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上海莼試生物技術有限公司

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人類成纖維細胞系;CNLMG-B5537SKIN
人類成纖維細胞系;CNLMG-B5537SKIN
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更新時間:2017-06-06 10:07:44瀏覽次數:828

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【簡單介紹】
人類成纖維細胞系;CNLMG-B5537SKIN
收到細胞時,若干冰已經*融化,請立即將細胞復蘇培養;若尚留有干冰,請立即將細胞放入液氮中保存待用,請按條件貯存細胞,切不可將細胞置于高溫環境。

公司是*的ATCC細胞供應商,提供人類成纖維細胞系;CNLMG-B5537SKIN
的報價,咨詢,稱技術服務,咨詢選購
細胞名稱  人類成纖維細胞系;CNLMG-B5537SKIN  
形態特性   成纖維細胞樣   
生長特性  貼壁生長  
特征特性   該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。   
培養條件   MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS  
傳代方法   1:3傳代,3-4天傳1次  
傳代情況  C6  
凍存條件   基礎培養基+5%DMSO+20%FBS   
支原體檢測  陰性   
STR    
同工酶    
染色體    

使用權限  未定 培養需要滿足以下條件
1、無菌、無毒的環境:首先應保證被培養的細胞處于無菌、無毒的環境,即對培養液和所有的培養用具進行無菌處理。通常還要在培養液中添加一定量的抗生素以防培養過程中的污染。

2、營養物質:細胞體外培養所需營養物質與體內基本相同,需要有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。

3、溫度和pH:細胞體外培養的適宜溫度一般與動物的體溫相近。多數細胞生存的適宜pH為7.2~7.4。

4、氣體環境:培養所需氣體主要有O2和CO2,O2是細胞代謝所必需的,CO2的主要作用是維持培養液的pH。進行細胞培養時,通常采用培養皿或松蓋培養瓶,將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養箱中進行培養。

操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
口腔上皮細胞是一種上皮細胞。人的口腔上皮細胞是扁平、多邊形的,形狀不很規則。 口腔各壁都有黏膜覆蓋。口腔上皮細胞主要分布在口腔兩側頰部。  
上皮的垂直切面上,細胞形狀不一。緊靠基膜的一層基底細胞為矮柱狀,為具有增殖分化能力的干細胞,部分子細胞向淺層移動。基底層以上是數層多邊形細胞,再上為幾層梭形或扁平細胞。僅靠近表面幾層細胞為扁平狀,基底層細胞能不斷分裂增生,以補充表層衰老或損傷脫落的細胞。復層扁平上皮深層的結締組織內有豐富的毛細血管,有利于復層扁平上皮的營養。  
細胞特性  
1)組織來源于實驗動物的口腔黏膜組織。  

2)細胞鑒定:廣譜角蛋白(PCK)免疫熒光染色為陽性。  
3)經鑒定細胞純度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細菌、酵母和真菌。  
5)細胞生長方式:上皮樣,不規則細胞,貼壁培養。  
舌表皮細胞  
細胞詳述  
舌表皮細胞經常輕度教化脫落,與唾液和食物碎屑混合而形成一層白色薄苔。表皮細胞的主要作用是保護,同時還兼有其他功能,如分泌角質層等,具有很強的角質化特征。  
細胞特性  
1)組織來源于實驗動物的正常舌組織。  
2)細胞鑒定:廣譜角蛋白(PCK)免疫熒光染色為陽性。  
3)經鑒定細胞純度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細菌、酵母和真菌。  
5)細胞生長方式:鋪路石狀細胞,不規則細胞,貼壁培養。  
鼓膜上皮干細胞  
細胞詳述  
鼓膜也稱耳膜,為一彈性灰白色半透明薄膜,將外耳道與中耳隔開。鼓膜穿孔不能愈合,可能與干細胞受損或增殖抑制有關。鼓膜上皮干細胞的分布與鼓膜的血供豐富的區域*。  
鼓膜上皮干細胞高表達β1整合素,有很強的黏附型,對Ⅳ型膠原的黏附鼻其他細胞更快、更強。  
細胞特性  
1)組織來源于實驗動物的正常鼓膜組織。  
2)細胞鑒定:廣譜角蛋白(PCK)免疫熒光染色為陽性。  
3)經鑒定細胞純度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細菌、酵母和真菌。  
5)細胞生長方式:鋪路石狀細胞,不規則細胞,貼壁培養。  
角膜上皮細胞  
細胞詳述  
角膜位于眼球前壁的一層透明膜,約占纖維膜的前1/6,從后面看角膜呈正圓形,從前面看為橫橢圓形。角膜厚度各部分不同,部zui薄。角膜分為五層,由前向后依次為:上皮細胞層、前彈力層、基質層、后彈力層、內皮細胞層。  
角膜上皮細胞的體外培養對研究角膜的生理學、病理學、免疫學以及分子生物學都是極為重要的手段,常用于研究細胞代謝產物、病毒感染、各種生長子和藥物對細胞生長的影響。  
細胞特性  
1)組織來源于實驗動物的正常眼組織。  
2)細胞鑒定:廣譜角蛋白(PCK)免疫熒光染色為陽性。  
3)經鑒定細胞純度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細菌、酵母和真菌。  
5)細胞生長方式:上皮樣,不規則細胞,貼壁培養。  
腦微血管內皮細胞  
細胞詳述  
腦微血管內皮細胞是血腦屏障的主要組成成分,能夠限制可溶性物質和細胞等從血液進入大腦。大腦微血管內皮細胞與外周內皮細胞相比具有一些相同特性。  
腦微血管內皮細胞存在許多細胞間緊密連接,產生很高的跨內皮阻抗,延遲細胞旁的通量;腦微血管的內皮細胞間銜接得十分緊密,不象其他組織的血管內皮細



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