上海莼試生物技術有限公司
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更新時間:2017-06-09 10:04:12瀏覽次數:441
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公司是*的ATCC細胞供應商,提供小鼠腎足細胞;Mouse podocyte
的報價,咨詢,稱技術服務,咨詢選購。
細胞名稱 小鼠腎足細胞;Mouse podocyte
形態特性 多邊
生長特性 貼壁生長
特征特性 利用穩定敏感的SV40T轉染建立的條件性永生化的腎足細胞;33℃/干擾素存在條件下,細胞增殖;37℃培養6天以上,細胞分化;表達WT-1,對緩激肽有反應。
培養條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS;r-IFN(r-干擾素)
傳代方法 1:3傳代;2~3天換液1次。
傳代情況 P24
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權限 A類培養需要滿足以下條件
1、無菌、無毒的環境:首先應保證被培養的細胞處于無菌、無毒的環境,即對培養液和所有的培養用具進行無菌處理。通常還要在培養液中添加一定量的抗生素以防培養過程中的污染。
2、營養物質:細胞體外培養所需營養物質與體內基本相同,需要有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。
3、溫度和pH:細胞體外培養的適宜溫度一般與動物的體溫相近。多數細胞生存的適宜pH為7.2~7.4。
4、氣體環境:培養所需氣體主要有O2和CO2,O2是細胞代謝所必需的,CO2的主要作用是維持培養液的pH。進行細胞培養時,通常采用培養皿或松蓋培養瓶,將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養箱中進行培養。
操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
人白介素16(IL-16)elisa試劑盒 Human Interleukin 16, IL-16 Elisa Kit 96T/48T
人白介素13(IL-13)elisa試劑盒 Human Interleukin 13, IL-13 Elisa Kit 96T/48T
人白介素12(IL-12/P70)elisa試劑盒 Human Interleukin 12, IL-12/P70 Elisa Kit 96T/48T
人白介素12(IL-12/P40)elisa試劑盒 Human Interleukin 12, IL-12/P40 Elisa Kit 96T/48T
人白介素11(IL-11)elisa試劑盒 Human Interleukin 11, IL-11 Elisa Kit 96T/48T
人白介素10(IL-10)elisa試劑盒 Human Interleukin 10, IL-10 Elisa Kit 96T/48T
人胰島素樣生長因子結合蛋白4(IGFBP-4)elisa試劑盒 Human insulin-like growth factors binding protein 4, IGFBP-4 Elisa Kit 96T/48T
人胰島素樣生長因子結合蛋白3(IGFBP-3)elisa試劑盒 Human insulin-like growth factors binding protein 3, IGFBP-3 Elisa Kit 96T/48T
人胰島素樣生長因子結合蛋白2(IGFBP2)elisa試劑盒 Human insulin-like growth factors binding protein 2, IGFBP-2 Elisa Kit 96T/48T
人胰島素樣生長因子結合蛋白1(IGFBP-1)elisa試劑盒 Human insulin-like growth factors binding protein 1, IGFBP-1 Elisa Kit 96T/48T
人胰島素樣生長因子2(IGF-2)elisa試劑盒 Human insulin-like growth factors 2, IGF-2 Elisa Kit 96T/48T
人胰島素樣生長因子1(IGF-1)elisa試劑盒 Human insulin-like growth factors 1, IGF-1 Elisa Kit 96T/48T
人γ干擾素(IFN-γ)elisa試劑盒 Human Interferon γ , IFN-γ Elisa Kit 96T/48T
人細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)elisa試劑盒 Human intercellular adhesion molecule 1, ICAM-1 Elisa Kit 96T/48T
人肝細胞生長因子(HGF)elisa試劑盒 Human hepatocyte growth factor, HGF Elisa Kit 96T/48T
人粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)elisa試劑盒 Human Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor, GM-CSF Elisa Kit 96T/48T
人膠質細胞系來源的神經營養因子(GDNF)elisa試劑盒 Human glial cell line-derived neurotrophic factor, GDNF Elisa Kit 96T/48T
人粒細胞集落刺激因子(G-CSF)elisa試劑盒 Human Granulocyte Colony Stimulating Factor, G-CSF Elisa Kit 96T/48T
人中性粒細胞趨化蛋白2(NAP-2/CXCL7)elisa試劑盒 Human neutrophil activating protein-2, NAP-2 Elisa Kit 96T/48T
人趨化因子(fractalkine/CX3CL1) elisa試劑盒 Human fractalkine/CX3CL1 Elisa Kit 96T/48T
人堿性成纖維細胞生長因子9(bFGF-9)elisa試劑盒 Human basic fibroblast growth factor 9, bFGF-9 Elisa Kit 96T/48T
人堿性成纖維細胞生長因子6(bFGF-6)elisa試劑盒 Human basic fibroblast growth factor 6, bFGF-6 Elisa Kit 96T/48T
人堿性成纖維細胞生長因子4(bFGF-4)elisa試劑盒 Human basic fibroblast growth factor 4, bFGF-4 Elisa Kit 96T/48T
人酸性成纖維細胞生長因子1(aFGF-1)elisa試劑盒 Human acidic fibroblast growth factor 1, aFGF-1 Elisa Kit 96T/48T
人凋亡相關因子配體(FASL)elisa試劑盒 Human Factor-related Apoptosis ligand, FASL Elisa Kit 96T/48T
人凋亡相關因子(FAS/CD95)elisa試劑盒 Human Factor-related Apoptosis, FAS Elisa Kit 96T/48T
人E選擇素(E-Selectin/CD62E)elisa試劑盒 Human E-Selectin Elisa Kit 96T/48T
人嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)elisa試劑盒 Human Eotaxin 1 Elisa Kit 96T/48T
人鼠嗜酸粒細胞趨化因子(ECF)elisa試劑盒 Human eosinophil chemotactic factor, ECF Elisa Kit 96T/48T