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豬血管內皮生長因子A(VEGFA)elisa測定48T/96T

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更新時間:2017-05-15 13:21:29瀏覽次數:201次

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產品簡介

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詳細介紹

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豬血管內皮生長因子A(VEGFA)elisa測定48T/96T產品規格分為96T、48T,提供ELISA實驗代測服務,如沒有特殊說明,實驗報告將以電子形式發送.北京方程生物公司是一家專業經營生物、儀器、試劑、耗材的公司,在廣大用戶的幫助和支持下,經過不懈的努力,已成為國內生命科學領域產品的主要供應商之一,代理許多*水平的高科技產品,包括分子生物學、細胞生物學、免疫學、診斷等多個研究及應用領域.公司的服務和業務網絡遍及全國,在同行獲得*好評. 特別是生物試劑和細胞產品更是種類齊全、價格實惠,*原代細胞,專業培養基,常用傳統培養基,細胞培養用的相關試劑,氨基酸,抗生素,維他命類產品品種齊全,試劑耗材種類繁多.。

 

豬血管內皮生長因子A(VEGFA)elisa測定48T/96T顯色和比色(一) 顯色顯色是ELISA中的zui后一步溫育反應,此時酶催化無色的底物生成有色的產物。反應的溫度和時間仍是影響顯色的因素。在一定時間內,陰性孔可保持無色,而陽性孔則隨時間的延長而呈色加強。適當提高溫度有助于加速顯色進行。在定量測定中,加入底物后的反應溫度和時間應按規定力求準確。定性測定的顯色可在室溫進行,時間一般不需要嚴格控制,有時可根據陽性對照孔和陰性對照孔的顯色適當縮短或延長反應時間,及時判斷。OPD底物顯色一般在室外溫或37℃反應20-30分鐘后即不再加深,再延長反應時間,可使本底值增高。OPD底物液受光照會自行變色,顯色反應應避光進行,顯色反應結束時加入終止液終止反應。OPD產物用硫酸終止后,顯色由橙黃色轉向棕黃色。TMB受光照的影響不大,可在室溫中置于操作臺上,邊反應觀察結果。但為保證實驗結果的穩定性,宜在規定的適當時間閱讀結果。TMB經HRP作用后,約40分鐘顯色達,隨即逐漸減弱,至2小時后即可*消退至無色。TMB的終止液有多種,疊氮鈉和十二烷基硫酸鈉(SDS)等酶抑制劑均可使反應終止。這類終止劑尚能使藍色維持較長時間(12-24小時)不褪,是目視判斷的良好終止劑。此外,各類酸性終止液則會使藍色轉變成黃色,此時可用特定的波長(450nm)測讀吸光值。(二)比色比色前應先用潔凈的吸水紙拭干板底附著的液體,然后將板正確放入酶標比色儀的比色架中。以軟板為載體的試驗,需先將板置于標準96孔的座架中,才可進行比色。在加底物液顯色前,先將軟板邊緣剪凈,這樣,此板就可*平妥坐入座架中。 比色時應先以蒸餾水校零點,測讀底物孔(未經任何反應僅加底物液的孔)和空白孔(以生理鹽水或稀釋液代替標本作全過程的孔),以記錄本次試驗的試劑狀況。其后可用空白孔以蒸餾水校零點,以上各孔的吸光度需減去空白孔的吸光度,然后進行計算。比色結果的表達以往通用光密度(oplical density,OD),現按規定用吸光度(absorbence,A),兩者含義相同。通常的表示方法是,將吸收波長寫于A字母的右下角,如OPD的吸收波長為492nm,表示方法為"A492nm"或"OD492nm"。(三) 酶標儀酶標比色儀簡稱酶標儀,通常指于測讀ELISA結果吸光度的光度計。針對固相載體形式的不同,各有特制的適用于板、珠和小試管的設計。許多試劑公司配套供應酶標儀。酶標儀的主要性能指標有:測讀速度、讀數的準確性、重復性、精確度和可測范圍、線性等等。優良的酶標儀的讀數一般可精確到0.001,準確性為±1%,重復性達0.5%。舉例說,若某孔測得的A值為1.083,則該孔相對于空氣的真實A值應為1.083±0.01(1.073~1.093),重復測定數次,其A值均應1.083±0.05(1.078~1.088)在之間。酶標儀的可測范圍視各酶標儀的性能而不同。普通的酶標儀在0.000~2.000,新型號的酶標儀上限拓寬達2.900,甚至更高。超出可測上限的A值常以"*"或"over"或其它符號表示。應注意可測范圍與線性范圍的不同,線性范圍常小于可測范圍,比如某一酶標儀的可測范圍為0.000~2.900,而其線性范圍僅0.000~2.000,這在定量ELISA中制作標準曲線時應予注意。酶標儀不應安置在陽光或強光照射下,操作時室溫宜在15~30℃,使用前先預熱儀器15-30分鐘,測讀結果更穩定。測讀A值時,要選用產物的敏感吸收峰,如OPD用492nm波長。有的酶標儀可用雙波長式測讀,即每孔先后測讀兩次,*次在zui適波長(W1),第二次在不敏感波長(W2),兩次測定間不移動ELISA板的位置。例如OPD用492nm為W1,630nm為W2,zui終測得的A值為兩者之差(W1-W2)。雙波長式測讀可減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。各種酶標儀性能有所不同,使用中應詳細新聞記者說明書。

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凡購買我公司目錄中任一種ELISA檢測試劑盒,均可享受免費代測服務,代測實驗周期一般為實驗室收到樣本日起5-10個工作日,具體周期要看實驗室所接收實驗的數量及進度,如果您的樣本需要我們代處理(如組織勻漿,血清血漿,植物葉片等),請您提前和我們!可檢測標本:血清、血漿、細胞上清液、尿液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸腹水、組織等。

關鍵詞:比色儀 酶標儀
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