上海莼試生物技術有限公司
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更新時間:2017-06-01 09:09:53瀏覽次數:232
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細胞名稱 非洲綠猴腎細胞系/HCV-E1;Vero-HCV-E1
形態特性 上皮樣細胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 Vero-HCV-E1細胞整合有丙型肝炎病毒的E1基因,能穩定表達E1蛋白,是HCV基礎研究的*摸型。它由武漢大學病毒學國家重點實驗室郭佳博士于2008年構建并保存。
培養條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C23
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
使用權限 A類
非洲綠猴腎細胞系/HCV-E1;Vero-HCV-E1實驗方法和步驟
(一) 前處理 用臺稱稱量青蛙或蟾蜍的體重,然后按10微克/克動物體重的劑量,腹腔注射秋水仙素。
(二) 取材 注射4小時后,將動物處死,用剪刀剪開皮膚和肌肉,取出大腿骨和脛骨,剔凈股骨上的肌肉,然后用一小塊紗布來回搓干凈。剪開兩端股骨,用注射器(內裝5ml 1% 檸檬酸鈉溶液)緩慢沖洗骨髓細胞到離心管中,經平衡后離心8分鐘,速度為1000轉/分鐘。
(三) 低滲 吸去上清液,留沉淀物0.2ml,加0.046M KCL 溶液至8 ml 刻度,用吸管沖勻沉淀物,在恒溫水浴(28℃)處理20分鐘或更長一點時間。
(四) 固定 低滲后,以每分鐘1000轉速度離心10分鐘。用吸管小心吸去上清液,留0.2ml沉淀物,沖散后沿管壁慢慢加入6ml固定液。 沖勻后靜止固定20分鐘。重復固定1~2次,離心的速度與時間以上述相同。
(五) 滴片 吸去上清液,留0.2ml沉淀物,加4滴新配的固定液,沖勻沉淀物。從冰箱取出預先冷凍的載片,每片滴3滴細胞懸液,立即用嘴向載片上吹氣,使細胞均勻分散,在酒精燈火焰上來回烤一下,以助染色體更好分散和展開。 (六) 染色 用10:1 Giemsa染液染色20分鐘(Giemsa原液用PH=6.8磷酸緩沖液稀釋),然后用水沖洗,片干后鏡檢。 (七) 鏡檢 在中倍鏡下找染色體分散好的中期分裂相,轉至高倍鏡詳細觀察兩棲類染色體的數目,屬于大、中、小染色體各有多少條。
注意事項:
1.收到細胞后,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們。
2.收到細胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養箱靜置2-4小時(視細胞密度而定)穩定細胞狀態。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收細胞時就整體外觀拍一張照片,觀察培養基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細胞狀態,100*,200*各一張),觀察記錄細胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進行銷售依據。
3.由于細胞狀態受環境、操作和運輸等多方面因素影響,故本公司只保證客戶收到細胞后一周內的細胞狀態,故客戶需要售后時需出示收到細胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發現問題后客服人員溝通的時間證明,期間間隔時間不能大于7天。
4.所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
TLR10 cDNA Rat 大鼠 TLR10 基因全長ORF克隆
TLR6 cDNA Rat 大鼠 TLR6 基因全長ORF克隆
NCAM1 cDNA Rat 大鼠 NCAM1 基因全長ORF克隆
CD207 cDNA Rat 大鼠 CD207 基因全長ORF克隆
OPCML cDNA Rat 大鼠 OPCML 基因全長ORF克隆
CHODL cDNA Rat 大鼠 CHODL 基因全長ORF克隆
IL23R cDNA Rat 大鼠 IL23R 基因全長ORF克隆
COLEC12 cDNA Rat 大鼠 COLEC12 基因全長ORF克隆
LGALS3 cDNA Rat 大鼠 LGALS3 基因全長ORF克隆
CLEC4A3 cDNA Rat 大鼠 CLEC4A3 基因全長ORF克隆
CD247 cDNA Rat 大鼠 CD247 基因全長ORF克隆
SLC4A1 cDNA Rat 大鼠 SLC4A1 基因全長ORF克隆
TLR4 cDNA Rat 大鼠 TLR4 基因全長ORF克隆
FZD9 cDNA Rat 大鼠 FZD9 基因全長ORF克隆
ENPEP cDNA Rat 大鼠 ENPEP 基因全長ORF克隆
TLR9 cDNA Rat 大鼠 TLR9 基因全長ORF克隆
IL1A cDNA Rat 大鼠 IL1A 基因全長ORF克隆
ART1 cDNA Rat 大鼠 ART1 基因全長ORF克隆
ICOS cDNA Rat 大鼠 ICOS 基因全長ORF克隆
CD276 cDNA Rat 大鼠 CD276 基因全長ORF克隆
PRNP cDNA Rat 大鼠 PRNP 基因全長ORF克隆
NCR1 cDNA Rat 大鼠 NCR1 基因全長ORF克隆
FZD4 cDNA Rat 大鼠 FZD4 基因全長ORF克隆
JAM2 cDNA Rat 大鼠 JAM2 基因全長ORF克隆
CD320 cDNA Rat 大鼠 CD320 基因全長ORF克隆
CD5 cDNA Rat 大鼠 CD5 基因全長ORF克隆
GYPC cDNA Rat 大鼠 GYPC 基因全長ORF克隆
MRC1 cDNA Rat 大鼠 MRC1 基因全長ORF克隆
KLRC1 cDNA Rat 大鼠 KLRC1 基因全長ORF克隆
LAG3 cDNA Rat 大鼠 LAG3 基因全長ORF克隆
IFITM1 cDNA Rat 大鼠 IFITM1 基因全長ORF克隆
GGT1 cDNA Rat 大鼠 GGT1 基因全長ORF克隆
MSR1 cDNA Rat 大鼠 MSR1 基因全長ORF克隆
CCR8 cDNA Rat 大鼠 CCR8 基因全長ORF克隆
CCR7 cDNA Rat 大鼠 CCR7 基因全長ORF克隆
CCR6 cDNA Rat 大鼠 CCR6 基因全長ORF克隆
CCR5 cDNA Rat 大鼠 CCR5 基因全長ORF克隆
CCR4 cDNA Rat 大鼠 CCR4 基因全長ORF克隆
CCR1 cDNA Rat 大鼠 CCR1 基因全長ORF克隆
CD164 cDNA Rat 大鼠 CD164 基因全長ORF克隆
IL15 cDNA Rat 大鼠 IL15 基因全長ORF克隆
IL12B cDNA Rat 大鼠 IL12B 基因全長ORF克隆
BST1 cDNA Rat 大鼠 BST1 基因全長ORF克隆
ADAM17 cDNA Rat 大鼠 ADAM17 基因全長ORF克隆
SLAMF1 cDNA Rat 大鼠 SLAMF1 基因全長ORF克隆
THBD cDNA Rat 大鼠 THBD 基因全長ORF克隆
PDGFRB cDNA Rat 大鼠 PDGFRB 基因全長ORF克隆