上海莼試生物技術有限公司
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更新時間:2017-06-01 08:52:18瀏覽次數(shù):325
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細胞名稱 非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS3;Vero-HCV-NS3
形態(tài)特性 上皮樣細胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 Vero-HCV-NS3細胞整合有丙型肝炎病毒的NS3基因,能穩(wěn)定表達NS3蛋白,是HCV基礎研究的*摸型。它由武漢大學病毒學國家重點實驗室郭佳博士于2008年構建并保存。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C10
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
使用權限 A類
非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS3;Vero-HCV-NS3實驗方法和步驟
(一) 前處理 用臺稱稱量青蛙或蟾蜍的體重,然后按10微克/克動物體重的劑量,腹腔注射秋水仙素。
(二) 取材 注射4小時后,將動物處死,用剪刀剪開皮膚和肌肉,取出大腿骨和脛骨,剔凈股骨上的肌肉,然后用一小塊紗布來回搓干凈。剪開兩端股骨,用注射器(內裝5ml 1% 檸檬酸鈉溶液)緩慢沖洗骨髓細胞到離心管中,經平衡后離心8分鐘,速度為1000轉/分鐘。
(三) 低滲 吸去上清液,留沉淀物0.2ml,加0.046M KCL 溶液至8 ml 刻度,用吸管沖勻沉淀物,在恒溫水浴(28℃)處理20分鐘或更長一點時間。
(四) 固定 低滲后,以每分鐘1000轉速度離心10分鐘。用吸管小心吸去上清液,留0.2ml沉淀物,沖散后沿管壁慢慢加入6ml固定液。 沖勻后靜止固定20分鐘。重復固定1~2次,離心的速度與時間以上述相同。
(五) 滴片 吸去上清液,留0.2ml沉淀物,加4滴新配的固定液,沖勻沉淀物。從冰箱取出預先冷凍的載片,每片滴3滴細胞懸液,立即用嘴向載片上吹氣,使細胞均勻分散,在酒精燈火焰上來回烤一下,以助染色體更好分散和展開。 (六) 染色 用10:1 Giemsa染液染色20分鐘(Giemsa原液用PH=6.8磷酸緩沖液稀釋),然后用水沖洗,片干后鏡檢。 (七) 鏡檢 在中倍鏡下找染色體分散好的中期分裂相,轉至高倍鏡詳細觀察兩棲類染色體的數(shù)目,屬于大、中、小染色體各有多少條。
注意事項:
1.收到細胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們。
2.收到細胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(視細胞密度而定)穩(wěn)定細胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收細胞時就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進行銷售依據(jù)。
3.由于細胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊懀时竟局槐WC客戶收到細胞后一周內的細胞狀態(tài),故客戶需要售后時需出示收到細胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時間證明,期間間隔時間不能大于7天。
4.所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
CXCL10 cDNA Mouse 小鼠 CXCL10 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
CXCL10 cDNA Mouse 小鼠 CXCL10 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
IL33 cDNA Mouse 小鼠 IL33 / NF-HEV 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
IL33 cDNA Mouse 小鼠 IL33 / NF-HEV 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
FCGR1 cDNA Mouse 小鼠 CD64 / FCGR1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
FCGR1 cDNA Mouse 小鼠 CD64 / FCGR1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
CD200 cDNA Mouse 小鼠 CD200 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
CCL20 cDNA Mouse 小鼠 CCL20 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
FGF2 cDNA Mouse 小鼠 bFGF 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
FGF2 cDNA Mouse 小鼠 bFGF 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
SIX1 cDNA Human 人 SIX1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶His標簽
EIF4EBP2 cDNA Human 人 EIF4EBP2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶His標簽
SRPX2 cDNA Human 人 SRPX2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
HLA-A cDNA Human 人 HLA-A 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
HLA-A cDNA Human 人 HLA-A 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
IL17RB cDNA Human 人 IL17Rb 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
PCSK2 cDNA Human 人 PCSK2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶His標簽
PGA4 cDNA Human 人 PGA4 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
PGA4 cDNA Human 人 PGA4 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
SLCO1B3 cDNA Human 人 SLCO1B3 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
SLCO1B3 cDNA Human 人 SLCO1B3 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
FTO cDNA Human 人 FTO 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
FTO cDNA Human 人 FTO 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
RHOA cDNA Human 人 RHOA 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
PPARGC1A cDNA Human 人 PPARGC1A 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
PPARGC1A cDNA Human 人 PPARGC1A 基因全長ORF克隆 (表