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公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商，提供 SV40轉(zhuǎn)染人成骨細(xì)胞；hFOB 1.19 的報(bào)價(jià)，咨詢(xún)，稱(chēng)技術(shù)服務(wù)，咨詢(xún)選購(gòu)。
細(xì)胞名稱(chēng)  SV40轉(zhuǎn)染人成骨細(xì)胞；hFOB 1.19  
形態(tài)特性    
生長(zhǎng)特性  貼壁生長(zhǎng)  
特征特性   在0.6mg/mlG418存在下，用溫度敏感的表達(dá)載體pUCSVisA58轉(zhuǎn)染自然的胎兒四肢組織，建立了此細(xì)胞系。 在許可溫度33.5oC下細(xì)胞分裂很快，而在限制溫度39.5oC下細(xì)胞極少分裂或不分裂。 這些細(xì)胞具有分化為表達(dá)造骨細(xì)胞表型的成熟造骨細(xì)胞的能力。 這些細(xì)胞提供了一個(gè)同質(zhì)化的快速增殖模型系統(tǒng)，用于研究正常人造骨細(xì)胞的分化，造骨細(xì)胞生理和激素，生長(zhǎng)因子，和對(duì)造骨細(xì)胞的功能及分化有影響的細(xì)胞因子。   
培養(yǎng)條件   DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium)  優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；0.3mg/ml G418  
傳代方法   消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿(mǎn)。  
傳代情況  PN5  
凍存條件   *培養(yǎng)基+8%DMSO  
支原體檢測(cè)  陰性　  
STR    
同工酶    
染色體    
  使用權(quán)限  A類(lèi)培養(yǎng)需要滿(mǎn)足以下條件
1、無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境：首先應(yīng)保證被培養(yǎng)的細(xì)胞處于無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境，即對(duì)培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進(jìn)行無(wú)菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防培養(yǎng)過(guò)程中的污染。

2、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：細(xì)胞體外培養(yǎng)所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同，需要有葡萄糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。

3、溫度和pH：細(xì)胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動(dòng)物的體溫相近。多數(shù)細(xì)胞生存的適宜pH為7.2～7.4。

4、氣體環(huán)境：培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2，O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

操作步驟：
1. 將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過(guò)氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說(shuō)明書(shū)稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周?chē)疂n吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹(shù)膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
酯、酮）、堿性和中性含氮化合物、硫醇。用途廣泛的非離子表面活性劑，在溫和的變性條件下用于恢復(fù)膜組分。  
  儲(chǔ)存條件：18~25°C，避光防潮密閉干燥。  
中文名稱(chēng)：曲拉通X-405  
英文名字：Triton X-405  
分子式：(C2H4O)n.C14H22O  分子量：294.43  
物理性狀及指標(biāo)：  
外觀：……………………無(wú)色至淡黃色液體  
溶解性：…………………溶于水  
密度：……………………1.096 g/mL at 25 °C  
細(xì)胞培養(yǎng)測(cè)試：…………合格  
用途及描述：科研試劑，廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)，藥理學(xué)等科研方面。曲拉通是一種非離子性、非變性的去垢劑，適用于膜蛋白復(fù)合體的增溶、分離和提純以及凝膠電泳  
儲(chǔ)存條件：室溫，避光防潮密閉干燥。  
中文名稱(chēng)：樹(shù)脂  
英文名字：Immobilized Biotin Resin  
特點(diǎn)：  
Strong affinity for aidin, streptaidin and neutraidin. Reusable resin, at least 10 times.Coalently coupled to limit leaching. Spacer arm:9. For isolatin of aidin, streptaidin and neutraidin coupled molecules. Immunoprecipitations with aidin, streptaidin and neutraidin coupled antibodies.  
說(shuō)明：  
Immobilized Biotin Resin is designed for the high affinity chromatography purifications of aidin, streptaidin and neutraidin protein. The resin consists of biotin coupled to 6% cross-linked agarose. Biotin, a 244 Da itamin (itamin H) molecule, exhibits an extraordinary binding affinity for aidin (Ka=1015 M-1) and streptaidin. Biotin and aidin interaction is rapid and once the bond is established it can surie up to 3M guanidine-hydrochloride and extremes of pH. Biotin-aidin bonds can only be reersed by denaturing the aidin protein molecule with 8M guanidine-hydrochloride at pH1.5 or by boiling in SDS-PAGE sample loading buffer.  
用途及描述：科研試劑，蛋白純化與層析  
儲(chǔ)存條件： 2~8°C  
中文名稱(chēng)：鹽酸胍  
英文名字：Guanidine hydrochloride  
分子式：CH5N3.HCl    分子量：95.53  
物理性狀及指標(biāo)：  
外觀：………………………………白色結(jié)晶性粉末  
熔點(diǎn)：………………………………187-190℃  
溶解性：……………………………易溶于水和乙醇  
RNase,DNase,蛋白酶：…………不含  
熾灼殘?jiān)?hellip;………………………<0.1%  
純度：………………………………>99%  
pH(5%水, 25°C)………………4.5~6.0  
干燥失重：…………………………< 0.05%  
用途及描述：科研試劑，廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)。強(qiáng)離液劑，用以變性和復(fù)性蛋白質(zhì)。這種強(qiáng)勁的變性劑可以溶解不溶或變性的蛋白，如包涵體。這被用來(lái)作為復(fù)性到蛋白質(zhì)或酶復(fù)性到活性狀態(tài)的*步。  
儲(chǔ)存條件：18~25°C，避光防潮密閉干燥。  
中文名稱(chēng)：  
英文名字：Kallikrein  
物理性狀及指標(biāo)：  
外觀：……………………凍干粉  
樣物質(zhì)：………<0.05  
脂肪：……………………<0.1%  
激酶：……………………<0.8  
熾灼殘留：………………<3%  
干燥失重：………………<0.2%  
用途及描述：科研試劑  
儲(chǔ)存條件：2~8°C避光防潮密閉干燥。  
中文名稱(chēng)：乙二胺四乙酸鐵鈉鹽;EDTA鐵鈉水合物  
英文名字：EDTA, Iron (III), sodium salt  
中文名稱(chēng)：雜交液 I