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上海研盟生物科技有限公司
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上海研盟生物科技有限公司優質提供“人抗肝素PF4復合物抗體/HIT抗體（HIT）ELISA試劑盒"，規格48T/96T,提供免費代測服務，有任何質量問題或是檢測不出實驗結果均可免費退換，：.
ELISA試劑盒提供免費檢測服務，我們將根據實驗工作量和難易程度，雙方協定實驗周期，保質保量完成委托實驗，只收取試劑盒的費用，其他輔助試劑全部免費。
【友情提示】：產品價格與說明書請添加: 在線詢價，索要說明書；
【服務優勢】：全程提供ELISA實驗技術指導和ELISA試劑盒免費代測
【樣本儲存】：收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。對收集后當天進行檢測的標本，儲存在4℃備用，如有特殊原因需要周期收集標本，將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復凍融。部分激素類標本需添加*。
ELISA檢測試劑盒技術原理：
(1). 抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。
(2). 結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性。
(3). 酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。
(4). 受檢標本與固相載體表面的抗原或抗體起反應。再加入酶標記的抗原或抗體，也通過反應而結合在固相載體上。
(5). 此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。
(6). 加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產物，產物的量與標本中受檢物質的量直接相關，故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度（pg-ng/ml水平），并且重復性好。以免疫學反應為基礎，將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術
產品介紹：
英文名稱：Human heparin associated antibody,HIT Elisa Kit
中文名稱：人抗肝素PF4復合物抗體/HIT抗體(HIT)ELISA試劑盒
貨號：BYS10431B
報價：：
種屬：人
規格：96T/Kit(8*12 strips)、48T/Kit（8*6 strips）
檢測方法：雙抗夾心法、雙抗體一步夾心法
用途：本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關液體樣本中待測物質的含量。
有效期：6個月
保存條件：2-8℃
操作步驟：
1．使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產生加樣上的誤差。
2．根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定，能使用復孔的盡量做復孔。
3．加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的*標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。
4．甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。
5．每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
6．甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。
8．取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。
9．在450nm波長處測定各孔的OD值。
人抗肝素PF4復合物抗體/HIT抗體(HIT)ELISA試劑盒檢測影響因素分析如下：
一、標本的影響：溶血標本及混有紅細胞的血清采用ELISA法檢測易產生假陽性。可能是溶血血清中含有過氧化酶物質（紅細胞或血紅蛋白中的亞鐵血紅素），在洗滌過程中往往難以*洗脫，它可使H2O2釋放出原生態氧（O），從而催化底物四甲基聯苯胺生成可溶性的有色物質，即顯藍色，產生假陽性［2］。所以嚴重溶血標本禁用。 標本受細菌污染。因菌體中可能含有內源性辣根過氧化物酶，因此，被細菌污染的標本同溶血標本一樣，亦可產生非特異性顯色而干擾測定結果。 標本保存不當。在冰箱中保存過久的標本，在間接法ELISA測定中會導致本底過深、造成假陽性；為克服上述干擾，ELISA試劑盒測定的血清標本宜為新鮮采集；如不能立即測定，5 d內測定的血清標本可存放于4℃，1周后測定的血清標本應低溫凍存；凍存后融解的標本，蛋白質局部濃縮，分布不均，應充分混合后再測定，但混勻時應輕柔，不可強烈振蕩。 塑料試管能吸附抗原物質，樣本久置在塑料管內會使樣本內抗原含量下降造成假陰性。使用真空*；并使用非抗凝標本，肝素抗凝血漿會增加OD值，EDTA、酶抑制劑（如NaN3）可抑制ELISA系統中辣根過氧化物酶活性。 標本凝固不全。 在工作中，有時為了爭取時間快速檢測，常在血液還未開始凝固時即強行離心分離血清，使血清中仍殘留部分纖維蛋白原，在ELISA測定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊，易造成假陽性結果；因此血液標本采集后必須使其充分凝固后再分離血清。
二、 試劑影響 ELISA試劑盒檢測試劑廠家較多；不同廠家出產的試劑
靈敏度與特異性存在一定的差別，使用質劣的試劑必然導致結果的假陽性或假陰性。因此，選擇高質量的上海研盟生物科技有限公司的ELISA試劑盒是保證結果準確的關鍵之一。
三、操作技術的影響：吸量不準確，直接影響檢測結果。因此加樣器也要經常清洗，定期校準。
溫育影響：抗原抗體結合及酶促反應對溫度有嚴格要求，酶標板周圍與內部孔升降溫速率不同，造成周邊與內部孔結果差異；干浴與水浴存在明顯的差異，盡可能使用水浴，并要求固相板放入水中，減少受熱不均，貼密封膜，防止污物浸入。
加樣次序影響：有時我們在加樣過程中，常常會遇到個別標本未離心等情況，為了節約時間，往往這時我們會先加酶結合物，然后等標本分離好后再加標本，這樣，竟常常會造成HBeAb和HBcAb的假陰性。因為HBeAb和HBcAb都是競爭抑制法，先加入酶標記的抗體，首先與固相載體上的抗原結合，待加入顯色劑后，因酶的存在而顯色，故呈陰性［3］。
綜上所述，對臨床檢驗ELISA測定中出現的假陽性或假陰性結果，要從多方面進行分析除試劑因素和操作因素之外，更多的應從標本因素方面進行分析，并采取相應措施排除干擾作用。
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