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上海莼試生物技術有限公司

主營產品: ELISA試劑盒,ELISA試劑盒價格,ELISA試劑盒報價

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人肝永生化細胞;THLE-3
人肝永生化細胞;THLE-3
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更新時間:2017-06-08 11:47:33瀏覽次數:420

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【簡單介紹】
人肝永生化細胞;THLE-3 收到細胞后7天,如發現細胞有質量問題(如污染,死亡,快遞運輸等原因)時,應出具書面質量問題報告并及時銷售人員,我們將盡快為您解決。

公司是*的ATCC細胞供應商,提供人肝永生化細胞;THLE-3 的報價,咨詢,稱技術服務,咨詢選購
細胞名稱  人肝永生化細胞;THLE-3  
形態特性   上皮細胞  
生長特性  貼壁生長  
特征特性   THLE-2 (ATCC CRL-10149 和 THLE-3 (ATCC CRL-11233)細胞系是正常肝細胞用SV40大T抗原轉染得到。 將含有SV40 T抗原的Bgl I-Hpa I片段的逆轉錄病毒載體導入兼嗜性包裝細胞株PA317中病毒。 THLE-2 and THLE-3表達正常成人肝上皮細胞特征性的表型。 當注射到無胸腺裸鼠中時,它們不成瘤,具有接近二倍體的核型,不表達甲胎蛋白。 THLE-2 and THLE-3將benzo[a]pyrene, N-nitrosodimet   
培養條件    Clonetics Corporation, Walkersville, MD 21793的BEGM培養基(目錄號CC3170)。 套裝包含了500毫升基本培養基及分別凍存的添加劑,我們不用其中的GA和Epinephrine但另外添加了5 ng/ml EGF, 70 ng/ml Phosphoethanolamine。  
傳代方法   消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。  
傳代情況  PN5  
凍存條件   *培養基+8%DMSO  
支原體檢測  陰性   
STR    
同工酶    
染色體    
使用權限  A類培養需要滿足以下條件
1、無菌、無毒的環境:首先應保證被培養的細胞處于無菌、無毒的環境,即對培養液和所有的培養用具進行無菌處理。通常還要在培養液中添加一定量的抗生素以防培養過程中的污染。

2、營養物質:細胞體外培養所需營養物質與體內基本相同,需要有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。

3、溫度和pH:細胞體外培養的適宜溫度一般與動物的體溫相近。多數細胞生存的適宜pH為7.2~7.4。

4、氣體環境:培養所需氣體主要有O2和CO2,O2是細胞代謝所必需的,CO2的主要作用是維持培養液的pH。進行細胞培養時,通常采用培養皿或松蓋培養瓶,將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養箱中進行培養。

操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
物理性狀及指標:  
外觀:……………………白色粉末  
溶解性:…………………溶于DMF(50 mg/ml).  
熾灼殘留:………………<0.1%,  
水分:……………………<10%  
純度:……………………>98%  
用途及描述:科研試劑  
儲存條件:-15~-20°C避光防潮密閉干燥。  
中文名稱:6 x RNA Loading Dye  
英文名字:6 x RNA Loading Dye  
物理性狀及指標:  
組分:10 mmol/L Tris-HCl,60 mmol/L EDTA,15%蔗糖,pH 7.6,0.05%溴藍,0.05%二甲苯青FF  
用途及描述:科研試劑,電泳上樣  
儲存條件:4°C避光防潮密閉干燥。  
中文名稱:CDI活化瓊脂糖  
英文名字:CDI Amine Reactie Agarose  
說明:  
CDI Amine Reactie Agarose consists of 6% cross-linked agarose actiated with CDI (1,1’-carbonyl diimidazole) to form reactie imidazole carbamates. The actiation of the resin occurs in solent and to maintain its actiity. The resin is supplied in acetone to preent hydrolysis. Upon reaction of the resin with primary amine containing molecules, i.e. proteins, in basic (pH8.5~10) aqueous buffers, the imidazole carbamates lose the imidazole group and form carbamate linkages. CDI Amine Reactie Agarose is ideal for immobilizing peptides, small organic molecules and certain proteins and reactions can occur in organic solent making it ideal for water-insoluble ligands.Features:Proen coupling chemistry, Easy to use, no secondary coupling agents required, Stable linkages, Couple in inorganic buffers for insoluble molecules. Suitable for Couple proteins and peptides. Couple primary amine containing ligands.  
用途及描述:科研試劑,蛋白標記與偶聯  
儲存條件: 2~8°C  
中文名稱:Con A瓊脂糖  
英文名字:Concanaalin A (Con A) Agarose  
特點:  
Binds α-D-mannopyranosyl, α-D-glucopyranosyl and sterically related residues. Purification or enrichment of glycoproteins, polysaccharides and glycolipids. Ligand Density:10~16 mg Con A/ml resin. Capacity:20~50 mg thyroglobulin/ml resin. Bead structure:4% agarose. For purification/ enrichment of glycoproteins, polysaccharides and glycolipids.  
說明:  
Concanaalin A (Con A) Agarose consists of Con A coupled to 4% agarose by the cyanogen bromide method. Con A is a tetrameric metalloprotein lectin isolated from Canaalia ensiformis (jack bean). Con A is used for the purification of glycoproteins, polysaccharides and glycolipids as it binds molecules containing α- D-mannopyranosyl, α-D-glucopyranosyl and sterically related residues. Con A agarose has also be used in other application areas including purification of enzyme-antibody conjugates, purification of IgM and separation of membrane esicles. As stated aboe, Con A is a metalloprotein and to maintain its binding characteristics the presence of both Mn2+ and Ca2+ is essential. Each subunit of Con A utilizes one calcium and one manganese ion and these cations can be remoed under acidic conditions abolishing the carbohydrate-binding actiity.  
用途及描述:科研試劑,蛋白純化與層析  
儲存條件: 2~8°C  
中文名稱:DNA Natie E.coli  
英文名字:DNA Natie E.coli  
物理性狀及指標:  
外觀:……………………凍干粉  
增色效應:………………>27%  
用途及描述:科研試劑  
儲存條件: 2~8°C  
中文名稱:DNA組織樣品常溫保存液  
英文名字:DNA-EZ Reagents F DNA-Be-Locked A  
特點:1. High efficiency. Immediate stabilization of harested tissues. 2. Conenient. No need for liquid nitrogen or dry ice. 3. Stability. Long-term storage of tissue for later analysis.  
簡介:DNA-Be-Locked (Tissue) proides immediate stabilization of DNA in tissue samples at room temperature. This preseres the in io profile of DNA, allowing reliable downstream analysis. Stabilized tissues can be transported at 15-25°C for up to 7 days, or stored at 2-8°C for up to 1 year. For longer storage, stabilized tissues can be archied at -20°C or -80°C.  
用途及描述:科研試劑  
儲存條件:室溫,避光防潮密閉干燥。  
 



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