上海莼試生物技術有限公司
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更新時間:2017-06-08 11:36:56瀏覽次數:278
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細胞名稱 Sars結構蛋白表達株;293 001A
形態特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 表達Sars結構蛋白
培養條件 IMDM: Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium 10%FBS
傳代方法 1:6傳代;2~3天1次
傳代情況 C4
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:11,12;D13S317:12;D16S539:9;D18S51:18;D19S433:18;D21S11:28,30.2;D2S1338:19;D3S1358:15,17;D5S818:8,9;D7S820:11,12;D8S1179:12,14;FGA:23;TH01:7,9.3;TPOX:11;vWA:16,19;
同工酶
染色體
使用權限 A類 Sars結構蛋白表達株;293 001A實驗方法和步驟
(一) 前處理 用臺稱稱量青蛙或蟾蜍的體重,然后按10微克/克動物體重的劑量,腹腔注射秋水仙素。
(二) 取材 注射4小時后,將動物處死,用剪刀剪開皮膚和肌肉,取出大腿骨和脛骨,剔凈股骨上的肌肉,然后用一小塊紗布來回搓干凈。剪開兩端股骨,用注射器(內裝5ml 1% 檸檬酸鈉溶液)緩慢沖洗骨髓細胞到離心管中,經平衡后離心8分鐘,速度為1000轉/分鐘。
(三) 低滲 吸去上清液,留沉淀物0.2ml,加0.046M KCL 溶液至8 ml 刻度,用吸管沖勻沉淀物,在恒溫水浴(28℃)處理20分鐘或更長一點時間。
(四) 固定 低滲后,以每分鐘1000轉速度離心10分鐘。用吸管小心吸去上清液,留0.2ml沉淀物,沖散后沿管壁慢慢加入6ml固定液。 沖勻后靜止固定20分鐘。重復固定1~2次,離心的速度與時間以上述相同。
(五) 滴片 吸去上清液,留0.2ml沉淀物,加4滴新配的固定液,沖勻沉淀物。從冰箱取出預先冷凍的載片,每片滴3滴細胞懸液,立即用嘴向載片上吹氣,使細胞均勻分散,在酒精燈火焰上來回烤一下,以助染色體更好分散和展開。 (六) 染色 用10:1 Giemsa染液染色20分鐘(Giemsa原液用PH=6.8磷酸緩沖液稀釋),然后用水沖洗,片干后鏡檢。 (七) 鏡檢 在中倍鏡下找染色體分散好的中期分裂相,轉至高倍鏡詳細觀察兩棲類染色體的數目,屬于大、中、小染色體各有多少條。
注意事項:
1.收到細胞后,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們。
2.收到細胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養箱靜置2-4小時(視細胞密度而定)穩定細胞狀態。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收細胞時就整體外觀拍一張照片,觀察培養基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細胞狀態,100*,200*各一張),觀察記錄細胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進行銷售依據。
3.由于細胞狀態受環境、操作和運輸等多方面因素影響,故本公司只保證客戶收到細胞后一周內的細胞狀態,故客戶需要售后時需出示收到細胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發現問題后客服人員溝通的時間證明,期間間隔時間不能大于7天。
4.所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
使用說明:
1. 貼壁細胞樣品:
A. 染色完畢后,吸盡液體。
B. 滴一滴抗熒光衰減封片液于載玻片上,蓋上貼有細胞的蓋玻片,讓細胞接觸封片液,盡量避免氣泡。
C. 隨后即可通過熒光顯微鏡觀察樣品。
2. 組織切片:
A. 染色完畢后,吸盡液體。
B. 滴一滴抗熒光衰減封片液于組織切片上,蓋上蓋玻片,讓切片接觸封片液,盡量避免氣泡。
C. 隨后即可通過熒光顯微鏡觀察樣品。3. 其它樣品: 其它樣品參考細胞樣品或組織切片進行操作。
注意事項:
1. 熒光物質均易發生衰減,染色后的樣品宜避光保存。
2. 在使用抗衰減封片液的情況下可以減緩衰減,但仍宜盡量避光。
3. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
中文名稱:切片石蠟(52-54℃)
英文名字:Paraffin with ceresin
物理性狀及指標:
外觀:……………………白色或淡黃色半透明固體
熔點:……………………52-54℃
沸點:……………………350℃
用途及描述:科研試劑。植物和動物組織、病理顯微鏡檢測的潤滑劑,也用于制藥工業。
產品優點:
活的細胞或組織多為無色透明,各種組織間和細胞內各種結構之間均缺乏反差,在一般光鏡下不易清楚區別出;組織離開機體后很快就會死亡和產生組織,失去原有正常結構,此,組織要固定、石蠟包埋、切片及染色等步驟以免細胞組織死亡,而能清晰辨認其形態結構。
產品特性:
無毒,無味,易溶化,存儲方便,用于醫院病理切片,工業產品添加劑等
儲存條件:室溫,避光防潮密閉干燥。
中文名稱:切片石蠟(56-58℃)
英文名字:Paraffin with ceresin
物理性狀及指標:
外觀:……………………白色或淡黃色半透明固體
熔點:……………………56-58℃
沸點:……………………350℃
用途及描述:科研試劑。植物和動物組織、病理顯微鏡檢測的潤滑劑,也用于制藥工業。
產品優點:
活的細胞或組織多為無色透明,各種組織間和細胞內各種結構之間均缺乏反差,在一般光鏡下不易清楚區別出;組織離開機體后很快就會死亡和產生組織,失去原有正常結構,此,組織要固定、石蠟包埋、切片及染色等步驟以免細胞組織死亡,而能清晰辨認其形態結構。
產品特性:
無毒,無味,易溶化,存儲方便,用于醫院病理切片,工業產品添加劑等
儲存條件:室溫,避光防潮密閉干燥。
中文名稱:蘇木素伊紅(HE)染色試劑盒
英文名字:Hematoxylin and Eosin Staining Kit
產品描述
蘇木素-伊紅染色法( Hematoxylin-Eosin staining ),簡稱HE染色法,是病理學常規制片中zui基本的染色方法。蘇木素染液為堿性,主要使細胞核內的染色質與胞質內的核糖體著紫藍色;伊紅為酸性染料,主要使細胞質和細胞外基質中的成分著紅色。染色過程需要優化,著況與組織或細胞的種類有關,也隨其生活周期及病理變化而改變。例如,很多細胞在新生時期胞漿對伊紅著色較淡或輕度嗜堿,當其衰老時或發生退行性變則呈現嗜伊紅濃染。膠原纖維在老化和出現透明變性時,伊紅著色由淺變深。本產品所包含試劑均為工作液,可直接使用。
保存條件
常溫保存,有效期至少一年。