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上海莼試生物技術有限公司
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更新時間:2017-06-06 09:54:11瀏覽次數:359
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公司是*的ATCC細胞供應商,提供人胚肺細胞VA13細胞;WI-38 VA13亞系2RA 的報價,咨詢,稱技術服務,咨詢選購。
細胞名稱 人胚肺細胞VA13細胞;WI-38 VA13亞系2RA
形態特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞系衍生自WI-38細胞。WI-38細胞感染低滴度的SV40病毒,經過連續傳代、克隆選擇獲得多株亞系,其中2RA亞系含有SV40 neo (T)和轉移抗原,從而改變其有限細胞系的特性,可在常規條件下連續傳代。該細胞系的實驗操作甚少在生物安全P2級條件下進行。
培養條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C265
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR STR鑒定
同工酶
染色體
使用權限 A類培養需要滿足以下條件
1、無菌、無毒的環境:首先應保證被培養的細胞處于無菌、無毒的環境,即對培養液和所有的培養用具進行無菌處理。通常還要在培養液中添加一定量的抗生素以防培養過程中的污染。
2、營養物質:細胞體外培養所需營養物質與體內基本相同,需要有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。
3、溫度和pH:細胞體外培養的適宜溫度一般與動物的體溫相近。多數細胞生存的適宜pH為7.2~7.4。
4、氣體環境:培養所需氣體主要有O2和CO2,O2是細胞代謝所必需的,CO2的主要作用是維持培養液的pH。進行細胞培養時,通常采用培養皿或松蓋培養瓶,將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養箱中進行培養。
操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
3)棄去T25瓶中的培養基,添加6ml本公司附帶的*培養基。
4)如果細胞密度達80%-90%請及時進行細胞傳代,傳代培養用6ml本公司附帶的*培養基。
5)接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發現污染或疑似污染,請及時與我們取得。
胰腺癌細胞
胞介紹
該細胞來源于一位40歲白人男性患者的肝轉移。細胞表達粘液素,Rh+, HLA A2,,A9,B13,B17。含有刺激素受體和乙二醇激素受體。
細胞特性
1)來源:胰腺癌,肝轉移
2)形態:上皮細胞樣,貼壁生長
3)含量:>1x106 個/mL
4)污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
細胞接受后的處理:
1)收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發給我們。
2)請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態,去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養基,添加6ml本公司附帶的*培養基。
4)如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代,傳代培養用6ml本公司附帶的*培養基。
5)接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發現污染或疑似污染,請及時與我們取得。
細胞用途:僅供科研使用。
人卵巢癌細胞
人胰腺導管腺癌細胞
人卵巢透明細胞癌細胞
細胞介紹
ES-2細胞系建自45歲女性黑人的外科腫瘤標本。該腫瘤為低分化卵巢透明細胞癌。該細胞zui初生長在軟瓊脂中。在裸鼠中成瘤。該細胞對多種藥物包括doxorubicin, cisplatin, carmustine, etoposide 和cyanomorpholinodoxorubicin (MRA-CN)表現出低到中等的耐受性。ES-2細胞表達低水平的P糖蛋白。
細胞特性
1)來源:透明細胞癌,卵巢
2)形態:成纖維細胞
3)含量:>1x106 個/mL
4)污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
運輸和保存:可選擇干冰運輸及發送復蘇存活細胞方式:(1)干冰運輸,收到后立即轉入液氮凍存或直接復蘇;(2)存活細胞,收到后應繼續生長,傳代達到細胞生長狀態良好時,再進行凍存。
人卵巢腺癌細胞
細胞介紹
OCAR-3細胞由T.C.Hamilton在1982年建系。取于患進行性卵巢腺癌病人的惡性腹水。NIH-OCAR-3是研究卵巢癌藥物抗性的一個合適的模型系統且由于存在激素受體,這對于激素治療的評估是有用的。
細胞特性
1)來源:卵巢
2)形態:上皮細胞樣
3)含量:>1x106 個/mL
4)污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
運輸和保存:可選擇干冰運輸及發送復蘇存活細胞方式:(1)干冰運輸,收到后立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇;(2)存活細胞,收到后應繼續生長,傳代達到細胞生長狀態良好時,再進行凍存。
人子宮頸表皮癌細胞
細胞介紹
這株細胞是J. Sykes于1974年建立的(參考ATCC HTB-33)。 有報告稱MS751細胞含有人狀瘤病毒18 (HP-18)序列。后來發現MS751細胞包含HP-45基組的一部分,而其中E6/E7區域表達呈poly(A)+RNA的形式。