人載脂蛋白D(ApoD)ELISA檢測試劑盒操作步驟

方法一　用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:
1.　包被：用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg／ml。在每個聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。(簡稱洗滌，下同)。
2.　加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔)。
3.　加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5～1小時，洗滌。
4.　加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘。
5.　終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
6.　結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“ "、“-"號表示。也可測O·D值：在ELISA檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對照孔調(diào)零后測各孔O·D值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。
方法二　用于檢測未知抗體的間接法：
用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg／ml，每孔加0.1ml，4℃過夜。次日洗滌3次。加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。其余步驟同“雙抗體夾心法"的4、5、6。

產(chǎn)品介紹：

產(chǎn)品名稱：人載脂蛋白D(ApoD)ELISA檢測試劑盒

英文名稱：Human ApoD ELISA Kit

產(chǎn)品編號：YMH12080

人ApoD試劑盒產(chǎn)品規(guī)格：

48T(48T檢測雙標(biāo)準(zhǔn)的可以檢測37個樣本，其他有10個標(biāo)準(zhǔn)品孔，1個空白對照。48T檢測單標(biāo)準(zhǔn)可以檢測40個樣本，其他有7個標(biāo)準(zhǔn)品孔，1個空白對照。 )

96T（96T檢測雙標(biāo)準(zhǔn)的可以檢測85個樣本，其他有10個標(biāo)準(zhǔn)品孔，1個空白對照。96T檢測單標(biāo)準(zhǔn)可以檢測90個樣，7個標(biāo)準(zhǔn)品控 1個空白對照。）

人載脂蛋白D試劑盒技術(shù)問答：

問：我需要選2個排斥表達(dá)高的免疫因子，可以*一下嗎？

答：IL-4、IL-5，il-2，這個免疫應(yīng)答機(jī)制中的抗炎因子類型，也是比較關(guān)鍵的指標(biāo)。這個指標(biāo)的選取，要跟老師本身的目的來的

問：請問，你們移植排斥因子都有哪些試劑盒，免疫排斥一般選哪兩個

答：HLA-Ⅰ和Ⅱ，IL-4、IL-5，il-2，直接影響就是前面2個指標(biāo)后面都是免疫應(yīng)答，根據(jù)老師自己情況來選擇

問：HLA-G5 這個指標(biāo)是有排斥反映的人高還是沒有排斥的人血清中濃度高?

答：高好，也就是這個指標(biāo)越高，耐受越好

問：你們公司能測抗氧化作用的指標(biāo)的試劑盒有哪些啊？

答：MDA、活性氧(ROS)、過氧化氫酶(CAT)、總抗氧化能力(T-AOC)、脂質(zhì)過氧化物(LPO),SOD,還原型*(GSH),*過氧化酶(GSH-Px)等

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