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上海研盟生物科技有限公司
上海研盟生物提供美國ATCC傳代細胞株“NRK細胞;大鼠腎細胞",進口來源,國內保種,活性保證,咨詢:.
【友情提示】:產品價格與說明書請添加客服或來電詢價,索要說明書;
產品名稱:NRK細胞;大鼠腎細胞
細胞特性
組織來源:腎;正常
培養條件:DMEM +10% FBS
形 態:貼壁;上皮細胞樣
背 景:該細胞源于Osborne-Mendel大鼠的正常腎組織。
含量:>1x10的6次方 個/mL
污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
基本特性:
描述:(1)所有細胞株購自ATCC;
(2) 公司可提供新鮮或凍存細胞株;
(3) 細胞株數量約 1000000個/瓶;
(4) 不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌
密度超過90%,并且細胞狀態很好時,則復溫后2個小時需要立即傳代,提供復蘇好的細胞株,貼壁及懸浮細胞形式,細胞狀態良好,飽滿、光澤度好,*,并提供細胞報價、所需培養基、種屬來源、組織來源、形態、背景資料等。
NRK細胞;大鼠腎細胞復蘇方法細胞用途:僅供科研使用。
1.從液氮罐中取出安剖;有時因安剖未封嚴,浸入了液氮,取出后因安剖內液氮迅速氣化而發生爆炸,因此應帶有防護眼睛和手套。
2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上蓋并不時搖動,盡快解凍。
3.剪開紗布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,凈化臺上打開蓋,用吸管吸出細胞懸液,裝入離心管中,再補加10ml培養液,吹打使細胞懸浮。
4.低速離心(500~1000轉/分)5分鐘,取上清后再重復用培養液漂洗、離心。
5.加入培養液適當稀釋后,再移裝入培養瓶中,置溫箱培養,次日更換一次培養液后再繼續培養。
我公司認為購買細胞的客戶有培養細胞的經驗,客戶收到細胞,原瓶里的培養液可以收集繼續使用,在*次消化傳瓶時,我們要求客戶留一瓶細胞繼續使用我們的培養液,其它瓶的細胞客戶可使用自己的培養液,這樣可減少由于細胞不適應培養液導致的細胞問題。
來源有保障(世界*品牌),狀態且傳代次數好,經測試不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。每管含有細胞數>1000000個,具有高品質、高純度、高穩定性等特點,純化技術保證產品性能。
運輸方式:活細胞運輸(T-25 flasks)。
細胞純度:95%。
細胞來源:ATCC等。
包裝:內層無菌自封袋,防壓泡沫盒,外層防壓保溫氣泡袋,說明書。
用途:本產品只提供給進一步的科研使用,不可應用于治療等其他方面。
細胞凍存
1.將細胞消化下來,移入離心管離心,棄上清
2.準備凍存液比例:50%FBS+40%培養基+10%DMSO(現用現配)
3.加1.5凍存液在離心管中,將細胞吹打均勻,移入凍存管內.
放入-20度冰箱2-4小時后.再放入-80度冰箱過夜,第二天放入液氮罐保存.
本公司的細胞培養操作規程,供參考
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備DMEM培養基(DMEM,GIBCO,貨號11965-092),90%;胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加入3ml此細胞的培養基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養液后吹勻。
4.移入到事先準備好的含有5ml培養基的T-25培養瓶中或含有14ml培養基的T-75培養瓶中培養。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,先要消化處理并進行細胞計數。消化方法按照細胞傳代方法的1-3步驟進行,zui后的重懸液使用血清。懸浮細胞直接計數后離心,用血清重懸浮,加DMSO至zui終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
傳代時間:2-3天 3-5天
傳代比例:1:2~1:3 1:1~1:2
細胞活力:95%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
細胞實驗安全性:所有細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。收到細胞后,在倒置鏡下(是在4X物鏡)觀察整個細胞生長情況。
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