小鼠白介素3(IL-3)ELISA  試劑盒

包裝規(guī)格：48T/96T

檢測(cè)方法：酶聯(lián)免疫

檢測(cè)標(biāo)本：血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)液等

本試劑盒僅供體外研究使用!

試劑盒組成

需要而未提供的試劑和器材

• 酶標(biāo)儀(450nm檢測(cè)波長(zhǎng)濾光片，570nm或630nm校正波長(zhǎng)濾光片) 。
• 洗板機(jī)（可調(diào)注液量，保證每孔洗液加至0.35ml而不溢出）。
• 超凈工作臺(tái)，生物安全柜，通風(fēng)柜。
• 高精度單道加液器（量程為0.5-10μl, 2-20μl,20-200μl,200-1000μl).
• 高精度多道加液器（8道或12道，量程為50-300μl).
• 37℃恒溫箱。
• 低溫離心機(jī)。
• 電冰箱（4℃,-20℃,-86℃）.

9.  漩渦混合儀，低頻振蕩器等

注意事項(xiàng)

• 從2-8℃取出的試劑盒，在開(kāi)啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘。酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
• 嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
• 為避免交叉污染，要避免重復(fù)使用手中的吸頭和封板膜。
• 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
• 底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。

6.   所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按生物廢棄物處理。終止液為2M硫酸，使用時(shí)必須注意安全。

7.  各步驟加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校準(zhǔn)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，*使用排槍加樣。

8.  每次試驗(yàn)測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔zui高濃度的OD值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n）。

9.  配制試劑時(shí)，要用旋渦混合儀混勻。加入孔內(nèi)的試劑，充分混勻?qū)y(cè)試結(jié)果尤為重要，使用微量振蕩器(使用zui低頻率)，如無(wú)微量振蕩器，可在反應(yīng)前手工輕輕晃動(dòng)酶標(biāo)板1分鐘，例如做圓周動(dòng)作，使加入孔中的反應(yīng)液混勻。

10.  實(shí)驗(yàn)用酶標(biāo)儀應(yīng)嚴(yán)格按使用說(shuō)明書(shū)規(guī)范操作，并在使用前充分預(yù)熱。

11.  手工洗板應(yīng)注意：甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體；在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙，酶標(biāo)板朝下用力拍幾次；將稀釋后的洗滌液至少0.35ml注入孔內(nèi)，浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要，重復(fù)此過(guò)程數(shù)次。自動(dòng)洗板：如果有自動(dòng)洗板機(jī)，應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過(guò)程中。

小鼠白介素3(IL-3)ELISA  試劑盒樣本要求

1．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。

2．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存或根據(jù)存放，時(shí)間做相應(yīng)溫度調(diào)整，但應(yīng)避免反復(fù)凍融，（由于樣本種類過(guò)多，每個(gè)單位處理方式不一樣，本說(shuō)明書(shū)不做詳細(xì)介紹）。

操作程序

• 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：（本試劑系統(tǒng)提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶請(qǐng)按照說(shuō)明自行在小試管中倍比稀釋）按下表格執(zhí)行：

• 根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。
• 加樣:(詳細(xì)操作流程請(qǐng)客服索要說(shuō)明書(shū)）
• 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋備用。
• 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
• 顯色：每孔先加入顯色劑A 50μl，再加入顯色劑B 50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘。
• 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
• 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后10分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

結(jié)果判斷

1.  每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本的OD值應(yīng)減去零孔的OD值。（若不減零孔值，標(biāo)準(zhǔn)曲線的零孔應(yīng)相交于Y軸） 

2. 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對(duì)應(yīng)的OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程，再根據(jù)樣品的OD值在回歸方程上計(jì)算出對(duì)應(yīng)的樣品濃度。也可以使用各種熟悉應(yīng)用軟件來(lái)計(jì)算。

3．手工繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo)，OD值作縱坐標(biāo)，以平滑線連接各標(biāo)準(zhǔn)品的坐標(biāo)點(diǎn)。通過(guò)標(biāo)本的OD值可在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出其濃度。*使用專業(yè)制作曲線軟件進(jìn)行分析計(jì)算結(jié)果。

4．若標(biāo)本OD值高于標(biāo)準(zhǔn)曲線上限，應(yīng)適當(dāng)稀釋后重測(cè)，計(jì)算濃度時(shí)應(yīng)乘以稀釋倍數(shù)。

試劑盒性能

1.  準(zhǔn)確性：標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值，大于等于0.9200。
2.  靈敏度：zui小可檢測(cè)濃度達(dá)，1.05ng/ml。
3.  特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
4.  重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。

5 . 回收率：70-110%.

6. 貯藏：2-8℃，避光防潮保存。

7. 有效期：6個(gè)月

小鼠白介素3(IL-3)ELISA  試劑盒之外語(yǔ)純生物其他優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品如下：

人多巴胺D2受體(D2R)ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)服務(wù)Human dopamine D2 receptor,D2R ELISA KIISA. 96T/48T

人熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)服務(wù)Human Heat Shock Protein 60,HSP-60 ELISA KIISA. 96T/48T

大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)服務(wù)Rat Stromal cell derived factor 1a,SDF-1a ELISA KIISA. 96T/48T

小鼠卵巢癌標(biāo)志物CA125ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)服務(wù)Mouse ovarian cancer marker-CA125 ELISA KIISA. 96T/48T

