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人脂肪細胞型脂肪酸結合蛋白(aFABP)ELISA試劑盒

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更新時間:2017-03-20 08:58:17瀏覽次數:291次

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中文名稱:人脂肪細胞型脂肪酸結合蛋白(aFABP)ELISA試劑盒
英文名稱:Human aFABP Elisa Kit
檢測范圍:或在線客服
本公司*售前、售中、售后服務,為您解決實驗過程中的問題??商峁┟赓M代測服務

人脂肪細胞型脂肪酸結合蛋白(aFABP)ELISA試劑盒技術流程:

雙抗體夾心法(檢測未知抗原)

間接法(檢測未知抗體)

1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應孔中加0.1ml,4 過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37 孵育1小時。然后洗滌(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3、加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.05ml。37 孵育0.5~1小時,洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37 10~30分鐘。
5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。

1、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1-10ug/ml, 每孔加0.1ml,4過夜。次日洗滌3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)
3、加酶標抗體:于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.05ml,37孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37 10~30分鐘。
5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。

 

產品介紹:

產品名稱:人脂肪細胞型脂肪酸結合蛋白(aFABP)ELISA試劑盒

英文名稱:Human aFABP ELISA Kit

產品編號:YMH12127

人aFABP試劑盒產品規格:

48T(48T檢測雙標準的可以檢測37個樣本,其他有10個標準品孔,1個空白對照。48T檢測單標準可以檢測40個樣本,其他有7個標準品孔,1個空白對照。 )

96T(96T檢測雙標準的可以檢測85個樣本,其他有10個標準品孔,1個空白對照。96T檢測單標準可以檢測90個樣,7個標準品控 1個空白對照。)

實驗設備及操作步驟

人脂肪細胞型脂肪酸結合蛋白試劑盒檢測方法都可以通過標準酶標儀使用。

1. 標準品的稀釋:ELISA試劑盒內附標準品一支,用戶在小試管中進行稀釋。

2. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。

4. 配液:將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30 秒后棄去,如此重復5 次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

7. 溫育

8. 洗滌

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應。

11. 測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度。測定應在加終止液后15 分鐘以內進行。

 

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