胞系指原代細胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細胞。由此便引申出了后來的有限細胞系、無限細胞系，因此，細胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細胞，廣義是指可傳代的細胞。而細胞株是通過選擇法或克隆形成法，從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得具有特殊性質或標志物的單一細胞稱為細胞株。

細胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價格便宜、無限傳代等優(yōu)點，也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯誤鑒定及交叉污染的問題。

公司正在銷售的產(chǎn)品：

豬熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human hexokinase (HK) ELISA Kit 人己糖激酶(HK)ELISA試劑盒

guineapigiestinalfattyacidbindingprotein,iFABPELISAKit 豚鼠腸脂肪酸結合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforANG-II(MouseangiotensionII)ELISAKit小鼠血管緊張素Ⅱ規(guī)格：48T/96T

血液輔酶Q含量比色法定量檢測試劑盒20次

PorcineC-reactiveprotein,CRPELISAKit豬C反應蛋白(CRP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

豬皮質/上腺(CO)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

豬(Coisol)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

豬腦素/腦尿肽(BNP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

豬-葡萄糖共轉運載體1(SGLT1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠FMS樣酪酸激酶3(Flt3)ELISA試劑盒 ，英文名： Flt3 ELISA Kit

Rabbit plasminogen activator inhibitor 1 (PAI-1) ELISA Kit 兔子纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA試劑盒

ELISA 小鼠型纖溶酶原激活物(mouse uPA) 48T/96T 進口分裝

CLIAKitforICA(Mouseisletcellaibody)ELISAKIT小鼠胰島細胞抗體規(guī)格：48T/96T

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ELISAKitaFGF-1大鼠酸性成纖維細胞生長因子1規(guī)格：48T/96T

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