小鼠白介素-5(IL-5)ELISA 試劑盒

包裝規(guī)格：48T/96T

檢測方法：酶聯(lián)免疫

檢測標本：血清、血漿、細胞培養(yǎng)液等

本試劑盒僅供體外研究使用!

試劑盒組成

需要而未提供的試劑和器材

• 酶標儀(450nm檢測波長濾光片，570nm或630nm校正波長濾光片) 。
• 洗板機（可調(diào)注液量，保證每孔洗液加至0.35ml而不溢出）。
• 超凈工作臺，生物安全柜，通風(fēng)柜。
• 高精度單道加液器（量程為0.5-10μl, 2-20μl,20-200μl,200-1000μl).
• 高精度多道加液器（8道或12道，量程為50-300μl).
• 37℃恒溫箱。
• 低溫離心機。
• 電冰箱（4℃,-20℃,-86℃）.

9.  漩渦混合儀，低頻振蕩器等

注意事項

• 從2-8℃取出的試劑盒，在開啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘。酶標包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
• 嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準。
• 為避免交叉污染，要避免重復(fù)使用手中的吸頭和封板膜。
• 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
• 底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。

6.   所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按生物廢棄物處理。終止液為2M硫酸，使用時必須注意安全。

7.  各步驟加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校準其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，*使用排槍加樣。

8.  每次試驗測定的同時做標準曲線，。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔zui高濃度的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n）。

9.  配制試劑時，要用旋渦混合儀混勻。加入孔內(nèi)的試劑，充分混勻?qū)y試結(jié)果尤為重要，使用微量振蕩器(使用zui低頻率)，如無微量振蕩器，可在反應(yīng)前手工輕輕晃動酶標板1分鐘，例如做圓周動作，使加入孔中的反應(yīng)液混勻。

10.  實驗用酶標儀應(yīng)嚴格按使用說明書規(guī)范操作，并在使用前充分預(yù)熱。

11.  手工洗板應(yīng)注意：甩掉酶標板內(nèi)的液體；在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙，酶標板朝下用力拍幾次；將稀釋后的洗滌液至少0.35ml注入孔內(nèi)，浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要，重復(fù)此過程數(shù)次。自動洗板：如果有自動洗板機，應(yīng)在熟練使用后再用到正式實驗過程中。

小鼠白介素-5(IL-5)ELISA 試劑盒樣本要求

1．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

2．標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存或根據(jù)存放，時間做相應(yīng)溫度調(diào)整，但應(yīng)避免反復(fù)凍融，（由于樣本種類過多，每個單位處理方式不一樣，本說明書不做詳細介紹）。

操作程序

• 標準品的稀釋：（本試劑系統(tǒng)提供原倍標準品一支，用戶請按照說明自行在小試管中倍比稀釋）按下表格執(zhí)行：

• 根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。
• 加樣:(詳細操作流程請客服索要說明書）
• 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋備用。
• 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
• 顯色：每孔先加入顯色劑A 50μl，再加入顯色劑B 50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘。
• 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
• 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后10分鐘以內(nèi)進行。

結(jié)果判斷

1.  每個標準品和標本的OD值應(yīng)減去零孔的OD值。（若不減零孔值，標準曲線的零孔應(yīng)相交于Y軸） 

2. 根據(jù)標準品的濃度及對應(yīng)的OD值計算出標準曲線的直線回歸方程，再根據(jù)樣品的OD值在回歸方程上計算出對應(yīng)的樣品濃度。也可以使用各種熟悉應(yīng)用軟件來計算。

3．手工繪制標準曲線。以標準品濃度作橫坐標，OD值作縱坐標，以平滑線連接各標準品的坐標點。通過標本的OD值可在標準曲線上查出其濃度。*使用專業(yè)制作曲線軟件進行分析計算結(jié)果。

4．若標本OD值高于標準曲線上限，應(yīng)適當稀釋后重測，計算濃度時應(yīng)乘以稀釋倍數(shù)。

試劑盒性能

1.  準確性：標準品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值，大于等于0.9200。
2.  靈敏度：zui小可檢測濃度達，1.05ng/ml。
3.  特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
4.  重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。

5 . 回收率：70-110%.

6. 貯藏：2-8℃，避光防潮保存。

7. 有效期：6個月

8. 檢測范圍： 480ng/ml -3.9ng/ml

小鼠白介素-5(IL-5)ELISA 試劑盒之外語純生物其他優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品如下：

人多巴胺D2受體(D2R)ELISA試劑盒免費代測服務(wù)Human dopamine D2 receptor,D2R ELISA KIISA. 96T/48T

人熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒免費代測服務(wù)Human Heat Shock Protein 60,HSP-60 ELISA KIISA. 96T/48T

大鼠基質(zhì)細胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA試劑盒免費代測服務(wù)Rat Stromal cell derived factor 1a,SDF-1a ELISA KIISA. 96T/48T

小鼠卵巢癌標志物CA125ELISA試劑盒免費代測服務(wù)Mouse ovarian cancer marker-CA125 ELISA KIISA. 96T/48T

