產品名稱:人蛋白C(Protein C)ELISA試劑盒免費代測
產品規格:48T/96T
檢測方法: ELISA酶聯免疫法
說 明 書:隨貨發送,也可直接在線銷售索取
測試種屬:人、大小鼠、豚鼠、兔子、牛、羊、豬、雞、鴨elisa試劑盒等種屬
檢測目的:用于測定血清,血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本。
試劑盒保存及有效期:2-8℃,避光保存:6個月。
產品產地:進口/國產
產品庫存:現貨供應
品牌:自主研發/進口原裝
產品價格:*,洽談!
試劑盒使用范圍:僅供科研檢測,不得用于臨床.
人蛋白C(Protein C)ELISA試劑盒免費代測產品價格:*,洽談!
酶聯免疫法試劑盒定性定量檢測一步到位,可同時大批量完成多種屬的檢測工作,而且一天之內可以檢查幾百甚*千份標本,正規專業的我們,一定能幫您,將實驗做得更好,更精確。試驗過程中,如有任何疑問都可和我們,無論是售前、售中、售后我們都將始終如一,將優質服務進行到底。
供應商:上海繁旌生物科技有限公司
上海繁旌生物ELISA試劑盒*優勢:
1、采用全進口原料和抗體:高效、靈敏、特異,嚴格引進技術標準進行批量生產。
2、*的優化方案:重復性高,可靠性。
3、技術服務:專業,及時,耐心。
4、現貨供應:江浙滬隔天到貨,外地3-5天到貨。
人蛋白C(Protein C)ELISA試劑盒免費代測僅供研究使用 目的:本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關
液體樣本中* 1(KLK-1)的含量。
實驗原理:
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人* 1(KLK-1)水平。用純化的人激肽釋
放酶 1(KLK-1)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入*
1(KLK-1),再與 HRP 標記的* 1(KLK-1)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合
物,經過*洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作
用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的* 1(KLK-1)呈正相關。用酶標儀
在 450nm 波長下測定吸光度(OD 值),通過標準曲線計算樣品中人* 1(KLK-1)
濃度。
試劑盒組成:
試劑盒組成 48 孔配置 96 孔配置 保存
說明書 1 份 1 份
封板膜 2 片(48) 2 片(96)
密封袋 1 個 1 個
酶標包被板 1×48 1×96 2-8℃保存
標準品:27ng/ml 0.5ml×1 瓶 0.5ml×1 瓶 2-8℃保存
標準品稀釋液 1.5ml×1 瓶 1.5ml×1 瓶 2-8℃保存
酶標試劑 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存
樣品稀釋液 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存
顯色劑 A 液 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存
顯色劑 B 液 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存
終止液 3ml×1 瓶 6ml×1 瓶 2-8℃保存
20 倍濃縮洗滌液 20ml×1 瓶 30ml×1 瓶 2-8℃保存
樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固 10-20 分鐘,離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上
清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。
2. 血漿:應根據標本的要求選擇 EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合 10-20 分鐘后,離心
20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次
離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清,保存過程
中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/
1分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用 PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞
濃度達到 100 萬/ml 左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心 20 分
鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的 PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備
用。標本融化后仍然保持 2-8℃的溫度。加入一定量的 PBS(PH7.4),用手工或勻漿器
將標本勻漿充分。離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待
檢測,其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上
進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔 10 孔,在*、第二孔中分別加標
準品 100µl,然后在*、第二孔中加標準品稀釋液 50µl,混勻;然后從*孔、第二
孔中各取 100µl 分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液 50µl,
混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取 50µl 棄掉,再各取 50µl 分別加到第五、第六孔
中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液 50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各
取 50µl 分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液 50µl,混
勻后從第七、第八孔中分別取 50µl 加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準
品稀釋液 50µl,混勻后從第九第十孔中各取 50µl 棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為 50µl,
濃度分別為 18ng/ml,12ng/ml,6ng/ml,3ng/ml, 1.5 ng/ml)。
2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣
品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl,然后再加待測樣品 10µl(樣
品zui終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混
勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4. 配液:將 20 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 20 倍稀釋后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此
重復 5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑 50µl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同 3。
8. 洗滌:操作同 5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
15 分鐘.
10. 終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11. 測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止
液后 15 分鐘以內進行。
注意事項:
1. 試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未
用完,板條應裝入密封袋中保存。
2. 濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3. 各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間
控制在 5 分鐘內,如標本數量多,*使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本 OD 值
大于標準品孔*孔的 OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n 倍)后再測定,計
算時請zui后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物請避光保存。
7. 嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9. 本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
計算:
以標準物的濃度為橫坐標,OD 值為縱坐標,
在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的 OD
值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋
倍數;或用標準物的濃度與 OD 值計算出標
準曲線的直線回歸方程式,將樣品的 OD 值
代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋
倍數,即為樣品的實際濃度。
(此圖僅供參考)
試劑盒性能:
1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數 R 值為 0.990 以上。
2.批內與批見應分別小于 9%和 11%
檢測范圍:
0.8ng/ml – 20ng/ml
保存條件及有效期:
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6 個月
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