ELISA試劑盒色彩的深淺和樣品中的濃度呈比例關系。
這即是為何ELISA檢查試劑盒反響總是需求必定時刻的溫育。
溫育常選用的溫度有43℃、37℃、室溫文4℃（冰箱溫度）等。
以抗體包被的夾心法為例，參加板孔中的標本，其中的抗原并不是都有平等的和固相抗的時機，為加速反響，可進步反響的溫度，有些試驗在43℃進行，但不宜選用更高的溫度。
只有zui靠近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體觸摸。
這是一個逐，因此需經分散才能到達反響的終點。
在其后參加的酶符號抗體與固相抗原的也相同如此。
37℃是試驗室中常用的保溫溫度，也是大多數抗原抗體的適宜溫度。
ELISA試劑盒屬固相免疫測定，抗原、抗體的只在固相表面上發生。
在樹立ELISA辦法作反響動力學研討時，試驗標明，兩次抗原抗體反響通常在37℃經1-2小時，產品的生成可達。
抗原抗體反響4℃更為*，在放射免疫測定中多使反響在冰箱中，以形成zui多的沉積。
再通過溫育和洗刷，去掉未的酶物，然后參加底物A、B，和酶物一起效果。
但因所需時刻太長，在ELISA檢查試劑盒中通常不予選用。
ELISA試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）.已知濃度的規范品、不知道濃度的樣品參加微孔酶標板內進行檢查。
先將*符號的抗體一起溫育。
ELISA試劑盒洗刷后，參加親和素符號過的HRP。