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江蘇菲亞生物科技有限公司
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說一說牛血清的解凍和熱滅活方法
2022-5-26 閱讀(3309)
牛血清產品的作用都有什么？：
1、提供對維持細胞指數生長的激素，基礎培養基中沒有或量很少的營養物，以及主要的低分子營養物。
2、是細胞貼壁、鋪展在塑料培養基質上所需因子來源。
3、有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合，起到解毒作用。
4、提供結合蛋白，能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等，能結合或調變它們所結合的物質活力。
5、起酸堿度緩沖液作用。
6、提供蛋白酶抑制劑，使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活，保護細胞不受傷害。
牛血清的解凍和熱滅活方法如下：
瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室溫,待全部溶解后再分裝。在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發生。切勿直接將血清從-20℃進入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝集而出現沉淀。
熱滅活是指56℃, 30分鐘加熱已*解凍的血清。加熱過程中須規則搖晃均勻。此熱處理的目的是使血清中的補體成分(complement)滅活。除非必須,一般不建議作此熱處理,因為熱處理會造成血清沉淀物顯著增多,而且還會影響血清的質量。補體參與反應有:細胞毒作用, 平滑肌細胞收縮, 肥大細胞和血小板釋放組胺, 增強吞噬作用, 促進淋巴細胞和巨噬細胞發生化學趨化和活化。
