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上海莼試生物技術有限公司
主營產品: ELISA試劑盒,ELISA試劑盒價格,ELISA試劑盒報價 |

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更新時間:2017-06-08 11:44:38瀏覽次數:438
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公司是*的ATCC細胞供應商,提供 SV40轉染人成骨細胞;hFOB 1.19 的報價,咨詢,稱技術服務,咨詢選購。
細胞名稱 SV40轉染人成骨細胞;hFOB 1.19
形態特性
生長特性 貼壁生長
特征特性 在0.6mg/mlG418存在下,用溫度敏感的表達載體pUCSVisA58轉染自然的胎兒四肢組織,建立了此細胞系。 在許可溫度33.5oC下細胞分裂很快,而在限制溫度39.5oC下細胞極少分裂或不分裂。 這些細胞具有分化為表達造骨細胞表型的成熟造骨細胞的能力。 這些細胞提供了一個同質化的快速增殖模型系統,用于研究正常人造骨細胞的分化,造骨細胞生理和激素,生長因子,和對造骨細胞的功能及分化有影響的細胞因子。
培養條件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 優質胎牛血清,10%;0.3mg/ml G418
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 *培養基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 A類培養需要滿足以下條件
1、無菌、無毒的環境:首先應保證被培養的細胞處于無菌、無毒的環境,即對培養液和所有的培養用具進行無菌處理。通常還要在培養液中添加一定量的抗生素以防培養過程中的污染。
2、營養物質:細胞體外培養所需營養物質與體內基本相同,需要有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。
3、溫度和pH:細胞體外培養的適宜溫度一般與動物的體溫相近。多數細胞生存的適宜pH為7.2~7.4。
4、氣體環境:培養所需氣體主要有O2和CO2,O2是細胞代謝所必需的,CO2的主要作用是維持培養液的pH。進行細胞培養時,通常采用培養皿或松蓋培養瓶,將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養箱中進行培養。
操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
酯、酮)、堿性和中性含氮化合物、硫醇。用途廣泛的非離子表面活性劑,在溫和的變性條件下用于恢復膜組分。
儲存條件:18~25°C,避光防潮密閉干燥。
中文名稱:曲拉通X-405
英文名字:Triton X-405
分子式:(C2H4O)n.C14H22O 分子量:294.43
物理性狀及指標:
外觀:……………………無色至淡黃色液體
溶解性:…………………溶于水
密度:……………………1.096 g/mL at 25 °C
細胞培養測試:…………合格
用途及描述:科研試劑,廣泛應用于分子生物學,藥理學等科研方面。曲拉通是一種非離子性、非變性的去垢劑,適用于膜蛋白復合體的增溶、分離和提純以及凝膠電泳
儲存條件:室溫,避光防潮密閉干燥。
中文名稱:樹脂
英文名字:Immobilized Biotin Resin
特點:
Strong affinity for aidin, streptaidin and neutraidin. Reusable resin, at least 10 times.Coalently coupled to limit leaching. Spacer arm:9. For isolatin of aidin, streptaidin and neutraidin coupled molecules. Immunoprecipitations with aidin, streptaidin and neutraidin coupled antibodies.
說明:
Immobilized Biotin Resin is designed for the high affinity chromatography purifications of aidin, streptaidin and neutraidin protein. The resin consists of biotin coupled to 6% cross-linked agarose. Biotin, a 244 Da itamin (itamin H) molecule, exhibits an extraordinary binding affinity for aidin (Ka=1015 M-1) and streptaidin. Biotin and aidin interaction is rapid and once the bond is established it can surie up to 3M guanidine-hydrochloride and extremes of pH. Biotin-aidin bonds can only be reersed by denaturing the aidin protein molecule with 8M guanidine-hydrochloride at pH1.5 or by boiling in SDS-PAGE sample loading buffer.
用途及描述:科研試劑,蛋白純化與層析
儲存條件: 2~8°C
中文名稱:鹽酸胍
英文名字:Guanidine hydrochloride
分子式:CH5N3.HCl 分子量:95.53
物理性狀及指標:
外觀:………………………………白色結晶性粉末
熔點:………………………………187-190℃
溶解性:……………………………易溶于水和乙醇
RNase,DNase,蛋白酶:…………不含
熾灼殘渣:…………………………<0.1%
純度:………………………………>99%
pH(5%水, 25°C)………………4.5~6.0
干燥失重:…………………………< 0.05%
用途及描述:科研試劑,廣泛應用于分子生物學。強離液劑,用以變性和復性蛋白質。這種強勁的變性劑可以溶解不溶或變性的蛋白,如包涵體。這被用來作為復性到蛋白質或酶復性到活性狀態的*步。
儲存條件:18~25°C,避光防潮密閉干燥。
中文名稱:
英文名字:Kallikrein
物理性狀及指標:
外觀:……………………凍干粉
樣物質:………<0.05
脂肪:……………………<0.1%
激酶:……………………<0.8
熾灼殘留:………………<3%
干燥失重:………………<0.2%
用途及描述:科研試劑
儲存條件:2~8°C避光防潮密閉干燥。
中文名稱:乙二胺四乙酸鐵鈉鹽;EDTA鐵鈉水合物
英文名字:EDTA, Iron (III), sodium salt
中文名稱:雜交液 I