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上海莼試生物技術有限公司

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您現在的位置: 上海莼試生物技術有限公司>>ATCC細胞>>人類細胞>> 雙位點HC-kit受體細胞株;DMF7

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雙位點HC-kit受體細胞株;DMF7
雙位點HC-kit受體細胞株;DMF7
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更新時間:2017-06-08 11:27:46瀏覽次數:367

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【簡單介紹】
雙位點HC-kit受體細胞株;DMF7,采用干冰保存運輸收到細胞時,若干冰已經*融化,請立即將細胞復蘇培養;若尚留有干冰,請立即將細胞放入液氮中保存待用,請按條件貯存細胞,切不可將細胞置于高溫環境。

細胞名稱  雙位點HC-kit受體細胞株;DMF7  
形態特性   圓形   
生長特性  懸浮生長   
特征特性   該細胞株由陳松森教授實驗室建立;雙位點Cys151和Cys183突變的c-Kit基因轉染293ET細胞,篩選獲得。   
培養條件   DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS;IL-3 or rhGM-CSF   
傳代方法   1:3傳代;3~4天1次。  
傳代情況  不詳  
凍存條件   基礎培養基+5%DMSO+20%FBS   
支原體檢測  培養法(-)   
STR      
同工酶    
染色體      
使用權限  A類雙位點HC-kit受體細胞株;DMF7實驗方法和步驟
(一) 前處理 用臺稱稱量青蛙或蟾蜍的體重,然后按10微克/克動物體重的劑量,腹腔注射秋水仙素。
(二) 取材 注射4小時后,將動物處死,用剪刀剪開皮膚和肌肉,取出大腿骨和脛骨,剔凈股骨上的肌肉,然后用一小塊紗布來回搓干凈。剪開兩端股骨,用注射器(內裝5ml 1% 檸檬酸鈉溶液)緩慢沖洗骨髓細胞到離心管中,經平衡后離心8分鐘,速度為1000轉/分鐘。
(三) 低滲 吸去上清液,留沉淀物0.2ml,加0.046M KCL 溶液至8 ml 刻度,用吸管沖勻沉淀物,在恒溫水浴(28℃)處理20分鐘或更長一點時間。
(四) 固定 低滲后,以每分鐘1000轉速度離心10分鐘。用吸管小心吸去上清液,留0.2ml沉淀物,沖散后沿管壁慢慢加入6ml固定液。 沖勻后靜止固定20分鐘。重復固定1~2次,離心的速度與時間以上述相同。
(五) 滴片 吸去上清液,留0.2ml沉淀物,加4滴新配的固定液,沖勻沉淀物。從冰箱取出預先冷凍的載片,每片滴3滴細胞懸液,立即用嘴向載片上吹氣,使細胞均勻分散,在酒精燈火焰上來回烤一下,以助染色體更好分散和展開。 (六) 染色 用10:1 Giemsa染液染色20分鐘(Giemsa原液用PH=6.8磷酸緩沖液稀釋),然后用水沖洗,片干后鏡檢。 (七) 鏡檢 在中倍鏡下找染色體分散好的中期分裂相,轉至高倍鏡詳細觀察兩棲類染色體的數目,屬于大、中、小染色體各有多少條。
注意事項:
1.收到細胞后,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們。
2.收到細胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養箱靜置2-4小時(視細胞密度而定)穩定細胞狀態。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收細胞時就整體外觀拍一張照片,觀察培養基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細胞狀態,100*,200*各一張),觀察記錄細胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進行銷售依據。
3.由于細胞狀態受環境、操作和運輸等多方面因素影響,故本公司只保證客戶收到細胞后一周內的細胞狀態,故客戶需要售后時需出示收到細胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發現問題后客服人員溝通的時間證明,期間間隔時間不能大于7天。
4.所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
