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公司產(chǎn)品僅用于科研以下是細胞的訂購信息：

英文簡稱：KP-4細胞    

產(chǎn)品名稱：胰腺導管細胞癌

規(guī)格：T25

形態(tài)特性：上皮樣

生長特性：貼壁生長

特征特性：

培養(yǎng)條件：IMDM+20%FBS

傳代方法：1：2傳代

貨號：CS-X64065
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。

注意事項：
（1）凍存前細胞狀態(tài)，細胞在對數(shù)生，細胞密度適合，剛剛發(fā)生細胞融合，過密或連成片的細胞狀態(tài)不好，而且消化時不容易分散；
（2）凍存的密度不宜過低，10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好，我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶凍一管（1.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個細胞）分成兩管。
（3）消化和吹打，切忌消化過度，吹打不可太用力，不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打。
（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴格，我從10%-90%都用過，問題不大，個人認為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點嘛！另外，凍存液可以在處理細胞前配置，放在4度冰箱預冷。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸，移入凍存管。
（5）關(guān)于“慢凍"，傳統(tǒng)的方法，LLC細胞凍存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更長，-80度過夜，最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數(shù)量多的實驗室，使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。
白介素15(IL15)檢測試劑盒英文名稱：IL15 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框103抗體包裝100g

白介素13受體α2(IL13Rα2)檢測試劑盒英文名稱：IL13Rα2 ELISA Kit兒茶酚O基移位酶抗體包裝25g

白介素13(IL13)檢測試劑盒英文名稱：IL13 ELISA Kit補體C1qTNF9鏈多肽抗體包裝5g

白介素12B(IL12B)檢測試劑盒英文名稱：IL12B ELISA Kit平滑肌鈣調(diào)蛋白CNN2抗體包裝1g

白介素12A(IL12A)檢測試劑盒英文名稱：IL12A ELISA Kit心肌病相關(guān)蛋白2包裝5g

白介素11受體α(IL11Rα)檢測試劑盒英文名稱：IL11Rα ELISA Kit5號染色體開放閱讀框34抗體包裝100g

白介素11(IL11)檢測試劑盒英文名稱：IL11 ELISA KitE1A激活基因激蛋白1抗體包裝25g

白介素10(IL10)檢測試劑盒英文名稱：IL10 ELISA Kit2號染色體開放閱讀框42抗體包裝5g

八聚體結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子4(OCT4)檢測試劑盒英文名稱：OCT4 ELISA Kit豬瘟病抗體包裝1g

氨酰tRNA合成酶復合多功能相互作用蛋白1(AIMP1)檢測試劑盒英文名稱：AIMP1 ELISA Kit3號染色體開放閱讀框54抗體包裝5g

氨基己糖苷酶Bβ(HEXβ)檢測試劑盒英文名稱：HEXβ ELISA Kit2號染色體開放閱讀框43抗體包裝5g

氨基己糖苷酶Aα(HEXα)檢測試劑盒英文名稱：HEXα ELISA Kit豬瘟病抗體包裝5g

氨基端前心鈉肽(NT-ProANP)檢測試劑盒英文名稱：NT-ProANP ELISA Kit中心體蛋白110抗體包裝1g

氨基端前腦鈉素(NT-ProBNP)檢測試劑盒英文名稱：NT-ProBNP ELISA Kit纖維素酶包裝5g

阿黑皮素原(POMC)檢測試劑盒英文名稱：POMC ELISA Kit分裂周期蛋白14B抗體包裝10ml
KP-4細胞Finasteride（標準品）英文名稱： Torasemide豬瘟病抗體包裝1g

Fludrocortisone acetate(標準品...英文名稱： Travoprost嗜鉻粒蛋白C抗體包裝5g

Flumethasone（標準品）英文名稱： Trazodone HCl煙堿型乙酰受體α10/AChRα10抗體包裝5g

Fluocinolone Acetonide(標準品)英文名稱： Trazodone HCl煙堿型乙酰受體α6/AChRα6抗體包裝5MG

Fluorometholone(標準品)英文名稱： Trilostane煙堿型乙酰受體α9/AChRα9抗體包裝1g

Fluticasone Propionate（標準品）英文名稱： Trilostane煙堿型乙酰受體δ/AChRδ抗體包裝5g

Gefitinib(標準品)英文名稱： Triptorelin Acetate凋亡加強結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體包裝1g

Gemcitabine HCl（標準品）英文名稱： Vancomycin HCl凋亡加強結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體包裝5g

Gestodene(標準品)英文名稱： Vancomycin HClβ衣被蛋白抗體包裝100mg

Hexestrol(標準品)英文名稱： Vandetanib 半胱酸蛋白酶4/11抗體包裝1g

Hydrocortisone（標準品）英文名稱： Varenicline Tartrate1號染色體開放閱讀框187抗體包裝1g

Hydroxyprogesterone caproat...英文名稱： Varenicline Tartrate9號染色體開放閱讀框61抗體包裝5g

L-(-)-葡萄糖(標準品)英文名稱： Vinorelbine TartrateC末端結(jié)合蛋白2抗體包裝25g

L-半(標準品)英文名稱： Vinorelbine Tartrate21號染色體開放閱讀框13抗體包裝1g

L-茶氨酸（標準品）英文名稱： Voriconazole冠蛋白3抗體包裝250mg
實驗報告
一、產(chǎn)分離與培養(yǎng)：
   1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
   3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
   5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
   2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
   3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
   5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
   6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。