*溶液(Chloramphenicol,34mg/ml)50ml現(xiàn)貨供應(yīng)，保存：—20℃,避光,12個月

改良Bielschowsky染色試劑盒5×50ml現(xiàn)貨供應(yīng)，保存：4℃,避光,3個月

Tris-HCL緩沖液(1mol/L,RNase free,pH8.5)100ml現(xiàn)貨供應(yīng)，保存：4℃,高壓滅菌,6個月

*溶液(0.5%,62.5KU)100ml現(xiàn)貨供應(yīng)，保存：—20℃,避光,24個月

人心鈉肽(ANP)ELISA試劑盒免費代測服務(wù)Human Atrial Natriuretic Peptide,ANP ELISA KIT ELISA. 96T/48T

人血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒免費代測服務(wù)Human Serum amyloid A,SAA ELISA KIISA. 96T/48T

大鼠γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA試劑盒免費代測服務(wù)Rat interferon-inducible protein 16,IFI16/p16 ELISA KIISA. 96T/48T

小鼠前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA試劑盒免費代測服務(wù)Mouse Prostatic Acid Phosphatase,PAP ELISA KIISA. 96T/48T

*溶液(Chloramphenicol,34mg/ml)10ml現(xiàn)貨供應(yīng)，保存：—20℃,避光,12個月

Weil髓鞘染色試劑盒4×100ml現(xiàn)貨供應(yīng)，保存：室溫,避光,12個月

Tris-HCL緩沖液(1mol/L,RNase free,pH8.0)500ml現(xiàn)貨供應(yīng)，保存：4℃,高壓滅菌,6個月

*溶液(0.1%,62.5KU)500ml現(xiàn)貨供應(yīng)，保存：—20℃,避光,24個月

人神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1(NRG-1)ELISA試劑盒免費代測服務(wù)human Neuregulin 1,NRG-1 ELISA KIISA. 96T/48T

人肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA試劑盒免費代測服務(wù)Human Troponin Ⅰ,Tn-Ⅰ ELISA KIISA. 96T/48T

大鼠8異前列腺素(8-iso-PG)ELISA試劑盒免費代測服務(wù)Rat 8-iso prostaglandin,8-iso-PG ELISA KIISA. 96T/48T

小鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA試劑盒免費代測服務(wù)Mouse Alpha-fetoprotein,AFP ELISA KIISA. 96T/48T

*溶液(Chloramphenicol,34mg/ml)5×1ml現(xiàn)貨供應(yīng)，保存：—20℃,避光,12個月

Weil髓鞘染色試劑盒4×50ml現(xiàn)貨供應(yīng)，保存：室溫,避光,12個月

Tris-HCL緩沖液(1mol/L,RNase free,pH8.0)100ml現(xiàn)貨供應(yīng)，保存：4℃,高壓滅菌,6個月

*溶液(0.1%,12.5KU)100ml現(xiàn)貨供應(yīng)，保存：—20℃,避光,24個月

人活化素A(ACV-A)ELISA試劑盒免費代測服務(wù)Human Activin A,ACV-A ELISA KIISA. 96T/48T

人超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒免費代測服務(wù)Human high sensitivity C-Reactive Protein,hs-CRP ELISA KIISA. 96T/48T

小鼠白介素-5(IL-5)ELISA 試劑盒ELISA加樣時的防錯小經(jīng)驗：

（1）用一張寫滿字的紙，字越多越好，比如報紙，墊在下面，這樣，加過標本的小孔看過去下面的字會變小，沒加的字正常，非常容易區(qū)分。

（2）可以利用液面反光與沒有加的孔加以區(qū)別

（3）在標本加完后，再把加樣槍全壓下，使液面產(chǎn)生小氣泡，也可以加以區(qū)分

實驗zui常見問題解答：

問：做間接Elisa法測試小鼠血清中的IgE抗體，設(shè)空白對照、和陰性對照、陽性血清稀釋倍數(shù)為5千、1萬、10萬、20萬不等，用的是*標記的羊抗鼠IgE抗體，和親和素的辣根過氧化物酶?？墒墙Y(jié)果除了空白對照孔沒有顏色外，其余各孔全有顏色，而且OD值都相差不大，為什么？

回答：可能原因如下：

（1） 水質(zhì)被金屬離子等污染；防止辦法盡量使用新鮮水或蒸餾水。

（2） 洗滌不充分，樣品中其它成分殘留或酶殘留；防止辦法洗滌液應(yīng)注滿微孔，充分洗滌。

（3） 移液頭重復(fù)使用，未洗凈或消毒不*； 防止辦法移液頭一次性使用。

（4） 酶標板靈敏度過高。

（5） 一抗顯色時間的控制等等，關(guān)于ELISA的每一步都要注意才行。

小鼠白介素-5(IL-5)ELISA 試劑盒問題解答：

若實驗效果不好，請及時對顯色結(jié)果拍照，保留所用板條及未使用試劑，并妥善保存，然后我公司為您解決問題。同時您也可以參考以下資料：

題解答