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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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更新時(shí)間：2017-06-01 09:09:53瀏覽次數(shù)：256
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細(xì)胞名稱 非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-E1；Vero-HCV-E1
形態(tài)特性 上皮樣細(xì)胞
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 Vero-HCV-E1細(xì)胞整合有丙型肝炎病毒的E1基因，能穩(wěn)定表達(dá)E1蛋白，是HCV基礎(chǔ)研究的*摸型。它由武漢大學(xué)病毒學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室郭佳博士于2008年構(gòu)建并保存。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C23
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
使用權(quán)限 A類
非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-E1；Vero-HCV-E1實(shí)驗(yàn)方法和步驟
(一) 前處理 用臺(tái)稱稱量青蛙或蟾蜍的體重，然后按10微克／克動(dòng)物體重的劑量,腹腔注射秋水仙素。
(二) 取材 注射4小時(shí)后，將動(dòng)物處死，用剪刀剪開皮膚和肌肉，取出大腿骨和脛骨，剔凈股骨上的肌肉，然后用一小塊紗布來(lái)回搓干凈。剪開兩端股骨，用注射器（內(nèi)裝5ml 1％ 檸檬酸鈉溶液）緩慢沖洗骨髓細(xì)胞到離心管中，經(jīng)平衡后離心8分鐘，速度為1000轉(zhuǎn)／分鐘。
(三) 低滲 吸去上清液，留沉淀物0.2ml，加0.046M KCL 溶液至8 ml 刻度，用吸管沖勻沉淀物，在恒溫水浴(28℃)處理20分鐘或更長(zhǎng)一點(diǎn)時(shí)間。
(四) 固定 低滲后，以每分鐘1000轉(zhuǎn)速度離心10分鐘。用吸管小心吸去上清液，留0.2ml沉淀物，沖散后沿管壁慢慢加入6ml固定液。 沖勻后靜止固定20分鐘。重復(fù)固定1～2次，離心的速度與時(shí)間以上述相同。
(五) 滴片 吸去上清液，留0.2ml沉淀物，加4滴新配的固定液，沖勻沉淀物。從冰箱取出預(yù)先冷凍的載片，每片滴3滴細(xì)胞懸液，立即用嘴向載片上吹氣，使細(xì)胞均勻分散，在酒精燈火焰上來(lái)回烤一下，以助染色體更好分散和展開。 (六) 染色 用10：1 Giemsa染液染色20分鐘(Giemsa原液用PH＝6.8磷酸緩沖液稀釋)，然后用水沖洗，片干后鏡檢。 (七) 鏡檢 在中倍鏡下找染色體分散好的中期分裂相，轉(zhuǎn)至高倍鏡詳細(xì)觀察兩棲類染色體的數(shù)目，屬于大、中、小染色體各有多少條。
注意事項(xiàng)：
1.收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請(qǐng)立即與我們。
2.收到細(xì)胞先不開瓶蓋，瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)（視細(xì)胞密度而定）穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收細(xì)胞時(shí)就整體外觀拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài)，100*，200*各一張），觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過(guò)程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊懀时竟局槐ＷC客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài)，故客戶需要售后時(shí)需出示收到細(xì)胞的時(shí)間證明及客戶提供收貨時(shí)間和發(fā)現(xiàn)問(wèn)題后客服人員溝通的時(shí)間證明，期間間隔時(shí)間不能大于7天。
4.所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作，并請(qǐng)注意防護(hù)，所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
TLR10 cDNA Rat 大鼠 TLR10 基因全長(zhǎng)ORF克隆
TLR6 cDNA Rat 大鼠 TLR6 基因全長(zhǎng)ORF克隆
NCAM1 cDNA Rat 大鼠 NCAM1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CD207 cDNA Rat 大鼠 CD207 基因全長(zhǎng)ORF克隆
OPCML cDNA Rat 大鼠 OPCML 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CHODL cDNA Rat 大鼠 CHODL 基因全長(zhǎng)ORF克隆
IL23R cDNA Rat 大鼠 IL23R 基因全長(zhǎng)ORF克隆
COLEC12 cDNA Rat 大鼠 COLEC12 基因全長(zhǎng)ORF克隆
LGALS3 cDNA Rat 大鼠 LGALS3 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CLEC4A3 cDNA Rat 大鼠 CLEC4A3 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CD247 cDNA Rat 大鼠 CD247 基因全長(zhǎng)ORF克隆
SLC4A1 cDNA Rat 大鼠 SLC4A1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
TLR4 cDNA Rat 大鼠 TLR4 基因全長(zhǎng)ORF克隆
FZD9 cDNA Rat 大鼠 FZD9 基因全長(zhǎng)ORF克隆
ENPEP cDNA Rat 大鼠 ENPEP 基因全長(zhǎng)ORF克隆
TLR9 cDNA Rat 大鼠 TLR9 基因全長(zhǎng)ORF克隆
IL1A cDNA Rat 大鼠 IL1A 基因全長(zhǎng)ORF克隆
ART1 cDNA Rat 大鼠 ART1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
ICOS cDNA Rat 大鼠 ICOS 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CD276 cDNA Rat 大鼠 CD276 基因全長(zhǎng)ORF克隆
PRNP cDNA Rat 大鼠 PRNP 基因全長(zhǎng)ORF克隆
NCR1 cDNA Rat 大鼠 NCR1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
FZD4 cDNA Rat 大鼠 FZD4 基因全長(zhǎng)ORF克隆
JAM2 cDNA Rat 大鼠 JAM2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CD320 cDNA Rat 大鼠 CD320 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CD5 cDNA Rat 大鼠 CD5 基因全長(zhǎng)ORF克隆
GYPC cDNA Rat 大鼠 GYPC 基因全長(zhǎng)ORF克隆
MRC1 cDNA Rat 大鼠 MRC1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
KLRC1 cDNA Rat 大鼠 KLRC1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
LAG3 cDNA Rat 大鼠 LAG3 基因全長(zhǎng)ORF克隆
IFITM1 cDNA Rat 大鼠 IFITM1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
GGT1 cDNA Rat 大鼠 GGT1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
MSR1 cDNA Rat 大鼠 MSR1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CCR8 cDNA Rat 大鼠 CCR8 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CCR7 cDNA Rat 大鼠 CCR7 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CCR6 cDNA Rat 大鼠 CCR6 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CCR5 cDNA Rat 大鼠 CCR5 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CCR4 cDNA Rat 大鼠 CCR4 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CCR1 cDNA Rat 大鼠 CCR1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CD164 cDNA Rat 大鼠 CD164 基因全長(zhǎng)ORF克隆
IL15 cDNA Rat 大鼠 IL15 基因全長(zhǎng)ORF克隆
IL12B cDNA Rat 大鼠 IL12B 基因全長(zhǎng)ORF克隆
BST1 cDNA Rat 大鼠 BST1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
ADAM17 cDNA Rat 大鼠 ADAM17 基因全長(zhǎng)ORF克隆
SLAMF1 cDNA Rat 大鼠 SLAMF1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
THBD cDNA Rat 大鼠 THBD 基因全長(zhǎng)ORF克隆
PDGFRB cDNA Rat 大鼠 PDGFRB 基因全長(zhǎng)ORF克隆
