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總結(jié)ELISA加樣方法技巧

時(shí)間:2017/7/31閱讀:228
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在ELISA中除了包被外,一般需進(jìn)行4-5次加樣。在定性測(cè)定中有時(shí)不強(qiáng)調(diào)加樣量的準(zhǔn)確性,例如規(guī)定為加樣一滴。此時(shí)應(yīng)該使用相同口徑的滴管,保持準(zhǔn)確的加樣姿勢(shì),使每滴液體的體積基本相同。在定量測(cè)定中則加樣量應(yīng)力求準(zhǔn)確。標(biāo)本和結(jié)合物的稀釋液應(yīng)按規(guī)定配制。加樣時(shí)應(yīng)將液體加在孔底,避免加在孔壁上部,并注意不可出現(xiàn)氣泡。

  ELISA中加樣須注意如下問題:

  1.吸取樣品時(shí),加樣槍吸頭不應(yīng)黏附多余的液體;加樣時(shí)不可90度向孔中滴加液體,這樣會(huì)導(dǎo)致液體殘留在吸頭上,加樣不準(zhǔn)確!

  2.不要將吸頭伸入孔中,一方面若接觸孔底可能壓彎吸頭,另一方面可能會(huì)將孔中的液體吹起來,加樣不準(zhǔn)確!

  正確的加樣方法應(yīng)為45度,吸頭貼著孔壁加入,應(yīng)注意:

  1.角度太小,會(huì)使液體殘留在孔壁上,導(dǎo)致加樣不準(zhǔn)確!

  2.吸頭應(yīng)當(dāng)貼著管壁和液面的交界處。

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