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細(xì)胞化學(xué)染色方法實驗原理

閱讀：358發(fā)布時間：2016-11-10

在做細(xì)胞化學(xué)染色時，實驗原理如下：

1. 細(xì)胞經(jīng)甲基綠一呱咯寧混合液處理后，其中的 DNA 和 RNA 出現(xiàn)不同的呈色反應(yīng)，一般認(rèn)為這是由于帶有負(fù)電荷的核酸對堿性染料呱咯寧和甲基綠具有親和力，且這兩種染料的作用有選擇性，甲基綠染高聚分子的 DNA 呈藍(lán)綠色，呱咯寧染低聚分子的 RNA 呈紅色。由此對細(xì)胞中的 DNA 和 RNA 進行定位、定性、和定量分析。
2. 由于不同的蛋白質(zhì)分子所帶的堿性和酸性基團的數(shù)目不同，在 pH 值不同的溶液中，蛋白質(zhì)分子所帶的凈電荷多少不同。如在生理條件下，整個蛋白質(zhì)所帶負(fù)電荷多，則為酸性蛋白質(zhì)；帶正電荷多，則為堿性蛋白質(zhì)。據(jù)此，可將標(biāo)本經(jīng)三氯醋酸處理提出核酸后，用不同 pH 值的固綠染液分別染色，細(xì)胞內(nèi)的酸性蛋白和堿性蛋白質(zhì)顯示出來。
3. 過氧化物酶能把許多胺類氧化為有色化合物，用聯(lián)苯胺處理標(biāo)本，細(xì)胞內(nèi)的過氧化物酶能把聯(lián)苯胺氧化為藍(lán)色的聯(lián)苯胺藍(lán)，進而變?yōu)樽厣a(chǎn)物，因而可以根據(jù)顏色反應(yīng)來判定過氧化物酶的有無或多少。

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