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血清保存:
必須貯存于–20 ~ -70℃;貯存于4℃時,請勿超過一個月。(溫馨提示:網(wǎng)絡(luò)信息僅供參考,細胞培養(yǎng)用的血清、培養(yǎng)基保存、貨號等問題通派細胞庫管理員,獲取準(zhǔn)確的細胞信息)
一次實驗無法用完一瓶血清時,可將40~45 ml分裝于無菌50 ml 離心管中, 因血清結(jié)凍時體積會增加約10%,所以必須預(yù)留膨脹體積的空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。
注意:因不是所有細胞都很耐受不挑血清,故建議客戶購買細胞時也要注意準(zhǔn)備并保證血清的質(zhì)量和來源是血源血清!
研究創(chuàng)建了一種多能干細胞基因組編輯平臺:iCRISPR,這一平臺能快速,的敲除干細胞中的基因,而且還能在干細胞分化過程中,進行階段特異性的基因敲除,這將在人類疾病復(fù)雜病理研究中大放異彩。
(人CAL-78細胞 來源:通派細胞庫 人軟骨肉瘤細胞)
人體多能干細胞(hPSCs)不僅能被用于臨床的再生研究應(yīng)用中,而且也能作為解析復(fù)雜性狀和特征的*平臺,闡明其背后的基因和分子途徑。開發(fā)多種遺傳操控方法,但是這些方法依然存在各種問題,需要快速,具有可操控性的生物學(xué)手段。
(人RERF-LC-Ad2細胞 來源:通派細胞庫 人肺腺癌細胞)
研究利用CRISPR和TALEN,這兩種備受關(guān)注的基因組編輯技術(shù),研發(fā)出了一種人類多能干細胞基因組編輯平臺。研究人員將這一平臺稱為iCRISPR。
(小鼠Y1細胞 來源:通派細胞庫 小鼠腎上腺皮質(zhì)瘤細胞)
iCRISPR能用于基因功能喪失研究中,快速,的敲除人體多能干細胞中的等位基因,也可以針對一些的疾病模型,通過特定的核苷酸變換,進行多能干細胞純合體敲除。
(人AsPC-1細胞 來源:通派細胞庫 人胰腺癌細胞)
通過進一步實驗,研究人員驗證了雙重和三重基因敲除hPSC細胞系一步法的有效性,同時也證明了在多能干細胞分化過程中能進行階段特異性誘導(dǎo)基因敲除,這對于發(fā)育生物學(xué)研究來說意義重大。
(人MPanc-96細胞 來源:通派細胞庫 人腺腺癌細胞)
研究指出,iCRISPR平臺尤其適合用于解析人類疾病研究中的復(fù)雜遺傳相互作用,以及多效性基因功能,這將有助于進行人體多能干細胞高通量遺傳分析。
(人HCT-8細胞 HRT-18細胞 來源:通派細胞庫 人回盲腸癌細胞)
CRISPRi,他們發(fā)現(xiàn)當(dāng)缺失核酸內(nèi)切酶活性的Cas9與一種導(dǎo)向RNA共表達時候,會產(chǎn)生一種DNA識別復(fù)合物,這種復(fù)合物能特異性干擾轉(zhuǎn)錄延伸,RNA聚合酶結(jié)合,或轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合。
(人SK-N-BE細胞 來源:通派細胞庫 人神經(jīng)母細胞瘤細胞)
由此研發(fā)出這種CRISPRi系統(tǒng),這一系統(tǒng)能有效抑制大腸桿菌中靶向基因的表達,并且不會出現(xiàn)脫靶效應(yīng)。而且利用CRISPRi,還可以同時抑制多個靶基因,這種作用也是可逆。研究還證明,該系統(tǒng)也適用于哺乳動物細胞中的基因表達抑制。
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