2)細胞鑒定:波形蛋白(imentin)免疫熒光染色為陽性。  
3)鑒定細胞純度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細菌、酵母和真菌。  
5)細胞生長方式:長梭形細胞,不規則細胞,貼壁培養。  
雪旺細胞  
細胞詳述:  
    雪旺細胞沿神元的突起分布,包裹在神纖維上,雪旺細胞的外表面有基膜,能分泌神營養子,促進受損的神元的存活及其軸突的再生,參與周圍神系統中神纖維的構成。研究表明,神元延伸時對與其接觸的底物是非常具有選擇性的,而且一旦與雪旺細胞接觸,神纖維的延伸就會嚴格限制在Bungner帶內。  
細胞特性:  
1)        組織來源于實驗動物的正常腦組織。  
2)        細胞鑒定:GFAP免疫熒光染色為陽性。  
3)        鑒定細胞純度高于90%。  
4)        不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細菌、酵母和真菌。  
5)        細胞生長方式:長梭形細胞,不規則細胞,貼壁培養。  
星形膠質細胞  
細胞詳述:  
星形膠質細胞,是膠質細胞中體積zui大的一種。從胞體發出許多長而分支的突起,伸展充填在神細胞的胞體及其突起之間,起支持和分隔神細胞的作用。  
纖維性星形膠質細胞多分布在腦脊髓的皮質,突起細長,分支較少,胞質中含,多分布在灰質,細胞突起粗短,分支多。胞質內膠質絲較少,又稱苔狀細胞。電鏡下星形膠質細胞的胞核有缺失,胞質較清亮,游離核糖核蛋白體和粗面內質網均很少,糖原顆粒豐富,有大量的膠質絲。纖維形星形膠質細胞的突起呈長圓柱形,而原漿性星形膠質細胞的突起呈薄片狀,并常包裹著神細胞及其突觸。星形膠質細胞的腳板與血管內皮細胞之間相隔一層基板,腳板質膜與基板接觸處有半橋粒結構。  
細胞特性:  
1)      組織來源于實驗動物的正常腦組織。  
2)      細胞鑒定:神膠質纖維酸性蛋白(GFAP)免疫熒光染色法。  
3)      鑒定細胞純度高于90%。  
4)      不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細菌、酵母和真菌。  
5)      細胞生長方式:星狀細胞,貼壁培養。  
NK細胞  
細胞詳述  
自然殺傷細胞(natural killer cell,NK)是機體重要的免疫細胞,不僅與抗腫瘤、 抗病毒感染和免疫調節有關,而且在某些情況下參與超敏反應和自身免疫性疾病的發生。一種穩定表達在NK和LAK細胞表面的LAK-1分子,120kDa,NK細胞在IL-2條件下培養20天LAK-1仍為陽性,而HNK-1(CD57)和CD16部分消失。LAK的殺傷活性可被抗LAK-1 McAb所抑制。  
自然殺傷細胞刺激子(natural killer cell stimulatory factor,NKSF) 對NK細胞有刺激作用。IL-2、IL-12、IFN-α、TNF-α以及白細胞調節素(leukoregulin,LR) 對NK細胞的活化和分化有正調節作用, 體外培養時加入上述細胞子可明顯提高NK的殺傷活性。前列腺素 (PG)E1、E2、D2和腎上腺皮質激素等對NK細胞的活性有抑制作用。  
細胞特性  
1)組織來源于實驗動物的正常外周血組織。  
2)細胞鑒定:CD56和CD16免疫熒光染色為陽性。  
3)鑒定細胞純度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細菌、酵母和真菌。  
5)細胞生長方式:圓形或橢圓形細胞,不規則細胞,貼壁培養。  
內皮祖細胞  
細胞詳述  
內皮祖細胞是血管內皮細胞的前體細胞,在生理或病理素刺激下,可從骨髓動員到外周血參與損傷血管的修復研究顯示,內皮祖細胞在心腦血管疾病、外周血管疾病、腫瘤血管形成及創傷愈合等方面均發揮重要作用,并為缺血性疾病的研究治療提供了新思路。  
內皮祖細胞具有游走特性,能進一步增殖分化的幼稚內皮細胞,缺乏成熟內皮細胞的特征性表型,不能形成管腔樣結構。其功能主要為參與了出生后缺血組織的血管發生和血管損傷后的修復。  
細胞特性  
1)組織來源于實驗動物的正常骨髓血組織。  
2)細胞鑒定:CD31和CD34免疫熒光染色為陽性。  
3)鑒定細胞純度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細菌、酵母和真菌。



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