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上海研盟生物科技有限公司
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“Anti-TGF Beta R3抗體,轉移生長因子β受體3抗體（TGF-βRⅢ，TGFβRⅢ）"2A抗體規格0.1ml、0.2ml、1ml，抗體產品有效期一年，質保三個月，質保期內出現任何質量問題或是出不了實驗結果均可免費退換：
上海研盟生物科技有限公司Anti-TGF Beta R3抗體,轉移生長因子β受體3抗體（TGF-βRⅢ，TGFβRⅢ）*，主要應用于WB、IHC、IF、ELISA、流式細胞術等實驗中。說明書隨貨發送，您也可以直接我司在線客服索取。客服
簡單介紹：
中文名稱：轉移生長因子β受體3抗體（TGF-βRⅢ，TGFβRⅢ）
英文名稱：Anti-TGF Beta R3
產品編號：byk-1910R
產品別名：Beta glycan; Betaglycan; Betaglycan proteoglycan; BGCAN; TGF beta receptor type 3; TGF beta receptor type III; TGF beta Receptor III; TGFB R3; TGFBR 3; TGFBR3; TGFR 3; TGFR3; Transforming Growth Factor Beta Receptor III; Transforming growth factor beta receptor III betaglycan 300kDa. TGF-βRⅢ; TGFβRⅢ.
產品用途：科研實驗
產品價格：請報價
說明書：請添加客服直接索取
抗體來源：該指標有兩種產品，一種是兔來源抗體，一種是鼠來源抗體
克隆類型：兔來源為多克隆抗體，鼠來源單克隆抗體
交叉反應：請索取說明書查看
性 狀：Lyophilized or Liquid
濃 度：1mg/1ml
亞 型:IgG
純化方法: affinity purified by Protein A
儲 存 液: 0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol
保存條件: Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.
Anti-TGF Beta R3抗體,轉移生長因子β受體3抗體（TGF-βRⅢ，TGFβRⅢ）產品介紹：Membrane Receptors
Transforming growth factor beta is a multifunctional cytokine known to modulate several tissue development and repair processes, including cell differentiation, cell cycle progression, cellular migration, adhesion, and extracellular matrix production. There are 3 forms encoded by separate genes TGFB1, TGFB2, and TGFB3. The diverse effects of TGF beta are mediated by the TGF beta receptors and cell surface binding proteins. In addition to type I TGF beta receptor (TGFBR1) and type II (TFGBR2), type III (TGF beta III receptor) has been identified. It is a glycoprotein that binds TGF beta and exists in both a membrane bound and a soluble form. It may serve as a receptor accessory molecule in both the TGF beta and fibroblast growth factor systems. TGF beta III receptor lacks a recognizable signaling domain and has no clearly defined role in TGF beta signaling. Endothelial cells undergoing epithelial mesenchymal transformation express TGF beta III receptor, and TGF beta III receptor specific antisera inhibits mesenchyme formation and migration. Misexpression of TGF beta III receptor in nontransforming ventricular endothelial cells conferrs transformation in response to TGFB2. These results support a model where TGF beta III receptor localizes transformation in the heart and plays an essential, nonredundant role in TGF beta signaling.
TGF beta III receptor, or beta glycan, can function as an inhibin coreceptor with ActRII. TGF beta III receptor binds inhibin with high affinity and enhances binding in cells coexpressing ActRII and TGF beta III receptor. Inhibin forms crosslinked complexes with both recombinant and endogenously expressed TGF beta III receptor and ActRII. TGF beta III receptor confers inhibin sensitivity to cell lines that otherwise respond poorly to this hormone. The ability of TGF beta III receptor to inhibit or to facilitate inhibin antagonism of activin provides a variation on the emerging roles of proteoglycans as coreceptors modulating ligand receptor sensitivity, selectivity, and function. Beta arrestin 2 binds to TGF beta III receptor, triggered by phosphorylation of the receptor on its cytoplasmic domain, likely at threonine 841. Phosphorylation is mediated by TGFBR2, which is itself a kinase, rather than by a G protein coupled receptor kinase. Association with beta arrestin 2 leads to internalization of both receptors and downregulation of TGF beta signaling. The regulatory actions of beta arrestins are broader than previously appreciated, extending to the TGF beta receptor family as well.
