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從標(biāo)本收集、保存、預(yù)試驗(yàn)、實(shí)驗(yàn)、數(shù)據(jù)分析等全實(shí)驗(yàn)過程提供完整的技術(shù)指導(dǎo)。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱：AIF酸性鐵蛋白酶聯(lián)免疫試劑盒

英文名稱：AIF ELISA Kit

規(guī)格：48T/96

貨號(hào)：CS-2491E

主要成分：酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。

試劑盒種屬：馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動(dòng)植物。

檢測(cè)目的：用于測(cè)定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..

試劑盒組成及試劑配制：

1. 酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔）。

2. 標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）。

3. 樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。

4. 標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。

5. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。

6. 標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）

7. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）

8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。

9. 濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。

10. 終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

試劑準(zhǔn)備：

1. 使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC)，試劑不能直接在37oC溶解。

2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品)：每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為2000pg/mL。準(zhǔn)備7個(gè)稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管，每個(gè)EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液，如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度， 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

3. 濃洗滌液：用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL，進(jìn)行30倍稀釋。

注意事項(xiàng)：

1.試劑盒使用前請(qǐng)保存在2-8℃。復(fù)溶后的標(biāo)準(zhǔn)品若未用完，請(qǐng)廢棄。

2. 微量試劑運(yùn)輸中顛簸和可能的倒置，會(huì)使液體沾到管壁或瓶蓋。因此使用前請(qǐng)1000轉(zhuǎn)/分離心1分鐘，以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。

3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正常現(xiàn)象，微加熱至40℃使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液。

（加熱溫度不要超過50℃）使用時(shí)洗滌液應(yīng)為室溫。

4. 不同批號(hào)的試劑盒組份避免混用（洗滌液和反應(yīng)終止液除外）。

5. 充分輕微混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤為重要，使用微量振蕩器(使用zui低頻率)，如無微量振蕩器，可在反應(yīng)孵育前手工輕輕混勻。

6. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本檢測(cè)時(shí)建議作雙孔檢測(cè)。

7. 試驗(yàn)中所用的試管和吸頭均為一次性使用，嚴(yán)禁在不同的液體之間混用！否則將影響試驗(yàn)結(jié)果。

8. 試驗(yàn)中請(qǐng)穿著試驗(yàn)服并帶乳膠手套做好防護(hù)工作。特別是檢測(cè)血液或者其他體液標(biāo)本時(shí)，請(qǐng)按國家生物試驗(yàn)室安全防護(hù)條列執(zhí)行。

價(jià)）：100μg/ml；Pb,Hg：200μg/ml；Anti-APEX1/Ref-1 /FITC  熒光素標(biāo)記氧化還原因子1抗體IgG

 PT200μg/ml～2000μg/mlcx

 SP(Na,Mg,K,Ca,NH4+)多元素混合標(biāo)準(zhǔn)溶液400μg/ml：Na；500μg/mlAnti-API5/AAC11 /FITC  熒光素標(biāo)記凋亡抑制因子5抗體IgG

99.99% metals basis(As,Bi,Cd,Cu,Cr,Fe,Hg,Mn,Ni,Se,Pb,Zn）多元素混合標(biāo)準(zhǔn)溶液 100Anti-APNG/MPG/FITC  熒光素標(biāo)記N-甲基嘌呤DNA糖基化IgG

 ACS, 99.5%(Al,Bi,Fe,Mn,Mo,Sb,Si,Ta,Ti,Zn,Zr)多元素混合標(biāo)準(zhǔn)溶液 100μg/Anti-apoA1/FITC  熒光素標(biāo)記載脂蛋白A1抗體IgG

 99.999% metals basis100μg/mlAnti-ApoB/FITC  熒光素標(biāo)記載脂蛋白B抗體IgG

 99.9999% metals basis100μg/mlAnti-apo-D /FITC  熒光素標(biāo)記載脂蛋白D抗體IgG

偏酸鈉,四水 ARBi,Se,Sn,Te,50μg/ml;As,P,Sb,100μg/ml;Fe,Ni,Pb,S,Zn,200μg/Anti-Apo-E/FITC  熒光素標(biāo)記載脂蛋白E抗體IgG

