【中國儀器網(wǎng) 使用手冊(cè)】凝膠色譜法又被稱為凝膠色譜技術(shù)，是一種效果好并且操作簡單的分離分析技術(shù)。SRT色譜柱在分析分離操作時(shí)，并不需要有機(jī)溶劑，所以一般對(duì)高分子物質(zhì)有很高的分離效果。SRT凝膠色譜柱現(xiàn)今廣泛應(yīng)用于生物分子及水溶性聚合物的分離和檢測，而該款色譜柱的制作工藝采用可控的化學(xué)修飾技術(shù)，因此可以確保色譜柱與色譜柱之間有著可靠的重現(xiàn)性，并且SRT色譜柱設(shè)計(jì)的大孔體積可保證高的分離容量以及優(yōu)異的分辨率。 以下便是羅列的SRT凝膠色譜柱的一些特點(diǎn)： 1.高柱容量、高分辨率 SRT凝膠色譜柱其精心設(shè)計(jì)的大孔體積可保證高的分離容量以及優(yōu)異的分辨率。 2.pH范圍寬 (pH范圍2-8.5) SRT凝膠色譜柱的pH范圍讓其能夠幫助分析分離各類物質(zhì)。 3.使用壽命長 SRT凝膠色譜柱本身的SRT SEC鍵合固定相采用的是表面修飾技術(shù)，通過在高純度具有良好機(jī)械穩(wěn)定性的硅膠基質(zhì)上，鍵合一層均勻的納米厚度中性親水薄膜而制備成的，因而有較長的使用壽命。 4.低鹽濃度洗脫，適合LC-MS分析 LC-MS分析技術(shù)能夠以非常高的靈敏度同時(shí)測量多種復(fù)雜分析物。同時(shí)成功的LC-M分析具有高度靈敏度，具有可追溯性強(qiáng)和數(shù)據(jù)可靠的特性。因而低鹽濃度洗脫對(duì)分析效率來講有很大的幫助 5.較低的非特異性吸附,對(duì)于生物樣品無強(qiáng)吸附，較高的蛋白回收率及活性回收率 SRT凝膠色譜柱的填料采用化學(xué)鍵合技術(shù)，表面親水涂層覆蓋，因此SRT凝膠色譜柱在使用時(shí)不僅具有較好的穩(wěn)定性，而且對(duì)蛋白等生物樣品的非特異性吸附作用也非常小。 6.解決多維色譜分析應(yīng)用 SRT凝膠色譜柱可以解決多維色譜分析應(yīng)用在實(shí)際操作中的問題。 SRT凝膠色譜柱在使用時(shí)也有些操作需要注意，不然會(huì)影響到SRT凝膠色譜柱的使用效果。以下是SRT凝膠色譜柱的使用注意事項(xiàng)： 1.預(yù)先測量 在SRT凝膠色譜柱安置好了之后，測量就開始了。所以在操作SRT凝膠色譜柱時(shí)，在安置好后，應(yīng)避免溶液的進(jìn)樣或者過快的壓力增長，這些情況可能會(huì)導(dǎo)致SRT凝膠色譜柱柱效下降。 2.防止流速的波動(dòng) SRT凝膠色譜柱很容易受到流速波動(dòng)的影響，所以需要使用沒有壓力波動(dòng)的泵，如果使用有壓力波動(dòng)的泵，那么就需要在泵的出口處連接一個(gè)脈沖節(jié)氣門以防波動(dòng)，并且節(jié)氣門應(yīng)非常耐受腐蝕。 影響色譜柱性能因素
色譜是一種分離分析手段，分離是核心，因此擔(dān)負(fù)分離作用的色譜柱是色譜系統(tǒng)的心臟。對(duì)色譜柱的要求是柱效高、選擇性好，分析速度快等。
一、物理因素：
(1)硅膠純度：硅膠純度和殘留金屬離子濃度，硅膠的雜質(zhì)會(huì)影響化合物的峰形，硅膠表面的金屬含量高會(huì)影響堿性化合物的峰形，易發(fā)生拖尾。
(2)色譜柱尺寸填料床的長度和內(nèi)徑，增加色譜柱長度，可以在一定程度上提高柱效，但也會(huì)升高壓力和導(dǎo)致峰展寬；寬柱徑，提高載樣量，但也會(huì)增加橫向擴(kuò)散，同樣會(huì)導(dǎo)致峰展寬。窄柱徑可以節(jié)約溶劑，可減少橫向擴(kuò)散，但壓力較大，對(duì)系統(tǒng)要求較高。
(3)顆粒形狀及粒徑球形顆粒柱效高、重現(xiàn)性好、柱床結(jié)構(gòu)均勻，不規(guī)則形柱床結(jié)構(gòu)不均勻、流動(dòng)相線速度不均勻，容易譜帶展寬；平均顆粒直徑，粒徑越小，柱效越高，柱壓也越高。粒徑分布越廣則柱效越低，壓力越大。
(4)顆粒表面積：顆粒外表面和內(nèi)部孔表面的總和，以m2/g表示，相對(duì)而言高表面積對(duì)樣品具有較強(qiáng)的保留能力，更大的柱容量和分離度。而低表面積能更快達(dá)到平衡狀態(tài)，更適合梯度洗脫程序。
(5)孔徑：顆粒的孔或腔的平均尺寸，范圍是80~300?，大孔徑的填料顆粒可以延長大分子溶質(zhì)在填料表面的滯留時(shí)間，改善分離，所以大孔徑填料適合分離大分子化合物或者水動(dòng)力體積較大的分子。
二、化學(xué)因素：
(1)鍵合類型及鍵合相：鍵合相分子與基體單點(diǎn)相連為單體鍵合，這種鍵合方式可以提高傳質(zhì)速率，縮短柱平衡時(shí)間；聚合體鍵合為鍵合相分子與基體多點(diǎn)相連，這種鍵合方式可以增加色譜柱穩(wěn)定性，增加載樣量。而鍵合相不同會(huì)直接影響化合物的保留行為。
(2)碳覆蓋率：高碳覆蓋率可以提高分辨率和重現(xiàn)性，但分析時(shí)間長。
(3)封端：硅膠鍵合相填料中有部分未封端的殘留硅羥基，如圖封端可以減輕待測組分與硅膠表面殘留的酸性硅羥基反應(yīng)，改善保留和峰行，這對(duì)于堿性化合物尤其重要。而不同的封端技術(shù)也會(huì)直接影響色譜柱的效能。
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