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上海莼試生物技術(shù)有限公司

主營產(chǎn)品: ELISA試劑盒,ELISA試劑盒價格,ELISA試劑盒報價

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T25KP-4細胞
KP-4細胞
參考價 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準
  • 型號 T25
  • 品牌 其他品牌
  • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
  • 所在地 上海市

更新時間:2021-08-23 17:04:42瀏覽次數(shù):323

聯(lián)系我們時請說明是環(huán)保在線上看到的信息,謝謝!

【簡單介紹】
產(chǎn)品名稱 胰腺導管細胞癌 英文名稱 KP-4
規(guī)格 T25 貨號 CS-X64065
KP-4細胞公司相關(guān)產(chǎn)品:
mRNA cap轉(zhuǎn)移酶抗體TRADD/FITC 熒光素標記有死亡區(qū)的腫瘤壞死因子受體1相關(guān)蛋白抗體IgG
5’-三磷酸聚核苷酸抗體TP I /FITC 熒光素標記拓普西異構(gòu)酶Ⅰ抗體IgG

公司產(chǎn)品僅用于科研以下是細胞的訂購信息:

英文簡稱:KP-4細胞    

產(chǎn)品名稱:胰腺導管細胞癌

規(guī)格:T25

形態(tài)特性:上皮樣

生長特性:貼壁生長

特征特性:

培養(yǎng)條件:IMDM+20%FBS

傳代方法:1:2傳代

貨號:CS-X64065
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

圖片13.jpg 

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。

注意事項:
1)凍存前細胞狀態(tài),細胞在對數(shù)生,細胞密度適合,剛剛發(fā)生細胞融合,過密或連成片的細胞狀態(tài)不好,而且消化時不容易分散;
2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個細胞)分成兩管。
3)消化和吹打,切忌消化過度,吹打不可太用力,不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴格,我從10%-90%都用過,問題不大,個人認為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點嘛!另外,凍存液可以在處理細胞前配置,放在4度冰箱預冷。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸,移入凍存管。
5)關(guān)于“慢凍",傳統(tǒng)的方法,LLC細胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數(shù)量多的實驗室,使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。
白介素15(IL15)檢測試劑盒英文名稱:IL15 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框103抗體包裝100g

白介素13受體α2(IL13Rα2)檢測試劑盒英文名稱:IL13Rα2 ELISA Kit兒茶酚O基移位酶抗體包裝25g

白介素13(IL13)檢測試劑盒英文名稱:IL13 ELISA Kit補體C1qTNF9鏈多肽抗體包裝5g

白介素12B(IL12B)檢測試劑盒英文名稱:IL12B ELISA Kit平滑肌鈣調(diào)蛋白CNN2抗體包裝1g

白介素12A(IL12A)檢測試劑盒英文名稱:IL12A ELISA Kit心肌病相關(guān)蛋白2包裝5g

白介素11受體α(IL11Rα)檢測試劑盒英文名稱:IL11Rα ELISA Kit5號染色體開放閱讀框34抗體包裝100g

白介素11(IL11)檢測試劑盒英文名稱:IL11 ELISA KitE1A激活基因激蛋白1抗體包裝25g

白介素10(IL10)檢測試劑盒英文名稱:IL10 ELISA Kit2號染色體開放閱讀框42抗體包裝5g

八聚體結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子4(OCT4)檢測試劑盒英文名稱:OCT4 ELISA Kit豬瘟病抗體包裝1g

氨酰tRNA合成酶復合多功能相互作用蛋白1(AIMP1)檢測試劑盒英文名稱:AIMP1 ELISA Kit3號染色體開放閱讀框54抗體包裝5g

氨基己糖苷酶Bβ(HEXβ)檢測試劑盒英文名稱:HEXβ ELISA Kit2號染色體開放閱讀框43抗體包裝5g

氨基己糖苷酶Aα(HEXα)檢測試劑盒英文名稱:HEXα ELISA Kit豬瘟病抗體包裝5g

氨基端前心鈉肽(NT-ProANP)檢測試劑盒英文名稱:NT-ProANP ELISA Kit中心體蛋白110抗體包裝1g

氨基端前腦鈉素(NT-ProBNP)檢測試劑盒英文名稱:NT-ProBNP ELISA Kit纖維素酶包裝5g

阿黑皮素原(POMC)檢測試劑盒英文名稱:POMC ELISA Kit分裂周期蛋白14B抗體包裝10ml
KP-4細胞Finasteride(標準品)英文名稱: Torasemide豬瘟病抗體包裝1g

Fludrocortisone acetate(標準品...英文名稱: Travoprost嗜鉻粒蛋白C抗體包裝5g

Flumethasone(標準品)英文名稱: Trazodone HCl煙堿型乙酰受體α10/AChRα10抗體包裝5g

Fluocinolone Acetonide(標準品)英文名稱: Trazodone HCl煙堿型乙酰受體α6/AChRα6抗體包裝5MG

Fluorometholone(標準品)英文名稱: Trilostane煙堿型乙酰受體α9/AChRα9抗體包裝1g

Fluticasone Propionate(標準品)英文名稱: Trilostane煙堿型乙酰受體δ/AChRδ抗體包裝5g

Gefitinib(標準品)英文名稱: Triptorelin Acetate凋亡加強結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體包裝1g

Gemcitabine HCl(標準品)英文名稱: Vancomycin HCl凋亡加強結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體包裝5g

Gestodene(標準品)英文名稱: Vancomycin HClβ衣被蛋白抗體包裝100mg

Hexestrol(標準品)英文名稱: Vandetanib 半胱酸蛋白酶4/11抗體包裝1g

Hydrocortisone(標準品)英文名稱: Varenicline Tartrate1號染色體開放閱讀框187抗體包裝1g

Hydroxyprogesterone caproat...英文名稱: Varenicline Tartrate9號染色體開放閱讀框61抗體包裝5g

L-(-)-葡萄糖(標準品)英文名稱: Vinorelbine TartrateC末端結(jié)合蛋白2抗體包裝25g

L-半(標準品)英文名稱: Vinorelbine Tartrate21號染色體開放閱讀框13抗體包裝1g

L-茶氨酸(標準品)英文名稱: Voriconazole冠蛋白3抗體包裝250mg
實驗報告
一、產(chǎn)分離與培養(yǎng):
   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
   1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

 




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