Western Blotting 具體實驗步驟
Western，也稱Western blot、Western blotting、Western 印跡，是用抗體檢測蛋白的重要方法之一。
Western可以參考如下步驟進行操作：
1、收集蛋白樣品(Protein sample preparation)
可以使用適當的裂解液裂解貼壁細胞、懸浮細胞或組織樣品。對于某些特定的亞細胞組份蛋白，例如細胞核蛋白、細胞漿蛋白、線粒體蛋白等，可以參考相關文獻提取這些亞細胞組份蛋白，也可以使用試劑盒進行抽提。
收集完蛋白樣品后，為確保每個蛋白樣品的上樣量*，需要測定每個蛋白樣品的蛋白濃度。根據所使用的裂解液的不同，需要采用適當的蛋白濃度測定方法。因為不同的蛋白濃度測定方法對于一些去垢劑和還原劑等的兼容性差別很大。
2、電泳(Electrophoresis)
（1）、SDS-PAGE凝膠配制
SDS-PAGE凝膠可以參考一些文獻資料進行配制，也可以使用博研生物生產的SDS-PAGE凝膠配制試劑盒。該試劑盒提供了除水和配膠器具外的所有試劑以及配制各種濃度SDS-PAGE的配方。
（2）、樣品處理
在收集的蛋白樣品中加入適量濃縮的SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液。例如2X或5X的SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液。使用5X的SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液可以減小上樣體積，在相同體積的上樣孔內可以上樣更多的蛋白樣品。5X的SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液可以參考相關文獻資料配制，也可以使用我公司生產的SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液(5X) 。100℃或沸水浴加熱3-5分鐘，以充分變性蛋白。
（3）、上樣與電泳
冷卻到室溫后，把蛋白樣品直接上樣到SDS-PAGE膠加樣孔內即可。為了便于觀察電泳效果和轉膜效果，以及判斷蛋白分子量大小，使用預染蛋白質分子量標準。
電泳時通常*在上層膠時使用低電壓恒壓電泳，而在溴酚藍進入下層膠時使用高電壓恒壓電泳。對于Bio-Rad的標準電泳裝置或類似電泳裝置，低電壓可以設置在80-100V，高電壓可以設置在120V左右。SDS-PAGE可以采用普通的電泳儀就可以滿足要求。為了電泳方便起見，也可以采用整個SDS-PAGE過程恒壓的方式，通常把電壓設置在100V，然后設定定時時間為90－120分鐘。設置定時可以避免經常發生的電泳過頭。
通常電泳時溴酚藍到達膠的底端處附近即可停止電泳，或者可以根據預染蛋白質分子量標準的電泳情況，預計目的蛋白已經被適當分離后即可停止電泳。
3、轉膜(Transfer)
我們*在Western實驗中選用PVDF膜。硝酸纖維素膜(NC膜)或PVDF膜（二氟化樹脂膜膜孔徑：0.45um)也可以使用，但硝酸纖維素膜比較脆，在操作過程中特別是用鑷子夾取等過程中容易裂開。膜的使用請參考生產商的*使用步驟。
通常如果使用Bio-Rad的標準濕式轉膜裝置，可以設定轉膜電壓120V，轉膜時間為30-60分鐘。具體的轉膜時間要根據目的蛋白的大小而定，目的蛋白的分子量越大，需要的轉膜時間越長，目的蛋白的分子量越小，需要的轉膜時間越短。
在轉膜過程中，特別是高電流快速轉膜時，通常會有非常嚴重的發熱現象，把轉膜槽放置在冰浴中進行轉膜。轉膜的效果可以觀察所使用的預染蛋白質分子量標準，通常分子量zui大的1-2條帶較難全部轉到膜上。轉膜的效果也可以用麗春紅染色液對膜進行染色，以觀察實際的轉膜效果。也可以用考馬斯亮藍快速染色液對完成轉膜的SDS-PAGE膠進行染色，以觀察蛋白的殘留情況。
4、封閉(Blocking)
轉膜完畢后，立即把蛋白膜放置到預先準備好的Western洗滌液中，漂洗1-2分鐘，以洗去膜上的轉膜液。從轉膜完畢后所有的步驟，一定要注意膜的保濕，避免膜的干燥，否則極易產生較高的背景。
用微型臺式真空泵吸盡洗滌液，加入Western封閉液，在搖床上緩慢搖動,室溫封閉60分鐘。對于一些背景較高的抗體，可以在4℃ 封閉過夜。
5、一抗孵育(Primary antibody incubation)
參考一抗的說明書，按照適當比例用Western一抗稀釋液稀釋一抗。
用微型臺式真空泵吸盡封閉液，立即加入稀釋好的一抗，室溫或4℃在側擺搖床上緩慢搖動孵育一小時。如果一抗孵育一小時效果不佳，可以在4℃緩慢搖動孵育過夜?；厥找豢埂＜尤隬estern洗滌液，在側擺搖床上緩慢搖動洗滌5-10分鐘。吸盡洗滌液后，再加入洗滌液，洗滌5-10分鐘。共洗滌3次。如果結果背景較高可以適當延長洗滌時間并增加洗滌次數。
6、二抗孵育(Secondary antibody inucubation)
參考二抗的說明書，按照適當比例用Western二抗稀釋液稀釋辣根過氧化物酶(HRP)標記的二抗。
用微型臺式真空泵吸盡洗滌液，立即加入稀釋好的二抗，室溫或4℃在側擺搖床上緩慢搖動孵育一小時?；厥斩?，加入Western洗滌液，在側擺搖床上緩慢搖動洗滌5-10分鐘。吸盡洗滌液后，再加入洗滌液，洗滌5-10分鐘。共洗滌3次。如果結果背景較高可以適當延長洗滌時間并增加洗滌次數。
7、蛋白檢測(Detection of proteins)
參考相關說明書，使用BeyoECL, Western 熒光檢測試劑等ECL類試劑來檢測蛋白。
洗片時可以使用X光片自動洗片機。如果沒有自動洗片機，可以用顯影定影試劑盒自行配制顯影液和定影液進行手工洗片。
8、膜的重復利用(Membrane recovery)
如果蛋白樣品非常寶貴，可以使用Western一抗二抗去除液處理蛋白膜，以重復利用蛋白膜。
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