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ELISA試劑盒然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根過氧化物酶)酶結合物，ELISA試劑盒經第二次孵育后，酶結合物就會與*次孵育結合上的HEV IgM抗體相結合，洗板除去未結合的酶結合物，加入TMB底物溶液，在第三次孵育時會發生酶-底物反應，只有那些含有HEV IgM抗體和酶結合物所形成的復合物的孔才會發生顏色變化，ELISA試劑盒加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應，ELISA試劑盒并在波長: 450nm處測量O.D.值,按照本HEV IgM抗體elisa試劑盒的測試標準, ELISA試劑盒O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認為是初試陽性。
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