低載量 PCR 片段純化試劑盒50 次價格詳細介紹:
低載量 PCR 片段純化試劑盒50 次價格操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養(yǎng)細胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細胞,每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml,用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應根據培養(yǎng)板面積而定,不取決于細胞數。TRIzol加量不足可能導致提取的RNA有DNA污染。
c.細胞懸液 離心收集細胞,每5-10×106動物、植物、酵母細胞或1×107細菌細胞加入1ml TRIzol,反復吸打。加TRIzol之前不要洗滌細胞以免mRNA降解。一些酵母和細菌細胞需用勻漿儀處理。
2.將勻漿樣品在室溫(15-30℃)放置5分鐘,使核酸蛋白復合物*分離。
3.可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質,脂肪,多糖或胞外物質(肌肉,植物結節(jié)部分等)可于2-8℃10000×g離心10分鐘,取上清。離心得到的沉淀中包括細胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。處理脂肪組織時,上層有大量油脂應去除。取澄清的勻漿液進行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層:底層為黃色有機相,上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉移到新管中,如要分離DNA和蛋白質可保留有機相,進一步操作見后。用異丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙醇,室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,離心后在管側和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。
試劑的取用規(guī)則:
(1)試劑不能與手接觸。
(2)要用潔凈的藥勺,量筒或滴管取用試劑,不準用同一種工具同時連續(xù)取用多種試劑。取完一種試劑后,應將工具洗凈(藥勺要擦干)后,方可取用另一種試劑。
(3)試劑取用后一定要將瓶塞蓋緊,不可放錯瓶蓋和滴管,絕不允許張冠李戴,用完后將瓶放回原處
(4)已取出的試劑不能再放回原試劑瓶內。
公司提供的RNA/DNA 提取,完善的實驗條件,*的設備,高素質的實驗人員,保證您的實驗得以良好的完成。我們承諾一對一的專門服務,您可以全稱參與了解實驗進程。
LB肉湯,Lennox * 加富培養(yǎng)基,用于分子微生物研究中保存和培養(yǎng)重組大腸桿菌菌株 500g
LB Broth, Lennox *
BactoTM瓊脂 * *化有益的鈣鎂離子比例同時減少有害離子含量 454g
BactoTM Agar *
平板計數瓊脂 * 高營養(yǎng)培養(yǎng)基,用于分離、計數異養(yǎng)或“富營養(yǎng)”的細菌,水、廢水、食品、乳制品的細菌計數 500g
Plate Count Agar *
R2A瓊脂 * 低營養(yǎng)培養(yǎng)基,用于水檢測中分離生長緩慢的“貧營養(yǎng)”的細菌和對營養(yǎng)要求較低的細菌 500g
R2A Agar *
m HPC瓊脂 * 高營養(yǎng)培養(yǎng)基,用于水檢測中分離、計數異養(yǎng)或“富營養(yǎng)”的細菌 500g
m-HPC Agar *
D/E中和瓊脂 * 能中和抗微生物的化學試劑,用于環(huán)境標本中檢測和計數表面微生物 500g
D/E (Dey/Engley) Neutralizing Agar *
D/E中和肉湯 * 檢測消毒劑和防腐劑的消毒與衛(wèi)生效果 500g
D/E (Dey/Engley) Neutralizing Broth *
微生物含量測試瓊脂(胰蛋白大豆瓊脂含*和吐溫80) * 環(huán)境監(jiān)測中的多種菌的計數 500g
Microbial Content Test Agar(Trypticase? Soy Agar with Lecithin and Polysorbate 80) *
營養(yǎng)肉湯 * 非苛養(yǎng)要求微生物的普通培養(yǎng) 500g
Nutrient Broth *
營養(yǎng)瓊脂 * 培養(yǎng)多種微生物 500g
Nutrient Agar *
麥芽浸出液瓊脂 * 分離計數酵母和霉菌 500g
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