*溶液(Chloramphenicol,34mg/ml)50ml現(xiàn)貨供應(yīng)，保存：—20℃,避光,12個(gè)月

改良Bielschowsky染色試劑盒5×50ml現(xiàn)貨供應(yīng)，保存：4℃,避光,3個(gè)月

Tris-HCL緩沖液(1mol/L,RNase free,pH8.5)100ml現(xiàn)貨供應(yīng)，保存：4℃,高壓滅菌,6個(gè)月

*溶液(0.5%,62.5KU)100ml現(xiàn)貨供應(yīng)，保存：—20℃,避光,24個(gè)月

人心鈉肽(ANP)ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)服務(wù)Human Atrial Natriuretic Peptide,ANP ELISA KIT ELISA. 96T/48T

人血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)服務(wù)Human Serum amyloid A,SAA ELISA KIISA. 96T/48T

大鼠γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)服務(wù)Rat interferon-inducible protein 16,IFI16/p16 ELISA KIISA. 96T/48T

小鼠前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)服務(wù)Mouse Prostatic Acid Phosphatase,PAP ELISA KIISA. 96T/48T

*溶液(Chloramphenicol,34mg/ml)10ml現(xiàn)貨供應(yīng)，保存：—20℃,避光,12個(gè)月

Weil髓鞘染色試劑盒4×100ml現(xiàn)貨供應(yīng)，保存：室溫,避光,12個(gè)月

Tris-HCL緩沖液(1mol/L,RNase free,pH8.0)500ml現(xiàn)貨供應(yīng)，保存：4℃,高壓滅菌,6個(gè)月

*溶液(0.1%,62.5KU)500ml現(xiàn)貨供應(yīng)，保存：—20℃,避光,24個(gè)月

人神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1(NRG-1)ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)服務(wù)human Neuregulin 1,NRG-1 ELISA KIISA. 96T/48T

人肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)服務(wù)Human Troponin Ⅰ,Tn-Ⅰ ELISA KIISA. 96T/48T

大鼠8異前列腺素(8-iso-PG)ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)服務(wù)Rat 8-iso prostaglandin,8-iso-PG ELISA KIISA. 96T/48T

小鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)服務(wù)Mouse Alpha-fetoprotein,AFP ELISA KIISA. 96T/48T

*溶液(Chloramphenicol,34mg/ml)5×1ml現(xiàn)貨供應(yīng)，保存：—20℃,避光,12個(gè)月

Weil髓鞘染色試劑盒4×50ml現(xiàn)貨供應(yīng)，保存：室溫,避光,12個(gè)月

Tris-HCL緩沖液(1mol/L,RNase free,pH8.0)100ml現(xiàn)貨供應(yīng)，保存：4℃,高壓滅菌,6個(gè)月

*溶液(0.1%,12.5KU)100ml現(xiàn)貨供應(yīng)，保存：—20℃,避光,24個(gè)月

人活化素A(ACV-A)ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)服務(wù)Human Activin A,ACV-A ELISA KIISA. 96T/48T

人超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)服務(wù)Human high sensitivity C-Reactive Protein,hs-CRP ELISA KIISA. 96T/48T

小鼠白介素3(IL-3)ELISA  試劑盒ELISA加樣時(shí)的防錯(cuò)小經(jīng)驗(yàn)：

（1）用一張寫(xiě)滿字的紙，字越多越好，比如報(bào)紙，墊在下面，這樣，加過(guò)標(biāo)本的小孔看過(guò)去下面的字會(huì)變小，沒(méi)加的字正常，非常容易區(qū)分。

（2）可以利用液面反光與沒(méi)有加的孔加以區(qū)別

（3）在標(biāo)本加完后，再把加樣槍全壓下，使液面產(chǎn)生小氣泡，也可以加以區(qū)分

實(shí)驗(yàn)zui常見(jiàn)問(wèn)題解答：

問(wèn)：做間接Elisa法測(cè)試小鼠血清中的IgE抗體，設(shè)空白對(duì)照、和陰性對(duì)照、陽(yáng)性血清稀釋倍數(shù)為5千、1萬(wàn)、10萬(wàn)、20萬(wàn)不等，用的是*標(biāo)記的羊抗鼠IgE抗體，和親和素的辣根過(guò)氧化物酶。可是結(jié)果除了空白對(duì)照孔沒(méi)有顏色外，其余各孔全有顏色，而且OD值都相差不大，為什么？

回答：可能原因如下：

（1） 水質(zhì)被金屬離子等污染；防止辦法盡量使用新鮮水或蒸餾水。

（2） 洗滌不充分，樣品中其它成分殘留或酶殘留；防止辦法洗滌液應(yīng)注滿微孔，充分洗滌。

（3） 移液頭重復(fù)使用，未洗凈或消毒不*； 防止辦法移液頭一次性使用。

（4） 酶標(biāo)板靈敏度過(guò)高。

（5） 一抗顯色時(shí)間的控制等等，關(guān)于ELISA的每一步都要注意才行。

 ELISA（酶聯(lián)接免疫吸附反應(yīng)分析）是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的高效催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。 由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行，每加入一種試劑孵育后，可通過(guò)洗滌除去多余的游離反應(yīng)物，從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。

      實(shí)際應(yīng)用中，通過(guò)不同的設(shè)計(jì)，具體的方法步驟可有多種。即：用于檢測(cè)抗體的間接法、用于檢測(cè)抗原的雙抗體夾心法以及用于檢測(cè)小分子抗原或半抗原的抗原競(jìng)爭(zhēng)法等等。目前我們對(duì)客戶提供比較常用的ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法服務(wù)。

技術(shù)流程

小鼠白介素3(IL-3)ELISA  試劑盒問(wèn)題解答：

若實(shí)驗(yàn)效果不好，請(qǐng)及時(shí)對(duì)顯色結(jié)果拍照，保留所用板條及未使用試劑，并妥善保存，然后我公司為您解決問(wèn)題。同時(shí)您也可以參考以下資料：

題解答