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上海莼試生物技術有限公司

主營產品: ELISA試劑盒,ELISA試劑盒價格,ELISA試劑盒報價

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昆蟲卵巢細胞;SF9
昆蟲卵巢細胞;SF9
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更新時間:2017-06-01 08:29:06瀏覽次數:463

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【簡單介紹】
昆蟲卵巢細胞;SF9售后:收到細胞后7天,如發現細胞有質量問題(如污染,死亡,快遞運輸等原因)時,應出具書面質量問題報告并及時銷售人員,我們將盡快為您解決。

公司是*的ATCC細胞供應商,提供昆蟲卵巢細胞;SF9的報價,咨詢,稱技術服務,咨詢選購
細胞名稱     昆蟲卵巢細胞;SF9        
形態特性      圓形         
生長特性     貼壁/懸浮生長        
特征特性      該細胞系源于雌性草地貪夜蛾蛹的卵巢組織,可以用于復制桿狀病毒表達載體。         
培養條件      Grace's Insect Medium (GIM w/o BSA, FCS, Whole Egg Ultrafiltrate)  10%FBS         
傳代方法      1:5或更多傳代;2~3天換液1次。        
傳代情況     P36        
凍存條件      基礎培養基+5%DMSO+20%FBS         
支原體檢測     培養法(-)         
STR      -        
同工酶             
染色體               
使用權限     A類
培養需要滿足以下條件
1、無菌、無毒的環境:首先應保證被培養的細胞處于無菌、無毒的環境,即對培養液和所有的培養用具進行無菌處理。通常還要在培養液中添加一定量的抗生素以防培養過程中的污染。

2、營養物質:細胞體外培養所需營養物質與體內基本相同,需要有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。

3、溫度和pH:細胞體外培養的適宜溫度一般與動物的體溫相近。多數細胞生存的適宜pH為7.2~7.4。

4、氣體環境:培養所需氣體主要有O2和CO2,O2是細胞代謝所必需的,CO2的主要作用是維持培養液的pH。進行細胞培養時,通常采用培養皿或松蓋培養瓶,將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養箱中進行培養。

操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。

ITGB1     cDNA    Human    人 Integrin beta1 轉錄變體1A 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶HA標簽
RAC1     cDNA    Human    人 RAC1 / MIG5 轉錄變體Rac1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶Myc標簽
IL2RB     cDNA    Mouse    小鼠 IL2RB / CD122 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶His標簽
MAP3K8     cDNA    Human    人 MAP3K8 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶His標簽
GDF15     cDNA    Human    人 GDF-15 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
VASN     cDNA    Human    人 VASN 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶Myc標簽
DIXDC1     cDNA    Human    人 DIXDC1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
TLR10     cDNA    Human    人 TLR10 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
SMURF2     cDNA    Human    人 SMURF2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
TGFB1     cDNA    Human    人 TGF-beta 1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
PDCD1     cDNA    Mouse    小鼠 PD1 / PDCD1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
CTSB     cDNA    Mouse    小鼠 CTSB 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶Myc標簽
CD274     cDNA    Mouse    小鼠 CD274 / B7-H1 / PD-L1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
LRG1     cDNA    Human    人 LRG1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶His標簽
PFKFB3     cDNA    Human    人 PFKFB3 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
SIRPA     cDNA    Human    人 SIRPA 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
MTOR     cDNA    Human    人 MTOR 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶HA標簽
MTOR     cDNA    Human    人 MTOR 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶Myc標簽
MTOR     cDNA    Human    人 MTOR 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶His標簽
MTOR     cDNA    Human    人 MTOR 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
NTRK1     cDNA    Human    人 TrkA / NTRK1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶HA標簽
TGFB1     cDNA    Human    人 TGF-beta 1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶Myc標簽
CCL20     cDNA    Human    人 CCL20 轉錄變體2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
HGF     cDNA    Human    人 HGF 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶His標簽
TNFSF10     cDNA    Human    人 TNFSF10 / TRAIL 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

 



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