上海莼試生物技術(shù)有限公司
主營產(chǎn)品: ELISA試劑盒,ELISA試劑盒價格,ELISA試劑盒報價 |
聯(lián)系電話
13585831301
公司信息
- 聯(lián)系人:
- 李小姐
- 電話:
- 021-59541103
- 手機:
- 13585831301
- 售后電話:
- 13585831301
- 傳真:
- 021-60443211
- 地址:
- 上海市嘉定區(qū)嘉羅公路1661號
- 郵編:
參考價 | 面議 |
- 型號 50T
- 品牌 其他品牌
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 所在地 上海市
更新時間:2022-03-30 10:38:34瀏覽次數(shù):207
聯(lián)系我們時請說明是環(huán)保在線上看到的信息,謝謝!
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:埃博拉病毒(EBOV)PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品貨號:CP99957
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品分類:熒光-PCR法
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
?
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
使用方法:
一、樣品DNA的制備
用自選方法提取細菌樣品DNA。注意:DNA純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品DNA,后面的PCR再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備O157:H7標準曲線(以10-10E6這6個10倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。
1. 標記6個離心管,分別為6,5,4,3,2和1號。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用TE緩沖液或超純水10倍梯度稀釋到10E7拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至10E7拷貝/μL,建議每次稀釋10倍,梯度稀釋至10E7拷貝/μL)。
4. 在6號管中加入5 μL 10E7拷貝/μL的O157:H7陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得10E6拷貝/μL的陽性對照。
5. 換槍頭,從6號管中取5 μL溶液到5號管中,充分震蕩1分鐘,得10E5拷貝/μL的陽性對照。
6. 換槍頭,從5號管中取5 μL溶液到4號管中,重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。
7. NC管中不加任何陽性對照。
8. 從1-6號管中分別取5 μL和待測樣品一起進行定量PCR(見下步),每個樣品做3次重復(fù)。PCR后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光PCR Ct值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標準曲線。
蒂蓋姆頭珠霉肌側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白2(2號染色體)抗體Human IFIT2 ELISA Kit小鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab)免疫試劑盒
相思根瘤菌三磷酸腺檸檬酸裂解酶抗體Human ICA1L ELISA Kit小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMA IgA)免疫試劑盒
那波鏈霉菌β淀粉樣蛋白前體結(jié)合蛋白B-1抗體Human ICAM2(Intercellular adhesion molecule 2) ELISA Kit小鼠抗環(huán)胍氨酸肽抗體(Anti-CCP-antibody)免疫試劑盒
棒桿菌內(nèi)收蛋白a1抗體Human ICT1 ELISA Kit小鼠抗核小體抗體(IgG)免疫試劑盒
平菇α2纖溶酶色素上皮衍生因子抗體Human IFT81 ELISA Kit小鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)免疫試劑盒
羅爾細薄菌膜粘連蛋白7抗體Human ICK ELISA Kit小鼠抗核抗體IgG 免疫試劑盒
根腐平臍蠕孢早老素γ分泌酶抗體Human IFT80 ELISA Kit小鼠抗弓形蟲抗體(IgG)免疫試劑盒
布氏乳桿菌鈉ATP酶蛋白a1抗體Human IFIT3 ELISA Kit小鼠抗弓形蟲IgM抗體免疫試劑盒
psilent-dual1(pSD1)Rho鳥苷酸交換因子2抗體Human IFT88 ELISA Kit小鼠抗單核抗體(AMA)免疫試劑盒
哈氏弧菌磷酸化Rho鳥苷酸交換因子2抗體Human IFITM2(Interferon-induced transmembrane protein 2) ELISA Kit小鼠抗促甲狀腺素受體抗體(TRAb)免疫試劑盒
銅綠假單胞菌(綠膿桿菌)*去整合素樣金屬蛋白酶9抗體Human IFIT5 ELISA Kit小鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)免疫試劑盒
產(chǎn)色葡萄球菌艾滋病病制約錨定蛋白抗體Human IFITM1(Interferon-induced transmembrane protein 1) ELISA Kit小鼠抗Smith抗體(Sm)免疫試劑盒
變異鹽單胞菌腺苷酸環(huán)化酶1抗體Human IFNA6 ELISA Kit小鼠抗IVIgG抗體免疫試劑盒
裂褶菌核糖核酸酶L抑制蛋白抗體Human IFRD1 ELISA Kit小鼠抗IgE受體抗體免疫試劑盒
沙壤土桿菌Rho GTP酶激活蛋白24抗體Human IFRD2 ELISA Kit小鼠卷曲螺旋域結(jié)合蛋白80(CCDC80)免疫試劑盒
東方伊薩酵母GTP酶激活蛋白ASAP3抗體Human IFI30 ELISA Kit小鼠巨噬移動抑制因子(MIF)免疫試劑盒
埃博拉病毒(EBOV)PCR檢測試劑盒樟疫霉Phytophthora│cinnamomi Rands 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于培養(yǎng)腎上腺素試劑盒去甲堿;Higenamine
根瘤菌Rhizobium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品腎上腺皮質(zhì)抗體試劑盒芹菜苷;Apiin
豬丹毒絲菌Erysipelothrix│rhuriopathiae 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR蛋白試劑盒1-羥基-2,3,4,7-四甲氧基山山酮
束梗鏈格孢(犁黑斑病菌)Alternaria│bokurai 質(zhì)量規(guī)格:進口原裝Santa,99%腎酶試劑盒去甲基川陳皮素;Demethylnobi
黃孢原毛平革菌Phanerochaete│chrysosporium 質(zhì)量規(guī)格:含量98.0%~100.5%神經(jīng)軸突絲蛋白試劑盒芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷;Api
#擬雙輪絲鏈輪絲菌Streptoverticillium│biverticillatopsis Yan et al. 質(zhì)量規(guī)格:>99%神經(jīng)元凋亡抑制蛋白試劑盒芹菜素-7-O-葡萄糖酸苷;Apige
暫無Planktotalea│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品神經(jīng)營養(yǎng)因子3試劑盒5-羥基-6,7-二甲氧基黃酮;5-Hy
大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:>98%,分析標準品神經(jīng)型一氧化氮合成酶試劑盒5-羥基-7,8-二甲氧基黃酮;5-hy
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標準品神經(jīng)粘著分子試劑盒去氫荷包牡丹堿;Dehydrodicen