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實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
參數(shù)規(guī)格：
產品名稱：亨德拉病毒(EMV)PCR檢測試劑盒
產品貨號：CP99970
產品規(guī)格：50T
產品分類：熒光-PCR法
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年
產品特點：本產品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產品。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:

實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
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二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μl
      Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
使用方法：
一、樣品DNA的制備
用自選方法提取細菌樣品DNA。注意：DNA純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品DNA，后面的PCR再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備O157:H7標準曲線（以10-10E6這6個10倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。
1. 標記6個離心管，分別為6，5，4，3，2和1號。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用TE緩沖液或超純水10倍梯度稀釋到10E7拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至10E7拷貝/μL，建議每次稀釋10倍，梯度稀釋至10E7拷貝/μL）。
4. 在6號管中加入5 μL 10E7拷貝/μL的O157:H7陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得10E6拷貝/μL的陽性對照。
5. 換槍頭，從6號管中取5 μL溶液到5號管中，充分震蕩1分鐘，得10E5拷貝/μL的陽性對照。
6. 換槍頭，從5號管中取5 μL溶液到4號管中，重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。
7. NC管中不加任何陽性對照。
8. 從1-6號管中分別取5 μL和待測樣品一起進行定量PCR（見下步），每個樣品做3次重復。PCR后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光PCR Ct值，并以之為縱軸，以濃度的對數(shù)值為橫軸，繪制標準曲線。
高加索鏈霉菌β-乳球蛋白抗體Human HBA1 ELISA Kit小鼠鈣結合蛋白(CR)免疫試劑盒

Salinicoccus alkaliphilusβ-乳球蛋白抗體Human HERPUD2 ELISA Kit小鼠鈣非依賴型磷脂酶A2(iPLA2)免疫試劑盒

Pilidium concavum緩激肽B2受體抗體Human HEATR4 ELISA Kit小鼠鈣調素(CAM)免疫試劑盒

金頂側耳(榆黃蘑)丁酰酯酶抗體(N端)Human HES5 ELISA Kit小鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)免疫試劑盒

褐球固氮菌丁酰酯酶抗體(C端)Human HESX1 ELISA Kit小鼠分泌型磷脂酶A2(sPLA2)免疫試劑盒

釀酒酵母BLAME抗體Human HEBP2 ELISA Kit小鼠肺炎支原體(MP)抗體(IgG)免疫試劑盒

竹喙球菌巴曲霉素單克隆抗體Human HEBP1 ELISA Kit小鼠肺部活化調節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)免疫試劑盒

釀酒酵母蛇巴曲酶抗體Human HECTD1 ELISA Kit小鼠肺表面活性物質相關蛋白C(SP-C)免疫試劑盒

粉肉色杯傘溴脫氧尿苷抗體Human HECTD2 ELISA Kit小鼠肺表面活性物質相關蛋白B(SP-B)免疫試劑盒

越南芽孢桿菌腫瘤/抗原2.2抗體Human HECTD3 ELISA Kit小鼠肺表面活性物質相關蛋白A(SP-A)免疫試劑盒

腸球菌屬腫瘤/抗原2.3抗體Human HELB ELISA Kit小鼠肺表面活性蛋白D(SP-D)免疫試劑盒

互生枝頂孢腫瘤/抗原2.4抗體Human HDAC5 ELISA Kit小鼠肥大類(MCT)免疫試劑盒

解拉烏爾菌腦鈉素/利鈉肽抗體Human HDAC4(Histone deacetylase 4) ELISA Kit小鼠肥大/干生長因子受體(試劑盒/Sl/CD117)免疫試劑盒

香菇B Raf抗體Human HDAC6 ELISA Kit小鼠芳香酶免疫試劑盒

腐皮鐮孢菌癌易感基因1抗體Human HAUS3 ELISA Kit小鼠二酰基甘油(DAG/DG)免疫試劑盒

大腸埃希氏菌癌易感基因2抗體Human HAX1 ELISA Kit小鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)免疫試劑盒
亨德拉病毒(EMV)PCR檢測試劑盒鏈霉菌Streptomyces│sp. 質量規(guī)格：含量測定脫氫酶7家族,成員A1試劑盒蒲公英甾;Taraxasterol

大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質量規(guī)格：>98%,二水合物可用于培養(yǎng)糖還原酶試劑盒派立辛;Parishin

大腸埃希菌Escherichia│coli 質量規(guī)格：含量測定縮酶試劑盒歐夾竹桃苷;Oleandrin

蒼白桿菌Ochrobactrum│pituitosum Huber et al. 質量規(guī)格：>98%,進分固酮試劑盒歐當歸內酯A;Levistilide A

雞傷寒沙門氏菌Salmonella│gallinarum 質量規(guī)格：>99%,BR去乙酰化酶Sirtuin-7試劑盒歐前胡素;Imperatorin

黑孢屬菌種Nigrospora│sp. 質量規(guī)格：>99%去乙酰化酶Sirtuin-6試劑盒尼泊金異酯;Isopropyl 4-H

木霉Trichoderma│sp. 質量規(guī)格：HPLC>98%,標準品去乙酰化酶Sirtuin-5試劑盒尼泊金異丁酯;Isobutyl 4-Hy

產堿假單胞菌Pseudomonas│ 質量規(guī)格：>99%去乙酰化酶Sirtuin-4試劑盒膝甾酮;Lnokosterone

鏈霉菌屬Streptomyces│sp. 質量規(guī)格：>99%,標準品去乙酰化酶Sirtuin-2試劑盒尿苷;Uridine