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從標本收集、保存、預(yù)試驗、實驗、數(shù)據(jù)分析等全實驗過程提供完整的技術(shù)指導。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱：ASM酸性神經(jīng)鞘磷脂酶酶聯(lián)免疫試劑盒

英文名稱：ASM ELISA Kit

規(guī)格：48T/96

貨號：CS-2492E

主要成分：酶標板,試劑,標準品等。

試劑盒種屬：馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。

檢測目的：用于測定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本..

試劑盒組成及試劑配制：

1. 酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔）。

2. 標準品（Standard）：2瓶（凍干品）。

3. 樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。

4. 標記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。

5. 辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。

6. 標記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）

7. 辣根過氧化物酶標記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）

8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。

9. 濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。

10. 終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

試劑準備：

1. 使用前將所有的試劑和標本緩慢均衡至室溫(18-25oC)，試劑不能直接在37oC溶解。

2. 標準品(凍干品)：每瓶標準品加入標準品稀釋液1mL，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為2000pg/mL。準備7個稀釋標準品的EP管，每個EP管中加入150μL的標準品稀釋液，如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度， 標準品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實驗結(jié)果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。

3. 濃洗滌液：用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL，進行30倍稀釋。

注意事項：

1.試劑盒使用前請保存在2-8℃。復(fù)溶后的標準品若未用完，請廢棄。

2. 微量試劑運輸中顛簸和可能的倒置，會使液體沾到管壁或瓶蓋。因此使用前請1000轉(zhuǎn)/分離心1分鐘，以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。

3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正?，F(xiàn)象，微加熱至40℃使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液。

（加熱溫度不要超過50℃）使用時洗滌液應(yīng)為室溫。

4. 不同批號的試劑盒組份避免混用（洗滌液和反應(yīng)終止液除外）。

5. 充分輕微混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤為重要，使用微量振蕩器(使用zui低頻率)，如無微量振蕩器，可在反應(yīng)孵育前手工輕輕混勻。

6. 在試驗中標準品和樣本檢測時建議作雙孔檢測。

7. 試驗中所用的試管和吸頭均為一次性使用，嚴禁在不同的液體之間混用！否則將影響試驗結(jié)果。

8. 試驗中請穿著試驗服并帶乳膠手套做好防護工作。特別是檢測血液或者其他體液標本時，請按國家生物試驗室安全防護條列執(zhí)行。

乙基三苯基溴化膦  98%二苯 分析標準品Anti-Insulin  胰島素抗體

氯代十六烷基吡一水合物  98%5-乙酰酸鹽酸鹽 99%Anti-Insulin (pig)  胰島素抗體 （豬）

甲基氯化吡 98%蘆薈甙 分析標準品，≥97%Anti-rInsulin   

甲基三苯基氯化膦 97%10-脫乙?；涂ǘ?III 分析標準品，≥95%Anti-rInsulin monoclonal (pig)  抗胰島素單克隆抗體（豬）

甲氧甲酰基亞甲基三苯基膦 98%多烯紫杉 分析標準品，≥99%Anti-rInsulin human monoclonal  

甲氧甲?；交寤?/span> 98%多烯紫杉 98%Anti-Insulin Receptor  胰島素受體抗體

甲基三辛基氯化銨 97%大黃素 ≥90% (HPLC)Anti-Insulin Receptor alpha  胰島素受體α抗體

甲基三苯基溴化鏻 98% 分析標準品，≥98%Anti-Insulin Receptor Alpha  胰島素受體α抗體

ASM酸性神經(jīng)鞘磷脂酶酶聯(lián)免疫試劑盒棗仁皂苷 A 分析標準品，≥98%犬CD8分子(CD8)免疫試劑盒紅膜蛋白4.2抗體MT-ND1  NADH復(fù)合體1抗體

棗仁皂苷 B  分析標準品，≥98%犬CD6分子(CD6)免疫試劑盒轉(zhuǎn)錄因子ELYS蛋白抗體MTMR8  肌管素相關(guān)蛋白8抗體

甘草苷    分析標準品，>99.5%犬CD4分子(CD4)免疫試劑盒內(nèi)皮粘蛋白EMCN抗體MTMR14  肌管素相關(guān)蛋白14抗體

千金子二萜 分析標準品，>98% 犬CD31分子(CD31)免疫試劑盒環(huán)腺苷調(diào)節(jié)核苷交換因子1抗體MTM1/Myotubularin  肌微管素1抗體

DL-薄荷 分析標準品犬CC趨化因子受體2(CCR2)免疫試劑盒化轉(zhuǎn)錄因子E2F1抗體MTLR  胃動素受體抗體

三七皂甙 R1 分析標準品,≥98% (HPLC)犬B淋巴瘤因子2(Bcl-2)免疫試劑盒上皮特異性轉(zhuǎn)錄因子1抗體MTLC  致癌因抗體

化兩面針堿 分析標準品，>98%犬B-淋巴趨化因子1(BLC-1/CXCL13)免疫試劑盒內(nèi)皮素2抗體MTHFR  亞四氫葉還原MTHFR抗體

麥冬皂苷D 分析標準品，>98%犬Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)免疫試劑盒內(nèi)皮受體蛋白酪氨激B3抗體MTGR1  髓易位因相關(guān)蛋白1抗體

松酯二葡萄糖苷 分析標準品，>98% 犬5羥色(5-HT)免疫試劑盒軟骨外胚層發(fā)育不良相關(guān)蛋白抗體MTFR1  線粒體裂變調(diào)節(jié)蛋白1抗體

貝母素 分析標準品，>98% 犬Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)免疫試劑盒髓鞘蛋白P0樣蛋白2抗體MTF-1  金屬應(yīng)答元件結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子-1抗體

貝母素乙 分析標準品，>98%犬Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)免疫試劑盒雌激素受體α抗體MTCP1  成熟T淋巴增殖蛋白1抗體

百秋李  分析標準品，>98%犬25羥3(25 HVD3)免疫試劑盒內(nèi)質(zhì)網(wǎng)核信號轉(zhuǎn)導蛋白2抗體MTCH2  線粒體載體同源蛋白2抗體

胡黃連苷Ⅰ 分析標準品，>98% 犬2,3-二甘油(2,3-DPG)免疫試劑盒鋅指蛋白521抗體MTCH1  增殖誘導蛋白60（早老素相關(guān)蛋白）

胡黃連苷Ⅱ 分析標準品，>98% 犬17羥孕酮(17-OHP)免疫試劑盒大腸桿菌埃希桿菌O6抗體（腸致病性大腸桿菌O6）MTCBP1/ADI1  膜型質(zhì)金屬蛋白胞質(zhì)尾結(jié)合蛋白1抗體

胡黃連苷Ⅲ 分析標準品，>95%牛ELISA試劑盒植物延展素-βMTBP/MDM2BP  雙微體2癌因結(jié)合蛋白抗體

操作步驟：

1.編號：將樣品對應(yīng)微孔按序編號，每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）

2.加樣：分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl，然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，

3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。

4.配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。

5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此 重復(fù) 5 次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶標試劑 50μl，空白孔除外。

7.溫育：操作同 3。

8.洗滌：操作同 5。

9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10 分鐘.

10.終止：每孔加終止液 50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。