膠體金是一種常用的標記技術,是以膠體金作為示蹤標志物應用于抗原抗體的一種新型的免疫標記技術,有其*的優點。近年已在各種生物學研究中廣泛使用。在臨床使用的免疫印跡技術幾乎都使用其標記。同時在流式、電鏡、免疫、分子生物學以至生物芯片中都可能例用到。
膠體金 - 鑒定和保存
膠體金的制備并不難,但要制好高質量的膠體金卻也并非易事。因此對每次制好的膠體金應加以檢定,主要檢查指標有顆粒大小,粒徑的均一程度及有無凝集顆粒等。在日光下仔細觀察比較膠體金的顏色,可以粗略估計制得的金顆粒的大小。當然也可用分光光度計掃描λmax來估計金顆粒的粒徑。制備的膠體金作電鏡觀察,并選一些代表性的作顯微攝影,可以比較地測定膠體金的平均粒徑;良好的膠體金應該是清亮透明的,若制備的膠體金混濁或液體表面有漂浮物,提示此次制備的膠體金有較多的凝集顆粒。
膠體金在潔凈的玻璃器皿中可較長時間保存,加入少許防腐劑(如0.02%NaN3)可有利于保存。保存不當時會有細菌生長或有凝集顆粒形成。少量凝集顆粒并不影響以后膠體金的標記,使用時為提高標記效率可先低速離心去除凝集顆粒。
膠體金 - 注意事項
1、氯金酸易潮解,應干燥、避光保存。
2、氯金酸對金屬有強烈的腐蝕性,因此在配制氯金酸水溶液時,不應使用金屬藥匙稱量氯金酸。
3、用于制備膠體金的蒸餾水應是雙蒸餾水或三蒸餾水,或者是高質量的去離子水。
4、是以制備膠體金的玻璃容器必須是清潔的,用前應先經酸洗并用蒸餾水沖凈。是經硅化處理的,硅化方法可用5%二氯甲硅烷的氯坊溶液浸泡數分鐘,用蒸餾水沖凈后干燥備用。
5、膠體金的鑒定和保存:膠體金的制備并不難,但要制好高質量的膠體金卻也并非易事。因此對每次制好的膠體金應加以檢定,主要檢查指標有顆粒大小,粒徑的均一程度及有無凝集顆粒等。