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江蘇菲亞生物科技有限公司
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沙門氏菌顯色培養(yǎng)基使用方法
2017-9-11 閱讀(1721)
蛋白胨和酵母膏粉提供碳氮源和微量元素；可維持均衡的滲透壓；瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑；膽鹽抑制革蘭氏陽性菌；選擇性添加劑增強(qiáng)培養(yǎng)基的抑制雜菌的能力；混合色素分別與沙門氏菌和大腸菌群所對(duì)應(yīng)的酶發(fā)生特異性反應(yīng)，水解底物，釋放出顯色基團(tuán)，在淡黃色平板上沙門氏菌產(chǎn)生品紅色的菌落，大腸菌群產(chǎn)生藍(lán)綠色的菌落。
沙門氏菌顯色培養(yǎng)基使用方法：
1、稱取本品47.5g，混合均勻加熱至100℃，并按常規(guī)不斷攪拌直至*溶解(不能持續(xù)高溫加熱，建議不要重復(fù)煮溶)，不需高壓滅菌，冷至50℃，加入10支沙門氏菌選擇性添加劑(凍干粉每支需先用1ml無菌水溶解)，混勻，傾注滅菌平皿。
2、按國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、SN標(biāo)準(zhǔn)、FDA標(biāo)準(zhǔn)或其它方法制備樣品液與增菌液。
3、建議使用二步增菌法：
（1）前增菌：將處理過的樣品25g置于225mL緩沖蛋白胨水中，混合均勻后37℃培養(yǎng)6～8h；
（2）選擇性增菌：取前增菌液1mL加入到9mL四硫磺酸鈉煌綠增菌液（TTB）中，混合均勻后37℃培養(yǎng)18～24h；
4、用接種環(huán)取增菌液一環(huán)，劃線接種于沙門氏菌顯色平板上，置于36±1℃培養(yǎng)18-24小時(shí)。
5、觀察結(jié)果。挑取顯色平板上呈品紅色，扁平透明，邊緣光滑，直徑約2mm的可疑菌落進(jìn)行進(jìn)一步的試驗(yàn)。
6、可使用MicrogenTMGN-ID或API20E或生化管試驗(yàn)，對(duì)疑似沙門氏菌菌落進(jìn)行生化鑒定。
