公司提供的RNA/DNA 提取,完善的實驗條件,*的設(shè)備,高素質(zhì)的實驗人員,保證您大提柱式細菌 DNAout4次售后服務(wù)的實驗得以良好的完成。我們承諾一對一的專門服務(wù),您可以全稱參與了解實驗進程。
大提柱式細菌 DNAout4次售后服務(wù)詳細介紹:
試劑的取用規(guī)則:
(1)試劑不能與手接觸。
(2)要用潔凈的藥勺,量筒或滴管取用試劑,不準用同一種工具同時連續(xù)取用多種試劑。取完一種試劑后,應(yīng)將工具洗凈(藥勺要擦干)后,方可取用另一種試劑。
(3)試劑取用后一定要將瓶塞蓋緊,不可放錯瓶蓋和滴管,絕不允許張冠李戴,用完后將瓶放回原處
(4)已取出的試劑不能再放回原試劑瓶內(nèi)。
操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養(yǎng)細胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細胞,每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml,用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定,不取決于細胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導致提取的RNA有DNA污染。
c.細胞懸液 離心收集細胞,每5-10×106動物、植物、酵母細胞或1×107細菌細胞加入1ml TRIzol,反復吸打。加TRIzol之前不要洗滌細胞以免mRNA降解。一些酵母和細菌細胞需用勻漿儀處理。
2.將勻漿樣品在室溫(15-30℃)放置5分鐘,使核酸蛋白復合物*分離。
3.可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質(zhì),脂肪,多糖或胞外物質(zhì)(肌肉,植物結(jié)節(jié)部分等)可于2-8℃10000×g離心10分鐘,取上清。離心得到的沉淀中包括細胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。處理脂肪組織時,上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層:底層為黃色有機相,上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉(zhuǎn)移到新管中,如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機相,進一步操作見后。用異丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙醇,室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。
CYP20A1
*P4501B1抗體 CYP1B1
*P450 CYP26A1抗體 CYP26A1
磷酸化周期素E抗體 phospho-Cyclin E(Thr77)
磷酸化周期素E2抗體 phospho-Cyclin E2 (Thr392)
周期素M3抗體 Cyclin M3
周期素Y/X抗體 Cyclin Y
磷酸化周期素D3抗體 phospho-Cyclin D3 (Thr283)
細胞色素b5還原酶3抗體 CYB5R3
CWC22蛋白抗體 CWC22
9號染色體開放閱讀框95抗體 C9orf95
19號染色體開放閱讀框67抗體 C19orf67
磷酸化酪蛋白激酶1γ1+γ2+γ3抗體 phospho-Casein kinase I isoforms gamma 1+2+3 ( Tyr263)
原卟啉氧化酶3抗體 Coproporphyrinogen III Oxidase
間隙連接蛋白43抗體 Connexin 43
緊密連接蛋白25抗體 CLDN25
中心體蛋白78抗體 CEP78
6號染色體開放閱讀框146抗體 C6orf146
6號染色體開放閱讀框154抗體 C6ORF154
9號染色體開放閱讀框16抗體 C9orf16
9號染色體開放閱讀框78抗體 C9orf78
9號染色體開放閱讀框79抗體 C9orf79
9號染色體開放閱讀框84抗體 C9orf84
9號染色體開放閱讀框85抗體 C9orf85
9號染色體開放閱讀框91抗體
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