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人中間α球蛋白抑制因子H4(ITIH4)ELISA試劑盒

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更新時間:2017-03-20 08:48:53瀏覽次數:88次

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中文名稱:人中間α球蛋白抑制因子H4(ITIH4)ELISA試劑盒
英文名稱:Human ITIH4 Elisa Kit
檢測范圍:或在線客服
本公司*售前、售中、售后服務,為您解決實驗過程中的問題。可提供免費代測服務

人中間α球蛋白抑制因子H4(ITIH4)ELISA試劑盒技術流程:

雙抗體夾心法(檢測未知抗原)

間接法(檢測未知抗體)

1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應孔中加0.1ml,4 過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37 孵育1小時。然后洗滌(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3、加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.05ml。37 孵育0.5~1小時,洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37 10~30分鐘。
5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。

1、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1-10ug/ml, 每孔加0.1ml,4過夜。次日洗滌3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)
3、加酶標抗體:于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.05ml,37孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37 10~30分鐘。
5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。

 

產品介紹:

產品名稱:人中間α球蛋白抑制因子H4(ITIH4)ELISA試劑盒

英文名稱:Human ITIH4 ELISA Kit

產品編號:YMH121354

人ITIH4試劑盒產品規格:

48T(48T檢測雙標準的可以檢測37個樣本,其他有10個標準品孔,1個空白對照。48T檢測單標準可以檢測40個樣本,其他有7個標準品孔,1個空白對照。 )

96T(96T檢測雙標準的可以檢測85個樣本,其他有10個標準品孔,1個空白對照。96T檢測單標準可以檢測90個樣,7個標準品控 1個空白對照。)

實驗設備及操作步驟

人中間α球蛋白抑制因子H4試劑盒檢測方法都可以通過標準酶標儀使用。

1. 標準品的稀釋:ELISA試劑盒內附標準品一支,用戶在小試管中進行稀釋。

2. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。

4. 配液:將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30 秒后棄去,如此重復5 次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

7. 溫育

8. 洗滌

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應。

11. 測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度。測定應在加終止液后15 分鐘以內進行。

 

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