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培養(yǎng)基的滅菌并不復(fù)雜,只需要區(qū)分培養(yǎng)基中的哪些成分是可以高溫高壓,哪些不需要.此外還需要控制溫度.
允許高溫高壓的成分在滅菌前配置好,高溫高壓滅菌即可(絕大多數(shù)成分可以直接高溫高壓滅菌),部分成分高溫高壓后會(huì)導(dǎo)致其失效的應(yīng)該在滅菌完成后加入,加入前可以用濾過(guò)除菌法滅菌.
一般來(lái)說(shuō),糖發(fā)酵類(lèi)和部分選擇性高的培養(yǎng)基是在115度溫度下滅菌,其他多數(shù)為121 度.選擇性非常強(qiáng)的培養(yǎng)基甚至只需要煮沸即可.
1.首先將內(nèi)層滅菌筒取出,再向外層鍋加入適量的水,使水面與三角擱架相平為宜。
2.放回滅菌桶,并裝入待滅菌物品。三角瓶與試管口端均不要與桶壁接觸,以免冷凝水淋濕包口的紙而透入棉塞,
3.加蓋,將蓋上的排氣軟管插入內(nèi)層滅菌桶的排氣槽內(nèi)。再以?xún)蓛蓪?duì)稱(chēng)的方式同時(shí)旋緊相對(duì)的兩個(gè)螺栓。
4.通電加熱,并同時(shí)打開(kāi)排氣閥,使水沸騰以排除鍋內(nèi)的冷空氣。待冷空氣*排盡后,關(guān)上排氣閥,讓鍋內(nèi)的溫度隨蒸汽壓力增加而逐漸上升,當(dāng)鍋內(nèi)壓力升到所需壓力時(shí),控制熱源,維持壓力至所需時(shí)間。
5. 滅菌所需時(shí)間到后,切斷電源,讓滅菌鍋內(nèi)溫度自然下降,當(dāng)壓力表的壓力降至0時(shí),打開(kāi)排氣閥,旋松螺栓,打開(kāi)蓋子,取出滅菌物品。如果壓力未降到0時(shí),打開(kāi)排氣閥,就會(huì)因鍋內(nèi)壓力突然下降,使容器內(nèi)的培養(yǎng)基由于內(nèi)外壓力不平衡而沖出燒瓶或試管口,造成棉塞沾染培養(yǎng)基而發(fā)生污染。
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