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從標(biāo)本收集、保存、預(yù)試驗(yàn)、實(shí)驗(yàn)、數(shù)據(jù)分析等全實(shí)驗(yàn)過程提供完整的技術(shù)指導(dǎo)。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱：NF-L神經(jīng)絲蛋白L酶聯(lián)免疫試劑盒

英文名稱：NF-L ELISA Kit

規(guī)格：48T/96

貨號：CS-2560E

主要成分：酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。

試劑盒種屬：馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動(dòng)植物。

檢測目的：用于測定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..

試劑盒組成及試劑配制：

1. 酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔）。

2. 標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）。

3. 樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。

4. 標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。

5. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。

6. 標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）

7. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）

8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。

9. 濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。

10. 終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

試劑準(zhǔn)備：

1. 使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC)，試劑不能直接在37oC溶解。

2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品)：每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為2000pg/mL。準(zhǔn)備7個(gè)稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管，每個(gè)EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液，如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度， 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

3. 濃洗滌液：用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL，進(jìn)行30倍稀釋。

注意事項(xiàng)：

1.試劑盒使用前請保存在2-8℃。復(fù)溶后的標(biāo)準(zhǔn)品若未用完，請廢棄。

2. 微量試劑運(yùn)輸中顛簸和可能的倒置，會使液體沾到管壁或瓶蓋。因此使用前請1000轉(zhuǎn)/分離心1分鐘，以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。

3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正常現(xiàn)象，微加熱至40℃使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液。

（加熱溫度不要超過50℃）使用時(shí)洗滌液應(yīng)為室溫。

4. 不同批號的試劑盒組份避免混用（洗滌液和反應(yīng)終止液除外）。

5. 充分輕微混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤為重要，使用微量振蕩器(使用zui低頻率)，如無微量振蕩器，可在反應(yīng)孵育前手工輕輕混勻。

6. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本檢測時(shí)建議作雙孔檢測。

7. 試驗(yàn)中所用的試管和吸頭均為一次性使用，嚴(yán)禁在不同的液體之間混用！否則將影響試驗(yàn)結(jié)果。

8. 試驗(yàn)中請穿著試驗(yàn)服并帶乳膠手套做好防護(hù)工作。特別是檢測血液或者其他體液標(biāo)本時(shí)，請按國家生物試驗(yàn)室安全防護(hù)條列執(zhí)行。

Alexa Fluor 647標(biāo)記的羊抗雞IgGAnti-RXRA Antibody箭藿苷A118525-35-2說明書

Alexa Fluor 488標(biāo)記的羊抗雞IgGAnti-S100A10 Antibodyavicularin572-30-5品牌

FITC標(biāo)記的兔抗雞IgGAnti-S100A11 Antibody1 -（4-羥基苯基）propan-1-one70-70-2規(guī)格

辣根過氧化物標(biāo)記的兔抗雞IgGAnti-S100A4 Antibody蒲公英甾醇乙酸酯6426-43-3價(jià)格

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NF-L神經(jīng)絲蛋白L酶聯(lián)免疫試劑盒2,4,6-三溴酚 98%大鼠膠原C末端肽(CTX)免疫試劑盒G氨丁受體3抗體HOXA11  同源盒蛋白HOXA11抗體

1，2，4-三氮唑-3-羧酯  99%大鼠降鈣素原(PCT)免疫試劑盒G氨丁受體α3抗體HOXA10  HOXA10抗體

鈷 98%大鼠降鈣素因相關(guān)肽(CGRP)免疫試劑盒GEN1蛋白抗體Hornerin/S100A18  角化蛋白S100A16抗體

氧乙酯 99%大鼠降鈣素(CT)免疫試劑盒谷氨酰核糖焦酰轉(zhuǎn)移HORMAD2  異質(zhì)核糖核蛋白U2樣蛋白抗體

納他霉素  ≥95% (HPLC)大鼠堿性(ALP)免疫試劑盒α-半糖苷抗體HOPX/LAGY  肺癌相關(guān)蛋白Y抗體

L-羥鈷素 96%大鼠堿性成纖維生長因子6(bFGF-6)免疫試劑盒蛋白偶聯(lián)受體55抗體HOMER3  HOMER3蛋白抗體

B12 98%大鼠堿性成纖維生長因子4(bFGF-4)免疫試劑盒生長抑制DNA損傷因45γ抗體 GADD45γHOMER2  HOMER2抗體

鈷 分析標(biāo)準(zhǔn)品大鼠堿性成纖維生長因子(bFGF)免疫試劑盒生長停滯特異性蛋白2家族3抗體HO-2  血紅素氧合2抗體

B12 用于培養(yǎng)和昆蟲培養(yǎng)大鼠狀腺素抗體(TAb)免疫試劑盒顆粒K抗體HO-1  血紅素氧合 1/熱休克蛋白32抗體

2-(2-溴乙)四氫-2H- 96%大鼠狀腺素(T4)免疫試劑盒甘油二酯結(jié)構(gòu)域5抗體HNRPC  異質(zhì)性核糖核蛋白C1/C2抗體

2-氨-1,3- 98%大鼠狀腺球蛋白IgG抗體免疫試劑盒γ谷氨酰轉(zhuǎn)移抗體hnRNP U  異質(zhì)核糖核蛋白U抗體

溴硅烷, 含穩(wěn)定劑銅, 98%大鼠狀腺球蛋白(TG)免疫試劑盒G1氨丁A型受體α1抗體hnRNP R  異質(zhì)性核糖核蛋白R

六二硅烷 98%大鼠狀腺過氧化物(TPO)IgG抗體免疫試劑盒谷氨脫羧-65抗體hnRNP M/CEAR  異質(zhì)性核糖核蛋白M抗體

硅烷 97%大鼠狀腺過氧化物(TPO)免疫試劑盒谷氨脫羧-65抗體(C端）hnRNP L  異質(zhì)核糖核蛋白L抗體

硅烷 90%大鼠狀旁相關(guān)蛋白(PTHrP)免疫試劑盒半糖凝集素3抗體hnRNP K  異質(zhì)核糖核蛋白K抗體

操作步驟：

1.編號：將樣品對應(yīng)微孔按序編號，每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）

2.加樣：分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl，然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，

3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。

4.配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。

5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此 重復(fù) 5 次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl，空白孔除外。

7.溫育：操作同 3。

8.洗滌：操作同 5。

9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10 分鐘.

10.終止：每孔加終止液 50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。