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人脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)ELISA實(shí)驗(yàn)試劑盒技術(shù)流程：

雙抗體夾心法(檢測未知抗原)

間接法(檢測未知抗體)

1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃ 過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌(同時(shí)做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔)。
3、加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～1小時(shí)，洗滌。
4、加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。
5、終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號(hào)表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。

1、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1-10ug/ml，每孔加0.1ml，4℃過夜。次日洗滌3次。
2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽性孔對照)
3、加酶標(biāo)抗體：于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.05ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。
5、終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號(hào)表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。

產(chǎn)品介紹：

產(chǎn)品名稱：人脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)ELISA實(shí)驗(yàn)試劑盒

英文名稱：Human LBP ELISA Kit

產(chǎn)品編號(hào)：YMH12119

人LBP試劑盒產(chǎn)品規(guī)格：

48T(48T檢測雙標(biāo)準(zhǔn)的可以檢測37個(gè)樣本，其他有10個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品孔，1個(gè)空白對照。48T檢測單標(biāo)準(zhǔn)可以檢測40個(gè)樣本，其他有7個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品孔，1個(gè)空白對照。 )

96T（96T檢測雙標(biāo)準(zhǔn)的可以檢測85個(gè)樣本，其他有10個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品孔，1個(gè)空白對照。96T檢測單標(biāo)準(zhǔn)可以檢測90個(gè)樣，7個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品控 1個(gè)空白對照。）

人脂多糖結(jié)合蛋白試劑盒處理及要求：

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。

2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

人脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)ELISA實(shí)驗(yàn)試劑盒相關(guān)產(chǎn)品目錄：

淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)ELISA試劑盒，96T/48T科研實(shí)驗(yàn)
兒茶酚胺(CA)ELISA試劑盒，96T/48T科研實(shí)驗(yàn)
吡啶交聯(lián)物(PY)ELISA試劑盒，96T/48T科研實(shí)驗(yàn)
糖化血紅蛋白A1c(A1c)ELISA試劑盒，96T/48T科研實(shí)驗(yàn)
半*蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA試劑盒，96T/48T科研實(shí)驗(yàn)
子脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉(DPD)ELISA試劑盒，96T/48T科研實(shí)驗(yàn)
子組織因子(TF)ELISA試劑盒，96T/48T科研實(shí)驗(yàn)
子骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA試劑盒，96T/48T科研實(shí)驗(yàn)
子組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA試劑盒，96T/48T科研實(shí)驗(yàn)
子組織多肽抗原(TPA)ELISA試劑盒，96T/48T科研實(shí)驗(yàn)
子組胺(HIS)ELISA試劑盒，96T/48T科研實(shí)驗(yàn)
子轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒，96T/48T科研實(shí)驗(yàn)
子腫瘤壞死因子α(TNF-α) ELISA試劑盒，96T/48T科研實(shí)驗(yàn)
子脂聯(lián)素(ADP)ELISA試劑盒，96T/48T科研實(shí)驗(yàn)