操作ELISA試劑盒各個(gè)步驟的注意要點(diǎn)
在運(yùn)用前與室溫平衡，再進(jìn)行測(cè)定。在ELISA試劑盒中通常有兩次抗原抗體反響，即加標(biāo)本和加酶物后。抗原抗體反響的完結(jié)需要有必定的溫度和時(shí)刻，這一保溫進(jìn)程稱為溫育（incubation），有人稱之為孵育，在ELISA試劑盒中似不恰當(dāng)。
ELISA試劑盒屬固相免疫測(cè)定，抗原、抗體的只在固相表面上發(fā)作。以抗體包被的夾心法為例，參加板孔中的標(biāo)本，其間的抗原并不是都有均等的和固相抗的時(shí)機(jī)，只要zui靠近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。
假如對(duì)試劑預(yù)備不太注意，在試驗(yàn)時(shí)將試劑從冰箱中拿出來即用，而疏忽了這種做法有可能影響后邊溫育時(shí)刻不行的疑問影響后邊的操作。測(cè)定中試劑的預(yù)備zui為要害的是，在試驗(yàn)開端前，將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20min以上后，以使試劑盒
2. 當(dāng)混合蛋白溶液時(shí)應(yīng)盡量輕緩，防止起泡。
3. 洗刷進(jìn)程十分重要，不充分的洗刷易形成假陽性。
4. 一次加樣時(shí)刻操控在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，引薦運(yùn)用排槍加樣。
5. ELISA試劑盒請(qǐng)每次測(cè)定的一起做規(guī)范曲線，做復(fù)孔。
6. 如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高，請(qǐng)先稀釋后再測(cè)定。
7. 在制造規(guī)范品、檢查溶液工作液時(shí)，請(qǐng)以相應(yīng)的稀釋液制造，ELISA試劑盒不能混雜。
8. 底物請(qǐng)避光保留。
9、操控好每一步的操作時(shí)刻。
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