上海莼試生物技術有限公司
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更新時間:2017-06-01 09:19:34瀏覽次數:354
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公司是*的ATCC細胞供應商,提供婆羅門牛皮膚成纖維樣細胞;BOS-3的報價,咨詢,稱技術服務,咨詢選購。
細胞名稱 婆羅門牛皮膚成纖維樣細胞;BOS-3
形態特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞系來源于一雌性婆羅門牛的耳部皮膚組織,2010年由中科院昆明細胞庫建立。
培養條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況 P2
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權限 A類
培養需要滿足以下條件
1、無菌、無毒的環境:首先應保證被培養的細胞處于無菌、無毒的環境,即對培養液和所有的培養用具進行無菌處理。通常還要在培養液中添加一定量的抗生素以防培養過程中的污染。
2、營養物質:細胞體外培養所需營養物質與體內基本相同,需要有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。
3、溫度和pH:細胞體外培養的適宜溫度一般與動物的體溫相近。多數細胞生存的適宜pH為7.2~7.4。
4、氣體環境:培養所需氣體主要有O2和CO2,O2是細胞代謝所必需的,CO2的主要作用是維持培養液的pH。進行細胞培養時,通常采用培養皿或松蓋培養瓶,將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養箱中進行培養。
操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
TNFAIP8L1 cDNA Rat 大鼠 TNFAIP8L1 基因全長ORF克隆
RPS6 cDNA Rat 大鼠 RPS6 基因全長ORF克隆
CLPS cDNA Rat 大鼠 CLPS 基因全長ORF克隆
TTR cDNA Rat 大鼠 TTR 基因全長ORF克隆
TPPP3 cDNA Rat 大鼠 TPPP3 基因全長ORF克隆
GZMC cDNA Rat 大鼠 GZMC 基因全長ORF克隆
PPIB cDNA Rat 大鼠 PPIB 基因全長ORF克隆
GABARAPL2 cDNA Rat 大鼠 GABARAPL2 基因全長ORF克隆
RPL10 cDNA Rat 大鼠 RPL10 基因全長ORF克隆
F2 cDNA Rat 大鼠 F2 基因全長ORF克隆
CCL6 cDNA Rat 大鼠 CCL6 基因全長ORF克隆
TIMM17B cDNA Rat 大鼠 TIMM17B 基因全長ORF克隆
UBE2N cDNA Rat 大鼠 UBE2N 基因全長ORF克隆
COQ7 cDNA Rat 大鼠 COQ7 基因全長ORF克隆
OSTC cDNA Rat 大鼠 OSTC 基因全長ORF克隆
MGST1 cDNA Rat 大鼠 MGST1 基因全長ORF克隆
CPA2 cDNA Rat 大鼠 CPA2 基因全長ORF克隆
POLR2E cDNA Rat 大鼠 POLR2E 基因全長ORF克隆
GSTM1 cDNA Rat 大鼠 GSTM1 基因全長ORF克隆
CTHRC1 cDNA Rat 大鼠 CTHRC1 基因全長ORF克隆
MGST3 cDNA Rat 大鼠 MGST3 基因全長ORF克隆
PRDX2 cDNA Rat 大鼠 PRDX2 基因全長ORF克隆
ECH1 cDNA Rat 大鼠 ECH1 基因全長ORF克隆
RPL15 cDNA Rat 大鼠 RPL15 基因全長ORF克隆
GSTM7 cDNA Rat 大鼠 GSTM7 基因全長ORF克隆
NPC2 cDNA Rat 大鼠 NPC2 基因全長ORF克隆
NGP cDNA Rat 大鼠 NGP 基因全長ORF克隆
CNFN cDNA Rat 大鼠 CNFN 基因全長ORF克隆
BPIFA2F cDNA Rat 大鼠 BPIFA2F 基因全長ORF克隆
SIN3B cDNA Rat 大鼠 SIN3B 基因全長ORF克隆
APOH cDNA Rat 大鼠 APOH 基因全長ORF克隆
DAD1 cDNA Rat 大鼠 DAD1 基因全長ORF克隆
PRL8A9 cDNA Rat 大鼠 PRL8A9 基因全長ORF克隆
TAF9 cDNA Rat 大鼠 TAF9 基因全長ORF克隆
RTN1 cDNA Rat 大鼠 RTN1 基因全長ORF克隆
APOC2 cDNA Rat 大鼠 APOC2 基因全長ORF克隆
CRYAB cDNA Rat 大鼠 CRYAB 基因全長ORF克隆
SPC25 cDNA Rat 大鼠 SPC25 基因全長ORF克隆
NDUFA3 cDNA Rat 大鼠 NDUFA3 基因全長ORF克隆
UBB cDNA Rat 大鼠 UBB 基因全長ORF克隆
ALDOA cDNA Rat 大鼠 ALDOA 基因全長ORF克隆
RAMP3 cDNA Rat 大鼠 RAMP3 基因全長ORF克隆
ENO3 cDNA Rat 大鼠 ENO3 基因全長ORF克隆
RPL36A cDNA Rat 大鼠 RPL36A 基因全長ORF克隆
SERPINF2 cDNA Rat 大鼠 SERPINF2 基因全長ORF克隆
ACAT2 cDNA Rat 大鼠 ACAT2 基因全長ORF克隆
HN1 cDNA Rat 大鼠 HN1 基因全長ORF克隆
UQCRQ cDNA Rat 大鼠 UQCRQ 基因全長ORF克隆