AIF酸性鐵蛋白酶聯(lián)免疫試劑盒一氧化錳 99.99%兔子免疫球蛋白G(IgG)免疫試劑盒色素c氧化1抗體RAP1A  抗Rap1A抗體

中型貨架 1800外*700*2000 三層鋼板 300KG/層兔子免疫球蛋白E(IgE)免疫試劑盒表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白4抗體RANK/CD265  核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB受體抗體(核因子kB受體活化因子)

重型貨架 2000內(nèi)*600*2000 二層鋼板 承載1000KG/層兔子免疫球蛋白A(IgA)免疫試劑盒表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白6抗體RanGAP1  RAN GTPase激活蛋白1抗體

中型貨架 2000*600*2000mm 四層兔子硫氧化還原蛋白(Trx)免疫試劑盒表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白8抗體RanBP7/Importin 7  RAN結(jié)合蛋白7抗體

中型貨架 2000*600*2000 六層兔子硫軟骨素(CS)免疫試劑盒硫軟骨素抗體RanBP3  RAN結(jié)合蛋白3抗體

鈷鋰 99.8% metals basis兔子硫類肝素(HS)免疫試劑盒上皮類癌相關(guān)抗原抗體RanBP2  RAN結(jié)合蛋白2/核孔蛋白抗體

聚乙烯1788型 解度：87.0～89.0%(mol/mol)兔子硫角質(zhì)素(KS)免疫試劑盒化蛋白激PKC/CPI-17抗體RanBP1  RAN結(jié)合蛋白1抗體

聚乙烯1797型 解度：96.0～98.0%(mol/mol)兔子可溶性粘附分子(Sam)免疫試劑盒著絲粒蛋白KRan/ARA24  雄激素受體相關(guān)蛋白24抗體

聚乙烯1799型 解度：99.8～95%(mol/mol)兔子可溶性血管粘附分子1(sVCAM-1)免疫試劑盒腫瘤/抗原1BRAMP1  受體活性修飾蛋白1抗體

聚乙烯1795型 解度：94.0～96.0%(mol/mol)兔子可溶性血管內(nèi)皮蛋白C受體(sEPCR)免疫試劑盒轉(zhuǎn)鐵蛋白受體抗體RAMP/CDT2  維調(diào)節(jié)核質(zhì)相關(guān)蛋白

聚乙烯1788低粘度型 解度：87.0～89.0(mol/mol)，CPS：4.6-5兔子可溶性P選擇素(sP-selectin)免疫試劑盒8號(hào)染色體開放閱讀框K29抗體RALDH2  視黃脫氫2型抗體

聚乙烯 28-99 Mw ~145,000兔子可溶性E選擇素(sE-selectin)免疫試劑盒色素P450 3A4抗體RALB  Ras樣蛋白B抗體

聚乙烯 3-96 96.8-97.6 mol% hydrolysis兔子可溶性CD40配體(sCD40L)免疫試劑盒色素CYP2D1抗體RALA+RALB  Ras樣蛋白A+B抗體

聚乙烯 40-88 Mw ~205,000兔子抗中性粒顆粒抗體(ANGA)免疫試劑盒CD33抗體RALA  Ras樣蛋白A抗體

聚乙烯 56-98 Mw ~195,000兔子抗Ⅲ抗體(AT-Ⅲ Ab)免疫試劑盒視網(wǎng)膜母瘤結(jié)合蛋白8抗體RAIDD  CASP2凋亡相關(guān)蛋白抗體

操作步驟：

1.編號(hào)：將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào)，每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）

2.加樣：分別在陰、陽性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽性對(duì)照 50μl。然后在待測(cè)樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl，然后再加待測(cè)樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，

3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。

4.配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。

5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此 重復(fù) 5 次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl，空白孔除外。

7.溫育：操作同 3。

8.洗滌：操作同 5。

9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10 分鐘.

10.終止：每孔加終止液 50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。