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武漢艾美捷科技有限公司
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閱讀：367發布時間：2021-3-10
調節性T細胞（T-Reg細胞）是一種特殊的T細胞系，對控制自身耐受和炎癥反應至關重要。調節性T細胞對于調節免疫穩態和抑制不同疾病環境中的免疫反應具有至關重要的作用，它能通過抑制CD4+輔助性T細胞和CD8+細胞毒性T細胞的激活和分化，對自體和腫瘤表達的抗原產生反應性。Treg細胞表達特異性轉錄因子Foxp3，因而，CD4+CD25+Foxp3+被認為是Treg細胞的經典標記組合。
但是問題來了，選什么亞型，選什么來源，選什么熒光？
說到這兒，想必大家都很想知道，CD4+CD25+FOXP3+Treg調節性T細胞檢測試劑盒（TregFlowEx Kit）#ED7417能否解決這一難題呢？
CD4+CD25+FOXP3+Treg調節性T細胞檢測試劑盒反應種屬：人；應用類型：流式細胞術，FC；原理： 用于流式細胞術檢測人外周血或臍帶血中的調節性T細胞Treg (CD4 + CD25 + FOXP3 +)的百分比。
CD4+CD25+FOXP3+Treg調節性T細胞檢測試劑盒組分：固定與裂解液、破膜劑、封閉緩沖液、CD4-FITC/CD25-PE抗體預混液，以及FOXP3-APC抗體。
實驗流程如下：
1.表面染色：
1.1在試管中添加10µl CD4 FITC/CD25 PE試劑。
1.2添加100µl人血。
1.3混合均勻，在冰箱（2−8℃）的黑暗中孵育10分鐘。
1.4（可選清洗）洗滌池，加入2mL冷PBS，在300 g下離心5分鐘，4℃。
1.5吸入上清液，立即進入細胞內染色。
2.細胞內染色
2.1加入1mL稀釋的冷固定和溶解液。
2.2混合并在冰箱（2−8℃）黑暗中孵育10分鐘。
2.3添加0.5mL滲透溶液。
2.4混合并在冰箱（2−8℃）黑暗中孵育10分鐘。
2.5在400 g條件下，4℃下將細胞離心5分鐘。（離心前，請勿在固定/燙發混合物中添加任何其他緩沖液）
2.6去除（脫蠟）上清液。
2.7添加50µL冷阻緩沖液。
2.8添加50µL冷PBS。
2.9混合并在冰箱（2−8℃）的黑暗中孵育5分鐘。
2.10加入5μl FoxP3 APC試劑。
2.11混合并在冰箱（2−8℃）的黑暗中孵育30分鐘。
2.12. 用2ml冷PBS沖洗細胞兩次，在400 g下離心5分鐘，4℃。吸入/脫出上清液。
2.13. 在PBS中加入300µl 1%甲醛，并將染色樣品存放在2−8℃下，直到流式細胞儀測定。4小時內分析處理樣品。
結果展示：
使用TregFlowEx試劑盒中對人CD4陽性淋巴細胞進行流式細胞術多色染色。 Treg細胞（CD4 + CD25 + FOXP3 +）位于右上象限。
文章來源：艾美捷科技
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