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ELISA檢測試劑盒的根底是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶符號。結合在固相載體外表的抗原或抗體仍堅持其免疫學活性,酶符號的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測守時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體外表的抗原或抗體起反響。用洗刷的辦法使固相載體上構成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分隔。再加入酶符號的抗原或抗體,也經過反響而結合在固相載體上。此刻固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的份額。加入酶反響的底物后,底物被酶催化成為有色產品,產品的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可依據呈色的深淺進行定性或定量分析。因為酶的催化功率很高,間接地擴大了免疫反響的結果,使測定辦法達到很高的敏感度。
ELISA檢測方法的三大特點表現:
1.穩定性好:包被的抗原的穩定性可使試劑盒的效期得到保證,早期以合成肽為包被抗原的試劑盒效期只有3-4個月,采用基因工程抗原后效期大大延長了。
2.檢出率高:基因工程抗原將特異性抗原決定簇基因融合表達,表達產物包含更多的抗原決定簇,可提高試劑盒的靈敏度,提高檢出率。
3.分子量大:合成肽采用化學方法制備,由于工藝的局限,合成數量有限,只能達到數百個氨基酸。而利用基因工程制備的抗原,分子量更大。
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